苦参桂花汤联合介入化疗治疗晚期结肠癌及其对CCSA2和survivin表达的影响

蒋莹华

（诸暨市人民医院 肿瘤内科，浙江 绍兴 311800）

结肠癌是一种位于结肠部位的恶性消化道肿瘤，其发生率居胃肠道肿瘤的前列，其中以40～50岁年龄段发病率较高[1]，且伴随着人们生活方式及饮食习惯的改变，结肠癌的发生率呈逐年增加的趋势[2]。目前，临床上治疗结肠癌的手段以手术治疗为主，辅以放疗或化疗[3]。但是由于结肠癌早期较难发现，多数患者来院就诊时已是晚期或已经发生转移，失去了手术的机会。因此，治疗晚期结肠癌患者多以化疗为主。介入化疗作为一种微创疗法，靶向性高，疗效显著，在消化道肿瘤的治疗中颇具优势[4]。但是，由于化疗在杀伤癌细胞的同时，对病患本体也造成了较大的伤害，这也是导致很多体弱患者治疗中断的主要原因[5]。且中医理论认为化疗多具火毒之性，与痰湿相煎，有损血脉经络，治疗应以清热燥湿，解毒抗癌为主，综合调节患者体质[6]。本研究采用具有清热燥湿、解毒抗癌效用的苦参桂花汤联合介入化疗，研究其对晚期结肠癌患者的治疗效果及其对肿瘤标志物结肠癌特异性抗原2（colon cancer specific antigen 2，CCSA2）和生存素（survivin）表达水平的影响。

1 资料和方法

1.1 一般资料 选取2015年3月至2017年3月诸暨市人民医院就诊的晚期结肠癌患者62例，随机分为对照组与观察组，每组31例。对照组男21例，女10例，年龄（48.3±5.4）岁，其中III期17例，IV期14例。观察组男19例，女12例，年龄（50.1±7.5）岁，其中III期15例，IV期16例。2组患者一般资料比较差异无统计学意义（P＞0.05）。

纳入标准：①经内镜加病理检查结合临床诊断确诊为晚期结肠癌，临床分期为III-IV期；②患者拒绝手术或无手术指征；③1个月内没有进行过抗癌治疗；④预计生存期大于3个月。排除标准：①肝、肾功能不全或伴随其他化疗禁忌证；②过敏体质或对多种药物过敏；③具有免疫系统疾病；④未完成全部治疗方案的病例。本研究经本院伦理委员会批准，所有患者均签署知情同意书。

1.2 方法 观察组与对照组均采用介入化疗方案给药，观察组在此基础上给予苦参桂花汤联合治疗。

介入化疗方案：采用常规的股动脉穿刺Seldinger法，在X线电视动态监控下，将穿刺导管5 F插入腹腔动脉，肠系膜上（下）动脉，在相关的动脉血管造影定位后，明确患者病灶组织的供血情况，选出肿瘤血管，注入5-氟尿嘧啶、多西他赛及奥沙利铂，注射完毕后清洁包扎穿刺处。每4周重复治疗1次，2个周期为1个疗程。

苦参桂花汤制剂：苦参12 g，草河车15 g，白头翁12 g，白桂花15 g，红藤12 g，无花果15 g，生苡仁、白花蛇舌草、半枝莲各30 g。每日1剂，煎至400～600 mL，分3次服用，连续服用8周。

此外，根据患者所表现的临床症状不同辨证加减，大便秘结者加火麻仁15 g，柏子仁15 g，郁李仁15 g；大便溏稀腹泻者加石榴皮15 g，诃子肉15 g；恶心呕吐者加制半夏15 g，陈皮10 g，旋覆花10 g；心悸失眠者加酸枣仁30 g；阴虚潮热者加白薇10 g，青蒿30 g，地骨皮10 g；其他症状酌情加减。

1.3 观察指标

1.3.1 中医临床症状观察：结肠癌常见临床症状为腹部胀痛、腹泻、大便秘结、食少纳差、乏力、呕吐、消瘦等，参照中医症状评分标准将上述症状分为正常、轻、中、重4级，分别记分为0、1、2、3，分别对2组患者治疗前后各症状进行评分，然后按积分百分比评估治疗效果[7]。积分百分比=（治疗前积分-治疗后积分）/治疗前积分×100%，70%≤积分百分比＜100%，显效；30%≤积分百分比＜70%，有效；积分百分比＜30%，无效。总有效率=（有效人数+显效人数）/总人数×100%。

