“蓝天使”玉簪组培快繁适宜培养基配方筛选试验初报

陈慧兰 陈 权 （上海孙桥现代温室种子种苗有限公司，上海市浦东新区 201210）

李文剑 （上海孙桥溢佳农业技术股份有限公司，上海市浦东新区 201210）

李洪霞 （上海孙桥现代农业联合发展有限公司，上海市浦东新区 201210）

玉簪（Hosta plantaginea）属宿根草本，耐旱、耐寒、喜阴，是一种重要的园林地被植物。玉簪除可供观赏外，其鲜花含有芳香油，可用于提取制作芳香浸膏；同时，玉簪的嫩芽可供食用，全草可入药。因此，近年来，玉簪已成为极具开发前景的野生花卉和药用植物，我国也陆续从美国和欧洲引进了不少优良品种进行栽培试验。目前，已有部分品种在国内园林绿化上获得应用，其中，“蓝天使”玉簪备受关注。近年来，为促进玉簪的推广应用，常使用组培方式进行快速、大量繁殖玉簪。在此背景下，笔者拟以“蓝天使”玉簪为试验材料，通过分析不同培养基对其愈伤组织的形成、芽的分化增殖和生根等的影响，筛选出适合“蓝天使”玉簪组培快繁的最佳培养基配方。现将相关试验结果报道如下。

1 材料与方法

1.1 材 料

选择“蓝天使”玉簪当年生无菌分株基部块茎作试验材料。

1.2 培养条件

以MS为基本培养基，附加不同种类和浓度的激素进行处理，另加3%蔗糖和0.6%琼脂粉（生根阶段的蔗糖浓度降为2%，基本培养基为1/2 MS），pH为5.8；培养过程中，光照时数为12 h/d，光照强度为2 500～3 000 Lux，温度控制在（25±1) ℃。

1.3 试验设计

1.3.1 芽诱导培养基筛选

共设7个处理，分别为：（1）MS+0.2 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA；（2）MS+0.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA；（3）MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA；（4）MS+1.5 mg/L 6-BA +0.1 mg/L NAA；（5）MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA；（6）MS+1.5 mg/L 6-BA +0.5 mg/L NAA；（7）MS+2.0 mg/L 6-BA +0.5 mg/L NAA。

1.3.2 芽增殖培养基筛选

共设8个处理，分别为：（A）MS+0.2 mg/L 6-BA；（B）MS+0.5 mg/L 6-BA；（C）MS+1.0 mg/L 6-BA；（D）MS+1.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IAA；（E）MS+1.5 mg/L 6-BA；（F）MS+2.0 mg/L 6-BA；（G）MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IAA ；（H）MS+0.5 mg/L ZT+0.1 mg/L IAA。

1.3.3 生根培养基筛选

共设9个处理，分别为：①1/2 MS+0.2 mg/L IBA；②1/2 MS+0.2 mg/L IAA；③1/2 MS+0.2 mg/L NAA；④1/2 MS+0.5 mg/L IBA；⑤1/2 MS+0.5 mg/L IAA；⑥1/2 MS+0.5 mg/L NAA；⑦1/2 MS+1.0 mg/L IBA；⑧1/2 MS+1.0 mg/L IAA；⑨1/2 MS+1.0 mg/L NAA。

1.3.4 计算公式

芽诱导率（%）＝（有芽生成的块茎数÷无菌块茎数）×100；芽分化增殖比例=接种数量÷分切后数量，在转入增殖培养后进行统计；生根率（%）=（生根苗数量÷接种数量）×100，在生根单株转入生根培养基30 d后进行统计，以每株苗长根2～3条、根长0.5～1 cm为生根苗。

2 结果与分析

2.1 不同处理对块茎形成愈伤组织和芽诱导的影响

从玉簪一年生无菌苗上取其基部块茎，接种到不同培养基上，每个培养基接种20个块茎，培养培养30 d后观察统计其愈伤组织和芽诱导情况，结果见表1。

表1 不同处理对玉簪愈伤组织的形成和芽诱导的影响

由表1可知，各处理均可出芽。处理(1)、(2)基本上不形成愈伤组织，每个块茎均可出苗，苗粗壮但出苗少；处理(5)可形成较好的愈伤组织，愈伤组织生成率达到100%，出芽数量多；处理(6)的愈伤组织块大，但有玻璃化现象，出苗比处理(5)少。由此分析可知，NAA有利于愈伤组织的形成，6-BA有利于芽的形成，且能促进芽的分化生成，但高剂量的NAA和6-BA组合会形成过多愈伤组织并出现玻璃化现象。在本试验中，使用2.0 m g/L 6-BA和0.1 mg/L NAA的组合可得到满意的愈伤组织和芽的诱导效果。

2.2 不同处理对芽增殖的影响

将分化并带有芽的愈伤组织块（每块愈伤组织带有1个芽）接种在不同增殖培养基上，每个培养基接种20块，培养30 d后观察芽增殖情况，结果见表2。

由表2可知，各处理间芽的增殖比例存在极显著差异，其中处理（A）、（B）、（C)的芽增殖比例较处理（D）、（E）、（F）、（G）、（H)低；处理（D）、（H）的芽增殖比例达4以上，且分化芽的质量较好；处理（F）、（G）的芽增殖比例高，但因激素使用过量，芽的高度不如处理（D）、（H），且有玻璃化现象；处理（G）使用了玉米素，价格昂贵。由此可知，6-BA用量是芽分化增殖的关键，但剂量过高易出现玻璃化现象。在本试验中，使用1.5 mg/L 6-BA与0.1 mg/L IAA的组合可提高芽的均匀度和高度，从而提高分化芽的质量，达到较好的增殖效果。

表2 不同处理对玉簪芽增殖的影响

2.3 不同处理对生根的影响

在增殖培养形成的大量丛生芽中，选择生长较好的单株芽（芽高3～5 cm），接种于不同生根培养基上，每个培养基接种100株，培养30 d后观察统计生根情况，以单株长根2～3条、根长0.5～1.0 cm为合格生根苗，结果见表3。

表3 不同处理对玉簪生根的影响

由表3可知，处理④、⑥、⑦、⑨均有较好的生根效果。其中，处理④、⑦均选用IBA，浓度分别为0.5 mg/L和1.0 mg/L，但使用0.5 mg/L IBA的生根效果优于使用1.0 mg/L IBA；处理⑥与处理⑨均选用NAA，浓度分别为0.5 mg/L和1.0 mg/L，虽然NAA也能得到100%的生根率，但因其基部有愈伤组织生成，生根效果不如IBA。因此，在本试验中，以1/2 MS+0.5 mg/L IBA为最佳的生根培养基。

3 结 论

试验结果表明，在玉簪基部块茎诱导阶段，以培养基MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+3%蔗糖的芽诱导效果最好；在芽分化增殖阶段，以培养基 MS+1.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IAA+3%蔗糖的芽增殖效果最佳；在生根阶段，以培养基1/2 MS+0.5 mg/L IBA+2%蔗糖的生根效果最好。