藏药熏倒牛的研究现状与进展

刘越敏，柳娜，寇亮，刘雪枫，罗慧英，景明

(甘肃中医药大学药学院，甘肃 兰州 730000)

藏药熏倒牛(BiebersteiniaheterostemonMaxim)别名臭花椒、狼尾巴，藏药名 “明见赛保”，为牻牛儿苗科熏倒牛属植物。熏倒牛具有浓烈腥臭气味，主要分布于甘肃、青海、宁夏六盘山西坡、四川西北部(诺尔盖)等，生长于海拔1 000～3 200 m的黄土山坡、河滩地和杂草坡地等[1]。据《中国藏药》记载，熏倒牛味辛、苦，性寒，具有消肿止痛、清热解毒、凉血、祛风的功效，其全草用于治疗痈疖，丹毒，咽喉肿痛，胃痛，全身水肿和中风等病症，其果实(狼尾巴蒿)用于预防感冒、小儿高热惊厥、腹胀、腹痛等[2]。藏药熏倒牛的活性成分主要有黄酮类、甾体类、生物碱类及 2 种倍半萜苷类等[3]，药理学研究表明，熏倒牛具有抑菌杀虫、抗氧化、镇痛、抗炎、降血糖、降血压等作用。熏倒牛单用的药物治疗效果可能不太明显，与其他药物配伍使用可能增强其药效，达到更好的治疗效果。近年来，大多数人进行研究熏倒牛与其他药物的配伍使用，以增加熏倒牛的临床应用，治疗更多的疾病。本文对近年有关熏倒牛的化学成分、药理作用、毒理学、质量标准以及配伍等方面的研究结果进行综述，为促进藏药熏倒牛的合理配伍、临床合理应用以及进一步研究开发提供科学依据。

1 化学成分

1.1 黄酮类 张晓峰等[4]从藏药薰倒牛中首次分离3个黄酮类化合物，通过化学方法光谱解析鉴定其结构分别为5,7,3′-三羟基-8,4′,5′-三甲氧基黄酮、木犀草素-7-葡萄糖苷、槲皮素-7-葡萄糖苷。王维恩等[5]研究发现熏倒牛中含有hypolatin-7-O-β-xylopyranoside、槲皮素等化合物(见图1)。张育浩等[6]采用硅胶、葡聚糖凝胶 Sephadex LH-20、半制备高效液相色谱等方法对从熏倒牛中提取的化合物进行分离纯化，得到木犀草素、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷、3′,4′,5,8-四羟基黄酮-7-O-β-吡喃葡萄糖苷等黄酮类化合物。张普照等[7]在熏倒牛全草95%乙醇提取物的正丁醇萃取部位分离得到香叶木苷、金圣草黄素-7-O-槐糖苷、芹黄素7-O-槐糖苷、木犀草苷等10个黄酮类化合物。

图1 分离得到的黄酮类化合物结构图

1.2 生物碱类 目前，从熏倒牛中分离得到的生物碱类成分较少。吴海峰等[8]运用正相及反相硅胶柱色谱从熏倒牛全草中首次分离纯化出3个生物碱类化合物,用现代波谱与X-ray单晶衍射等方法鉴定出3个化合物分别为山羊豆碱(1)，顺式-4-羟基山羊豆碱(2)和反式-4-羟基山羊豆碱(3)。王维恩等[5]研究也发现熏倒牛中含有山羊豆碱、反式-4-羟基山羊豆碱两种生物碱类化合物。化合物1～3的结构见图2。

图2 化合物1～3的结构图

1.3 苯丙素类 有研究发现，从熏倒牛科植物中分离得到的苯丙素类化合物有伞形花内酯、东莨菪内酯和阿魏酸[9]，但是仅从熏倒牛中分离得到了伞形花内酯[4-5]。

1.4 其他成分 从熏倒牛中分离得到的成分除了上述化合物外，研究者从该植物中还分离得到糖类及甾醇类等化合物。王维恩等[5]从熏倒牛中分离得到了甘露糖醇。张育浩等[6]从熏倒牛地上部分分离出原儿茶酸甲酯、格链孢酚、(+)-去氢催吐萝芙木醇等化合物(见图3)。此外，还有实验从其中分离得到了β-谷甾醇和胡萝卜苷[4]。

图3 分离得到的其他化合物

2 药理作用

2.1 抑菌作用 王维恩[10]采用纸片法证明熏倒牛中的hypolaetin -7-O-β-xylopyranoside和山羊豆碱对7种细菌的生长均有显著的抑制作用，并且呈现出对革兰阳性菌的抑菌作用强于对革兰阴性菌的抑菌作用。唐荣江等[11]研究发现熏倒牛浸膏对金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、乙型溶血性链球菌、肺炎双球菌有明显的抑菌作用，且在一定范围内，熏倒牛浸膏浓度越高，其对细菌的抑制作用越强，但对大肠杆菌、伤寒杆菌以及福氏痢疾杆菌等无抑制作用。张艳霞等[12]采用抑菌圈法测定熏倒牛乙醇提取物的石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取部位及水余液部位的抑菌活性，研究结果表明熏倒牛乙醇提取物的乙酸乙酯部位对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌以及阴沟肠杆菌有强抑制作用，对变形杆菌、粪肠球菌和白色念珠菌也有较强的抑制作用。她还证明熏倒牛乙醇提取物的石油醚部位和乙酸乙酯部位对阴道滴虫有明显抑制作用。

