益生菌对罗氏沼虾生长性能和水质的影响

朱光来，齐富刚 ，王东博，陆 丹 ，胡继悦，蔡朝霞

（1.江苏农牧科技职业学院，江苏泰州 225300；2.泰州市海陵区鑫润特种水产专业合作社，江苏泰州 225300）

益生菌是保护宿主免受疾病侵害的有益微生物，在水产养殖系统（无论是在孵育和生长的水平上）中发挥着非常重要和关键的作用，因为微生物的活性可以直接影响水质和水产动物的疾病防控（邱宝生等，2004）。用于水产养殖的益生菌包括革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌、酵母和单细胞藻类。已有研究报道了益生菌被成功应用于无脊椎动物的饲养中，且大多数益生菌可以添加在饲料中，它们可以通过胃在肠道中存活（郭慧玲等，2015）。目前，关于益生菌的作用模式还存在争议，但其中有益菌群对病原菌的竞争排斥被很多学者接受（Gomez-Gill等，2000；Fuller，1992）。一些研究把促进动物生长归因于益生菌的营养益处，如提高矿物质和微量元素活性、产生重要的消化酶和维生素等（Holzapfel等，1998）。此外有研究表明，溶藻弧菌可能具有一些特点，能在幼虾孵化过程防御疾病的感染（Gomez-Gill等，2000）。利用乳酸菌作为益生菌和非特异性免疫抑制剂，除了可以改善水质和营养消化率外，还可以增加幼虫存活率和水产动物屠体重（Anderson，1992）。近年来，在水产养殖中利用乳酸菌及其代谢产物作为潜在益生菌的应用越来越多，因为它可以促进幼苗生长，提高存活率和营养价值。此外，在日粮中添加益生菌可以促进牡蛎幼虫的生长（Douillet和 Langdon，1994）。虽然益生菌已被证明是有效的，但目前在罗氏沼虾养殖过程中使用的报道较少。因此，本研究旨在评估益生菌对罗氏沼虾生长性能和屠体成分的影响。

1 材料与方法

1.1 试验设计 对照组和各处理组日粮组成及营养成分见表1。将250只虾苗[平均体重（0.01±0.002）g]分为 5组，每组2个重复，每个重复25只，试验共进行12周。除了益生菌比例变化外，试验日粮的主要营养水平相同，处理组在饲料中分别添加1%、2%、3%、4%益生菌。试验用益生菌含0.25 M蒜素，6×107cfu/g枯草芽孢杆菌以及3690 U/g酵素水解酶。5种日粮蛋白水平约为35%，能量为4.4 kcal/g。将干燥的原料粉碎成均匀的混合物，然后将混合后的饲料通过制粒机进行加工。每日按照幼苗体重的10%进行投喂，分别在早上9点和下午2点饲喂两次。

表1 罗氏沼虾日粮组成及营养水平

1.2 饲养管理 每个鱼缸饲养大小均匀[（0.01±0.002）g]的罗氏沼虾幼苗25只。在整个试验期间，每个鱼缸的总水量保持在20 L。利用氧气瓶为所有水族箱提供连续氧气。试验开始前对幼虫进行为期一周的驯化，以便适应饲料。水族箱隔日进行清洗，更换约30%的水，每隔2 d用去氯自来水清洗一次。

1.3 生长性能 每隔2周对幼苗进行称重，计算相关指标，计算公式如下：

特定生长速度/%=（末重-初重）/试验天数×100；

归一化生物指数/%=（末重×幼苗数量-初重×幼苗数量）×100；

蛋白效率=幼苗增重×幼苗数量/蛋白摄入量。

每天记录幼苗的死亡数量，计算死亡数和存活数及存活率。

1.4 化学分析及水质 试验期间测定水质常规指标（温度、pH、溶解氧、亚硝酸盐、磷酸盐），试验结束后对虾进行屠宰，分析屠体蛋白质、水分、脂肪和灰分含量。

1.5 数据分析 采用SPSS软件单因素方差模型对各组测定指标的平均值进行分析，采用Turkey法进行多重比较。结果以“平均值±标准误差”表示，P＜0.05表示差异显著。

