3 108例福州地区围产期孕妇无乳链球菌的检出率和耐药性分析

谢海花

福建省立医院南院 福建省立金山医院检验科，福建省福州市 350028

无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)又称B群链球菌(Group B streptococcus，GBS)，是导致围产期母婴感染的重要病原菌之一，占16%～61%[1]。孕妇感染后可引起羊膜炎、伤口感染、血流和尿路感染等，新生儿感染可引起肺炎、脑膜炎和败血症等，是孕妇流产、胎膜早破和危及新生儿生命的重要原因[2-3]。统计分析，新生儿有50.0%的概率从产道携带无乳链球菌，其中有2%的概率会引起新生儿感染[4]。因此，实时监测孕产妇无乳链球菌的产道感染情况和耐药状况，并在分娩前进行干预，可有效预防侵袭性新生儿GBS感染，对保证孕妇和新生儿健康具有重要的临床意义。笔者对本院门诊的3 108例孕35～37周的孕妇无乳链球菌的带菌情况进行了初步研究，探讨福州地区育龄女性围产期无乳链球菌的感染情况，并分析其药敏结果，预防新生儿无乳链球菌感染性疾病的发生。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2018年1—11月在我院门诊健康检查的孕妇共3 108例。入组标准：(1)孕期35～37周；(2)患者接受生殖道标本培养。排除标准：(1)伴有其他泌尿生殖道感染性疾病；(2)长期使用抗生素或激素类药物。

1.2 标本来源 采集阴道分泌物标本共3 108份。阴道分泌物采集方法：患者取膀胱截石位，消毒外阴并清除外阴分泌物，取样前对阴道未做清洁处理，使用一次性采样无菌拭子插入阴道1/3处采集分泌物，采集后置于COPAN运送培养基中立即送检培养。

1.3 仪器和试剂 哥伦比亚血平板购自郑州市贝瑞特生物技术有限公司，GBS显色培养基购自郑州安图生物工程股份有限公司。革兰氏阳性细菌鉴定卡GP、革兰阳性菌药敏卡AST-GP67和全自动微生物鉴定及药敏分析系统(VITEK2-Compact)购自法国生物梅里埃公司。

1.4 细菌的培养与鉴定 血琼脂平板和GBS显色培养基接种标本，并置于培养箱(温度35℃，二氧化碳浓度5%)中培养24h。对血平板上β-溶血的可疑菌落进行革兰染色和触酶试验，对革兰染色阳性和触酶试验阴性者进行协同溶血试验(CAMP)，指示菌株为金黄色葡萄球菌ATCC 25923(购自国家卫计委临床检验中心)。同时直接选取GBS显色平板上的浅粉到红色典型菌落使用VITEK2-Compact全自动微生物分析仪与CAMP试验进一步进行菌种鉴定。CAMP试验与上机鉴定均符合者确认为无乳链球菌。

1.5 细菌的药敏试验 细菌的耐药性检测使用VITEK2-Compact全自动微生物分析仪和革兰阳性球菌药敏卡(AST-GP67)，检测药物包括：青霉素G、氨苄青霉素、环丙沙星、左氧氟沙星、莫西沙星、氯洁霉素、奎奴普丁/达福普汀、力奈唑胺、万古霉素、四环素、替加环素。药物敏感性判定均采用美国临床实验室标准委员会(Clinical and Laboratory Standards Institute,CLSI)2017年标准进行，分为敏感(S)、中介(I)、耐药(R)。认定耐药率=R/(R+I+S)。

2 结果

2.1 无乳链球菌检出情况 通过在血平板和GBS显色平板上直接接种，3 108例围产期孕妇共检出无乳链球菌173株，阳性率为5.57%(173/3 108)，其中28例伴有真菌感染。血平板上培养出的GBS为典型的β-溶血性菌落 (图1A)。GBS显色平板上培养出的典型GBS为圆形、透亮的浅粉色到红色的菌落(图1B)，培养24h后菌落2～3mm，培养48h后菌落颜色为深红到紫色。非GBS的菌落呈现出蓝色或灰色(图1C)。

图1 无乳链球菌在平板上的形态

A:血平板上的GBS形态 B：GBS显色平板上的GBS形态 C:GBS显色平板上非GBS的形态

2.2 耐药性分析 对173份阳性标本全部上机进行药物敏感试验，抗生素的耐药性分析显示：无乳链球菌对青霉素G、氨苄青霉素、利奈唑胺、万古霉素和替加环素的耐药率均为0.00%，环丙沙星的耐药率为26.01%、左氧氟沙星的耐药率为31.79%、莫西沙星的耐药率为26.01%、氯洁霉素的耐药率为61.85%、奎奴普丁/达福普汀的耐药率为0.58%、四环素的耐药率为77.46%，具体见表1。

表1 173株无乳链球菌对不同抗菌药物的耐药性情况

3 讨论

无乳链球菌是女性生殖道常见的一种兼性厌氧菌，是围产期孕妇感染的首要病原菌[1-2]。围产期孕妇感染无乳链球菌会引起绒毛膜羊膜炎、胎膜早破等，从而诱发胎儿早产、死产等；研究发现GBS可通过羊水或分娩时经产道传染给新生儿，从而引起新生儿肺炎、败血症和化脓性脑膜炎等[1-3]。据美国疾病控制预防中心报道，每年平均有8 000例新生儿感染GBS，病死率约为5%[2]。

GBS的感染率具有种族、区域和年龄的差异性，在不同国家感染率差异很大，如美国为2.0%～29.0%，韩国为13.0%[4]。而在国内，因孕周、阴道分泌物的采集方法、检测样本的数目以及检测方法的不同等，孕妇GBS的带菌率也存在较大差别，浮动在2.4%～37.5%之间[5]。福州地区目前还未见相关报道，本文结果显示，3 108例产妇确诊173株GBS，阳性率为5.57%(173/3 108)，与张传飞[6]报道的阳性率5.9%(177/3 000)相近。

目前医学界对预防围产期GBS感染的主要措施是使用抗菌药物进行干预治疗，CLSI推荐GBS感染可使用经验性青霉素进行干预治疗。青霉素可作为围产期孕妇治疗无乳链球菌感染的首选用药，备选药物可用氨苄西林。目前尚未发现无乳链球菌对青霉素存在耐药，若孕妇对青霉素过敏但非速发型过敏反应者可选择使用头孢唑啉，因其穿透胎盘的方式与青霉素相似；若孕妇有青霉素过敏史且为速发型超敏反应者则需进行药敏试验，根据药敏试验结果选择合适的抗生素[2]。本文结果也显示，无乳链球菌对万古霉素、青霉素、利奈唑胺、氨苄青霉素和替加环素等均无耐药，敏感性为100%，对氯洁霉素和四环素的敏感性较低，与雷蜜等国内其他的[7]报道相近。

美国疾病控制预防中心于2010年发布了GBS的最新防治指南。指南中建议对所有妊娠35～37周的孕妇进行GBS的细菌培养，培养结果阳性者应给予GBS预防性治疗(Intrapartumantibiotic prophylaxis，IAP)[2]。目前为止，国内还没有发布孕期GBS筛查及分娩时预防性应用抗生素的相关防治指南。对GBS携菌孕妇在临产时或胎膜早破时进行敏感抗生素预防性治疗，可有效地降低新生儿GBS败血症的发病率，改善妊娠结局[8]。因此，将GBS筛查纳入妊娠晚期孕妇的常规检验项目，对阳性患者进行积极有效的干预治疗，通过良好的GBS管理，可有效降低孕妇的感染率，避免早产、宫内感染等产前不良事件的发生。