1.3.2 生活质量评分比较：通过癌症治疗功能评估表EORTC QLO-C30与EORTC QLQ-C38分别于治疗前后对2组患者的生活质量进行评分，并计算积分平均值，分析2组患者的生活质量差异[8-9]。

1.3.3 不良反应发生情况：治疗前、后各检查1次患者的呼吸、脉搏、体温、血压、心律、血常规、尿常规、心电图以及肝肾功能等。治疗过程中新增的不良反应随时记录。最后比较2组患者不良反应发生的频次。

1.3.4 预后评估：来院就诊联合电话随访，从病理报告联合临床诊断确诊为始，至随访终止（包括患者死亡），记录2组患者在4 年内的生存情况，采用寿命表分析法统计患者治疗方式，随访时间，是否存活（死亡记为1，生存记为0）。同时，采用Kaplan-Meier分析比较2组患者的中位生存期。

1.3.5 肿瘤标志物CCSA2和survivin的表达变化：采集患者外周血约5 mL，1 000 r/min，4 ℃离心20 min后收集血清，采用酶联免疫吸附测定试剂盒检测其中CCSA2的含量。同时，收集患者肠镜病理活检样本，石蜡包埋切片，免疫组织化学检测病灶部位中survivin的表达。survivin一抗（购自美国Abcam公司，货号：ab76424）稀释比为1:300，染色结果统计：无着色或者极浅着色为阴性（-），浅棕色着色为弱阳性（+）、棕色着色为中等阳性（++）、深棕褐色为强阳性（+++）。阳性率=（中等阳性着色人数+强阳性着色人数）/该组总人数×100%。

1.4 统计学处理方法 采用SPSS19.0软件进行统计学分析。计量资料以表示，2组间比较采用两独立样本t 检验，组间治疗前后比较采用配对t检验。计数资料以例（率）表示，2 组间比较采用Pearson χ2检验，生存分析采用Kaplan-Meier分析和Log-rank检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 2组患者中医症状积分比较 2组患者经治疗后，对照组除大便秘结与消瘦症状较治疗前有显著改善之外（P＜0.05），其余各症状无明显变化。观察组患者大便秘结、食少纳差、呕吐与消瘦中医症状积分较治疗前显著降低，较对照组也显著降低，差异均有统计学意义（P＜0.05）；但腹部胀痛、腹泻以及乏力症状积分较治疗前差异无统计学意义（P＞0.05）。见表1。计算积分百分比发现，观察组总有效率为61.3%（19/31），对照组总有效率为38.8%（12/31），观察组总有效率显著高于对照组（P＜0.05）。见表2。

表1 2组患者中医症状积分比较（

表1 2组患者中医症状积分比较（

与治疗前比：aP ＜0.05；与对照组比：bP ＜0.05

组别 n 时间 腹部胀痛 腹泻 大便秘结 食少纳差 乏力 呕吐 消瘦对照组 31 治疗前 2.11±0.74 0.75±0.21 0.32±0.10 2.05±0.52 1.98±0.34 2.17±0.62 1.88±0.25治疗后 1.82±0.60 0.69±0.14 0.20±0.07a 2.47±0.29 2.13±0.50 2.36±0.58 1.27±0.26a观察组 31 治疗前 2.08±0.65 0.70±0.19 0.40±0.13 2.13±0.62 2.08±0.44 2.22±0.50 2.01±0.34治疗后 1.73±0.58 0.68±0.22 0.11±0.03ab 1.07±0.33ab 1.95±0.41 1.09±0.31ab 0.83±0.25ab

表2 2组患者治疗后疗效比较

2.2 2组患者生活质量评分比较 经过治疗后，对照组C30与CR38评分差异无统计学意义（P＞0.05），观察组2项评分均得到显著性改善（P ＜0.05），见表3。

表3 2组患者生活质量评分情况

表3 2组患者生活质量评分情况

与治疗前比：aP ＜0.05；与对照组比：bP ＜0.05

组别 n 时间 C30 CR38对照组 31 治疗前 61.42±5.75 64.48±7.80治疗后 59.61±7.62 65.25±6.80观察组 31 治疗前 60.57±7.09 65.58±8.30治疗后 71.25±8.09ab 69.76±6.37ab

2.3 2组患者不良反应发生情况比较 治疗期间，对照组共发生不良反应3例，占总人数的9.68%，而观察组只有1例，占总人数的3.23%，2组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。

2.4 2组患者生存率比较 2组患者随访4年，Kaplan-Meier分析结果显示对照组中位生存时间为18个月，观察组中位生存时间为30个月，明显高于对照组，差异有统计学意义（Log-rank χ2=6.600，P=0.01），见表4和图1。