2 结果与分析

2.1 水质 由表2可知，整个试验期间，对照组和处理组对水温、溶解氧、pH、总碱度、亚硝酸盐和磷酸盐无显著差异（P＞0.05），且各组水质均符合罗氏沼虾的生长需求。

2.2 生长性能 由表3可知，益生菌组较对照组显著提高了罗氏沼虾试验的末重、特定生长率和归一化生物指数（P＜0.05），其中处理2组的末重、特定生长率和归一化生物指数在第6周最高（P＜0.05），处理3组在第8周直到试验结束均最高（P ＜ 0.05）。

表2 各处理试验期间的水质

表3 益生菌对罗氏沼虾生长性能的影响

表4 益生菌对罗氏沼虾饲养效率的影响

2.3 饲养效率 由表4可知，与其他组相比，日粮添加2%和3%益生菌显著降低罗氏沼虾的料重比，显著提高蛋白效率比（P＜0.05）。试验前4周，各组对罗氏沼虾的采食量无显著影响（P＞0.05）。

2.4 存活率 由表5可知，处理2组和处理3组罗氏沼虾存活率最高，分别达到76%和78%（P＜ 0.05）。

表5 益生菌对罗氏沼虾存活率的影响

2.5 体成分 由表6可知，对照组和处理组罗氏沼虾屠体水分和灰分含量无显著差异（P＞0.05）。处理2组和处理3组罗氏沼虾屠体蛋白组含量最高，处理4组最低（P＜0.05）。与处理2和处理3组相比，对照组、处理1和处理4组罗氏沼虾屠体脂肪含量显著提高（P＜0.05）。

3 讨论

本试验结果发现，在大多数处理组中，添加益生菌显著提高了虾的存活率。由于日粮中添加益生菌显著改变肠道菌群中芽孢杆菌的比例，虾存活率的提高可能是由于益生菌降低了其他细菌（尤其是有害细菌）的数量，特别是在幼苗生长后期芽孢杆菌占优势。在虾机体中，作为益生菌的芽孢杆菌可以同时在养殖水体和虾的消化道中定植，芽孢杆菌也可以代替弧菌进入虾的肠道，从而提高虾的存活率，同时，芽孢杆菌能在营养和空间上超过其他细菌，并且能抑制其他细菌的繁殖（Rengpipat等，1998）。

表6 益生菌对罗氏沼虾体成分的影响                       %

本研究中，所有添加益生菌的日粮，虾生长速度均高于对照组，说明添加益生菌可提高虾的生长性能和饲料利用率。枯草芽孢杆菌可以产生淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶等消化酶，提高肠道消化酶浓度，同时还可以通过合成维生素和辅助因子，或通过酶促反应提高消化酶活性（Lee和Lee，1990）。接种芽孢杆菌后，对虾的生长有显著促进 作 用（Gullian等，2004）。El-Dakar和 Goher（2004）发现，接种枯草杆菌后，虾的生长通常得到增强，因为益生菌可以使消化酶特异性活性增加，可能促进饲料消化和吸收，进而促进虾的生长和存活，包括饲料转化率和特定生长速率。相反，Shariff等（2001）发现，益生菌对南美对虾和凡纳滨对虾的存活率和生长无显著提高作用，这可能是由于物种间差异造成的。

试验日粮添加益生菌可降低虾的料重比，改善蛋白效率，这与Haroun等（2006）的研究结果一致。通过以上试验可以发现，在罗氏沼虾幼苗日粮中添加益生菌后，其生长速度和料比均有显著改善，与Shelby等（2006）先前的研究数据相一致，表明使用益生菌生物原料为作为罗氏沼虾饲料添加剂可以促进生长性能和营养利用率。但益生菌对罗氏沼虾消化率的作用模式及其对免疫反应和应激抵抗的影响还有待进一步研究。

4 结论

日粮添加2%或3%益生菌可以提高罗氏沼虾的生长性能。