2.2 抗炎、镇痛作用 有诸多研究表明熏倒牛具有一定的抗炎镇痛作用。唐荣江等[11]采用小鼠扭体法和热水甩尾法观察熏倒牛浸膏及注射液对小鼠的镇痛作用，发现熏倒牛浸膏及注射液均可减少小鼠扭体反应次数，且能延长反应潜伏期,证明熏倒牛有一定的镇痛作用。王维恩[10]的研究也证实熏倒牛中的主要活性成分山羊豆碱对热板所致痛的小鼠有显著的镇痛效果。景明等[13]的研究发现，熏倒牛的提取物对二甲苯所致的小鼠耳肿胀有抑制作用，可提高小鼠热板法致痛的痛阈，表明熏倒牛有抗炎镇痛作用，且70%乙醇提取物的抗炎、镇痛作用明显优于水煎液和水煎醇沉液。

2.3 镇静、解痉作用 到目前为止，国内外对熏倒牛镇静解痉作用研究较少。有研究表明熏倒牛浸膏及注射液对小鼠有一定的镇静作用，且可增强增强戊巴比妥钠的催眠作用。此外，离体肠管试验中，熏倒牛浸膏可使豚鼠回肠、家兔回肠及十二指肠自动收缩减小，甚至完全抑制，且能对抗乙酰胆碱、磷酸组织胺、氯化钡引起的肠肌收缩，说明其具有松弛肠平滑肌的解痉作用[11]。

2.4 抗氧化作用 王渊龙等[14]以BHT为阳性对照，发现熏倒牛的3种溶剂提取物(乙醇提取物、乙酸乙酯提取物、正己烷提取物)对DPPH自由基的清除能力均强于BHT，证明熏倒牛有一定的抗氧化活性，且乙醇提取物和乙酸乙酯提取物抗氧化活性明显，呈浓度依赖性。

2.5 降血糖、降血压作用 王维恩等[15]采用立链脲霉素诱导的糖尿病小鼠模型，给予不同剂量(0.5、1、5 mg·kg-1)的熏倒牛生物碱有效部位，检测模型小鼠的血糖。实验发现，高、中剂量组熏倒牛生物碱有效部位可显著降低模型小鼠的血糖，且以高剂量 (5 mg·kg-1)的降糖作用最佳，说明熏倒牛生物碱有效部位对链脲霉素诱导的糖尿病小鼠具有明显降血糖作用。他还研究发现，高血压模型的SD大鼠腹腔注射5 mg·kg-1的山羊豆碱即有显著的降血压效果，降血压作用快，可以使平均动脉压下降40%。

2.6 其他作用 熏倒牛除了具有以上药理作用外，还具有解热和抗肿瘤等作用。张本印等[16]研究发现熏倒牛属植物或其提取物在制备预防或治疗肝癌中有一定的作用。有研究表明，熏倒牛浸膏及注射液均有解热作用，可降低三联疫苗引起的发热[11]。

3 毒性

研究发现，大鼠连续15 d口服熏倒牛浸膏20 g·kg-1，其外观、活动正常，血清 GPT 在正常值范围，显微观察其主要脏器组织未见病变[11]。还有研究证实，山羊豆碱的LD50为54.75 mg·kg-1，属于低毒[10]。景明等[17]进一步研究发现熏倒牛药材提取物对家兔完整皮肤与破损皮肤均无明显的毒性。王晶晶[18]通过研究熏倒牛提取物的毒性，也表明口服熏倒牛浸膏，在一定程度上安全可靠。以上对熏倒牛毒性的研究为熏倒牛的开发利用提供了一定的理论依据。

4 质量标准

对熏倒牛中化学成分的含量测定可以为熏倒牛药材的质量控制提供参考依据。因木犀草素和槲皮素是熏倒牛药材中的主要化学成分，所以大多数研究藏药熏倒牛的相关学者通过测定这两个主要化学成分的含量来评价不同产地熏倒牛的质量以及建立熏倒牛药材的质量标准。陈晖等[19]采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定不同产地熏倒牛药材中木犀草素的含量，结果表明不同产地薰倒牛药材中木犀草素的含量在0.42%～1.06%之间。此试验也表明熏倒牛药材中木犀草素的含量与总黄酮的含量呈正相关性，因此木犀草素的含量在一定程度上能够反映药材的质量。刘娟娟等[20]也采用相同的方法测定不同产地的藏药熏倒牛中木犀草素及槲皮素的含量，其所测得的木犀草素的含量与陈晖等人的研究结果一致，槲皮素的含量则为0.12%～0.47%，且其中以青海贵德的含量最高，甘肃永登的含量最低。此研究进一步为熏倒牛药材的质量标准提供了理论依据。王晶晶等[21]的研究表明，利用高效液相色谱法(HPLC)测定熏倒牛药材中木犀草素的含量，其专属性强，操作简单，结果准确，重复性好，可为建立藏药熏倒牛药材的质量标准提供参考依据。王维恩等[22]研究发现不同产地的熏倒牛药材中山羊豆碱的含量差别较大，同仁县样品含量最高，为0.365%，玛多县样品含量最低，为0.113%。

