女性HPV感染及基因分型年龄分布的临床调查

李瑞敏 宋文月 尹保娜 安 芳 褚艳蓉 张 莉

人类乳头瘤病毒（human papillomavirus，HPV）感染是宫颈癌及癌前病变的主要病因，预防和监测HPV感染可有效防治宫颈癌。HPV感染率及亚型分布在不同人群、不同地域、年龄之间存在明显的差异［1，2］。本研究通过对焦作市妇幼保健院18 336例妇科门诊患者宫颈刷片标本进行HPV亚型检测，分析HPV感染及基因分型年龄分布情况，为该地区宫颈癌筛查和防治工作提供参考依据。

1 资料与方法

1.1研究对象 2015年1月～2017年12月在焦作市妇幼保健院妇科门诊就诊并参加HPV分型检测的女性患者18 336例，年龄15～89岁。分为5个年龄段：＜26、26～35、36～45、46～55和 ＞55岁。

1.2样本采集 暴露宫颈，用棉签擦去分泌物，用HPV采样刷在宫颈口顺时针方向旋转5周，缓缓取出采集刷，将采样刷放入取样管中，-20℃保存，避免反复冻融，1周内检测完毕。

1.3检测方法 具体操作按照21种（HPV）分型检测试剂盒（广东凯普生物科技股份有限公司）说明进行病毒DNA提取、PCR扩增、杂交、显色，诊断脱落细胞标本中的21种HPV病毒DNA分子的存在。

1.4统计方法 应用SPASS 19.0软件，计数资料以%表示；采用χ2检验；P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1HPV亚型感染分布情况 对18 336例妇科门诊患者进行HPV分型检测，HPV43未被检出，其余20种亚型均被检出（见图1）。HPV感染前3位的亚型为HPV16（5.2%）、HPV52（3.5%）和 HPV58（2.9%），均为高危亚型。

图1 21种HPV亚型感染分布

2.2HPV感染率情况 18 336例的总感染率为22.3%（4084/18 336）。2015、2016、2017年感染率分别为 24.2%（1106/4571）、21.2%（1249/5891）、18.9% （1488/7874）；HPV感染率呈下降趋势，三年比较差异有统计学意义（P＜0.05）；HPV感染前3位的亚型HPV16、HPV52、HPV58三年比较无下降趋势（图2）。

图2 2015、2016、2017年度HPV感染率

2.3HPV感染年龄分布 总检测样本年龄段中：＜26岁组感染率最高（32.9%，250/779），其次为 ＞55岁段（27.0%，210/778），与其他3年龄段比较差异有统计学意义（P＜0.05）；5组年龄段感染率呈U型分布（图3-A）。

HPV感染前3位的亚型 HPV16、HPV52、HPV58各年龄断均呈U型分布，HPV16在各段中感染率均为最高（图3-B）。

HPV感染患者中单纯高危亚型、高+低危亚型、低危亚型感染率分别为18.4%、1.7%、2%，3组感染率在不同年龄段亦均呈现出U型趋势分布，且在不同年龄段均以单纯高危亚型感染为主（图3-C）。

HPV感染患者中一、二、三重感染的感染率分别为16.8%、4.2%、0.5%。3组感染率在不同年龄段亦均呈现出U型趋势分布，且在不同年龄段均以一重感染为主（图3-D）。

图3 HPV感染年龄分布

3 讨论

目前，宫颈癌是女性最常见的生殖道恶性肿瘤，其发病率仅次于乳腺癌，居全球第2位。1977年，著名学者zur Hausen就提出，HPV感染可能会导致宫颈癌。1995年，国际癌症研究中心正式宣布宫颈HPV感染为宫颈癌发病的主要原因。2005年，宫颈HPV检测被推荐为宫颈癌筛查方法。2014年，世界卫生组织宣布HPV分型检测是宫颈癌筛查的重要初筛手段。因此，研究HPV感染趋势、亚型分布特征、区域流行情况，对于HPV疫苗研发、数据监控及宫颈癌的防治具有重要的临床指导意义。

根据HPV的致病性，HPV分为与恶性肿瘤有关的高危亚型和与良性病变有关的低危亚型。本研究采用的导流杂交技术可检测出21种亚型，其中包括15种高危亚型（16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68）和 6种低危亚型（6、11、42、43、44、81/CP8304）。HPV感染亚型分布有一定区域性。全球范围内最主要的基因型是HPV16型，第2位是HPV18型［3］，而本研究中HPV感染前3位的亚型依次为HPV16、52、58，与其有一定差异，但与我国相关文献报道基本一致［4～6］，提示焦作地区可能与我国其他地区感染亚型基本一致，应以这三种亚型为主要预防对象。

本研究中门诊患者总HPV感染率为22.3%，2015、2016、2017年HPV感染率分别为24.2%、21.2%、18.9%，呈明显下降趋势。其原因可能与政府不断的进行宫颈癌知识宣传教育和宫颈癌普查有关。但近三年HPV16、52、58三种高危亚型并无下降趋势，进一步提示其为主要预防对象。

HPV感染率在不同年龄段存在差异，本研究中＜26岁段感染率最高（32.9%），随着年龄的增加，感染率逐渐降低，46岁以后感染率开始回升，和国内外一些研究结果相一致［7，8］。女性26岁前是 HPV感染的高峰期，可能是由于年轻女性性生活比较频繁，卫生习惯和健康意识薄弱，宫颈炎发病率较高，宫颈上皮黏膜屏障遭到破坏后，病毒易入侵所致。但年轻女性的的HPV感染多为一过性感染，大多数患者经过一定时间通过自身免疫能将HPV病毒自然清除。女性55岁后是HPV感染的另一高峰期，可能是由于该年龄段女性自身免疫力下降易受病毒入侵、且对病毒清除能力下降所致［9］。这就提示年轻女性和老年女性是HPV感染的高发人群，宫颈癌筛查时要多给以关注。

不同亚型HPV感染对宫颈细胞恶性病变的发生、发展有不同的影响，高危型HPV感染常导致宫颈癌［10］。本研究中高危型检测结果还显示，门诊患者中高危型HPV感染率（18.7%）明显高于高危+低危型（1.4%）和低危亚型（2%）。在各个年龄段中，前三位的HPV感染亚型亦呈现出U型趋势分布。其提示年轻女性是高危HPV感染的好发年龄段，这可能是导致近些年宫颈癌发病率升高、发病年龄提前且逐渐出现年轻化趋势的原因。HPV感染有一重感染，亦有多重感染，多重感染因患者携带病毒量多，易发生癌变。本研究中虽然一重感染多，但多重感染亦呈现U型分布，因此年轻女性和老年女性癌变几率较大。这也提示我们在宫颈癌筛查时要多关注年轻女性和老年女性。

综上所述，本临床调查显示HPV感染以HPV16、52、58为主要亚型，在不同年龄组分布存在差异，在宫颈癌筛查中对年轻女性或老年女性的患者要多给予关注。