2.5 2组患者肿瘤标志物CCSA2和survivin的表达变化 对照组患者外周血清中CCSA2的表达水平为（19.27±3.55）μg/L，观察组为（12.40±2.81）μg/L，差异有统计学意义（P＜0.05）。Survivin在结肠癌组织中的着色主要在胞浆，统计结果所示，对照组的阳性着色率为77.42%，观察组的阳性着色率为58.07%，2组比较差异有统计学意义（P＜0.05），见图2和表5。

3 讨论

结肠癌的发生是一个多因素与多步骤相互作用的结果，它与遗传、环境、饮食习惯、生活差异以及相关的消化系统病变息息相关[7]。目前，临床上主要采用手术切除的方案进行治疗，但多数患者在初诊时就已发展为中到晚期，因此，常常需要进行肿瘤化疗。动脉介入化疗利用导管穿刺，有针对性地选择病灶供血管，靶向注入化疗药物，大大增强了药物与局部病灶组织的接触[4]。单纯化疗虽然能在一定程度上阻断疾病的发展，延长患者生存期，但同时对患者的机体也造成了极大的伤害，降低了患者的生活质量[8-9]。大量研究已经表明，化疗联合传统中药治疗晚期结肠癌疗效显著[10-12]。

表4 2组患者生存率对比[例（%）]

图1 2组患者Kaplan-Meier生存分析曲线图

传统中医研究认为，肿瘤是由于患者本体正气虚而后邪气踞所导致的。具体到患者大肠表现为脾肾虚衰为本，气滞湿热为标[13]。且患者在经手术或放化疗治疗后，其脾肾运化腐熟功能受损，导致湿浊内生。表现为神疲乏力，面色萎黄，食少纳差，大便溏稀间或便秘等症状。总言之，结肠癌晚期脾肾气虚为基本病机，湿毒瘀滞为主要的病理变化。本研究应用苦参桂花汤以《金匮要略》中的经方苦参汤为基础，其中苦参、生苡仁为清热除湿之要药，重楼、白头翁、白花蛇舌草、半枝莲等可清热解毒、消肿抗癌；大血藤与白桂花能够活血止痛、行气，无花果可健胃清肠、消肿解毒。全方共奏清热燥湿、解毒抗癌之功效。

本研究将62例晚期结肠癌患者随机分为2组，对照组采用介入化疗方案，实验组在此基础上加用中药方剂苦参桂花汤辨证加减，结果发现，实验组患者经治疗后大便秘结，食少纳差，呕吐，消瘦积分均显著低于对照组，总有效率更高（61.3% vs.38.8%），同时2组患者C30与CR38评分在治疗后都有所升高，实验组增幅更大。此外，治疗后实验组不良反应发生的频率比对照组低。电话随访结果发现，实验组患者4 年内生存率均显著高于对照组。这表明苦参桂花汤联合介入化疗治疗晚期结肠癌疗效显著，能够改善患者常见的中医症状，提高患者的生存质量，减少不良反应的发生。

Survivin 基因属于一种凋亡抑制基因，由1997年耶鲁大学的AMBROSINI等[14]首次发现。其属于IAP家族成员，在多种肿瘤组织中特异性表达[15-17]，能够参与细胞周期的调控，促进细胞有丝分裂及癌细胞的恶性转化，它在肿瘤组织中的表达与患者病情的发展及预后息息相关[18-20]。Survivin在癌细胞中表达越高，癌细胞的存活能力及恶性程度也会伴随升高，癌细胞的侵袭及浸润能力则会更强。这表明，survivin的高表达可能是结肠癌不良预后的标志，其可能是结肠癌发生发展过程中的一个早期事件。CCSA2是近年来发现的一种针对结肠癌的血清标志物，研究表明，其对结肠癌的病情诊断及预后评估都优于一些常规的标志物，如CA742、CEA等[21]。本研究发现，苦参桂花汤联合介入化疗能够有效降低survivin在结肠癌组织中表达的阳性率，同时下调患者外周血中CCSA2的表达。这表明苦参桂花汤辅助治疗能够有效延缓晚期结肠癌患者病情的进展，增强化疗药物的治疗效果。

表5 2组患者结肠癌组织survivin的免疫组织化学检测结果

图2 患者结肠癌组织中survivin表达的免疫组织化学检测结果（×400）

综上所述，苦参桂花汤联合介入化疗对改善晚期结肠癌疗效具有积极的意义，中药方剂苦参桂花汤能清热燥湿、解毒抗癌，与介入化疗相辅相成，起到增效减毒的作用。但是，此治疗方案的临床功效还需要更多临床数据的进一步确认。