5 配伍

藏药成方“五昆英雄解毒散”、“十三味诃子汤散”等方剂中含有熏倒牛，用于清热解毒[11]。除了传统的熏倒牛配伍应用，研究人员发明了一些新的熏倒牛的药物配伍。研究证明，熏倒牛与苦豆子配伍使用，具有清热解毒、燥湿止带、杀虫止痒的功能，能够有效治疗细菌性阴道病、霉菌性阴道炎、滴虫性阴道炎等妇科疾病，且效果显著[23]。刘长忠[24]通过研究熏倒牛与路路通、臭梧桐、铁棒锤、百部、青风藤、宽筋藤、红花、三七、生姜、冰片、薄荷脑、灵仙、独活等配伍生产的藏药铁棒锤喷剂，结果表明其具有祛风除痹，消肿化瘀，活血止痛的功效，同时有消炎杀菌、止痛、止痒、防蚊虫叮咬等作用，可用于关节疼痛、痛风、腰痛、扭伤、外伤、红肿、烫伤和皮肤病的医治。熏倒牛、蜡梅花、蜘蛛香、管仲、鼻血草、獐牙菜、腐婢根、韶子、漆姑草和漂摇豆的药物组合物能够治疗慢性胃炎，且其具有疗效好，治愈率高无任何毒副作用，疗效稳定，不易复发等优点[25]。黄美英[26]根据君臣佐使的配伍原则配制研究发明， 熏倒牛、鳞衣草、紫葛、骆驼蓬子、凤仙花、合萌根、蒲公英、花椒、老枪谷子、苎花、稻槎菜、楮茎、荆芥、空心苋、春不见配伍合用能够清热凉血、解表散风、解毒消肿，抗菌、消炎、抗病毒。液体药剂可根治湿疹，见效快，治愈率高。此外，她还研究发明，熏倒牛与胡豆草、竻苋菜、胡燕卵、鳞衣草、南瓜须、紫麻、睡菜、茜草、胡荽、苎花、花椒、井口边草、老枪谷子、萱藻以一定范围内的重量份数配伍使用，其液体制剂可用于根治风疹[27]。藏药熏倒牛与其他中藏药配伍既可用于治疗人类的某些疾病，也可以用于防治中药材病虫害。近年来，有研究发现熏倒牛、苍术、丁香、藿香、艾叶、荆芥、芥子配伍合用对当归麻口病的致病菌具有抑制作用[28]，这一研究为今后研究中藏药配伍的应用拓宽了思路，使中藏药不再仅限于用来治疗人类疾病，同时，也为植物源农药研究提供了理论依据。

6 小结

熏倒牛是一种传统的藏药，其使用历史悠久，虽然国内外对熏倒牛的研究报道以及对其生物活性的研究较少，但熏倒牛在民间的药用价值较大。近年来，对熏倒牛的药理研究表明，黄酮类、甾体类、生物碱类等具有抑菌杀虫、抗氧化、镇痛、抗炎、降血糖、降血压等作用。随着对熏倒牛有效成分研究的不断深入，其新的药理作用与用途有望被人们发现。由于熏倒牛的活性成分在体内的作用机制以及药效物质基础不明确，阻碍了藏药熏倒牛的大规模推广和临床合理应用。我们需要运用现代先进的科学技术与方法，进一步探讨熏倒牛的药理、毒理作用及相关药动学机制，加强研究熏倒牛，建立熏倒牛研究体系，明确熏倒牛中已知活性成分在体内的作用机制，充分阐明其药效物质基础，为藏药湿生扁蕾的进一步研究开发提供理论依据。目前，藏药熏倒牛的质量标准的制定存在一定的问题，应该制定全面系统的质量标准，以提高熏倒牛药材的质量，确保临床用药的安全性和有效性。此外，制定科学合理的质量标准，对熏倒牛药材的质量控制及其生产的标准化、规范化、现代化也具有重要意义。新研究发现的熏倒牛的药物配伍使用，不仅为熏倒牛的临床应用扩大了使用范围，也为熏倒牛的用途拓宽了思路。藏药也是一类珍贵的药用资源，我们应该加快对熏倒牛的研究，发现其新的药理作用，为临床用药提供新的可能，使熏倒牛被更广泛的使用。