SULT2A1、Bcl-2蛋白在子宫肌瘤组织中的表达及意义

(泰州市人民医院妇科，江苏 泰州225300)

流行病学研究显示，子宫肌瘤的发病率在合并有相关高危基础因素的育龄期女性群体中进一步上升[1]。子宫肌瘤的发生发展，能够导致患者继发性不孕的发生，增加了远期临床结局恶化的风险[2]。在探讨子宫肌瘤发病的基础性生物学领域中，发现细胞因子的改变，能够通过影响到子宫平滑肌细胞的异常增殖，影响到平滑肌细胞的凋亡，进而参与到子宫肌瘤的发生过程。硫酸基转移酶2A1(Sulfate transferase 2A1,SULT2A1)的表达下降，能够通过诱导雌激素的磷酸化障碍，提高游离的雌激素水平，进而促进子宫平滑肌细胞膜上雌激素受体敏感性的上升，促进了平滑肌细胞的持续性增殖[3]；B淋巴细胞瘤-2基因(B lymphocytoma-2 gene,Bcl-2)的表达上升，能够通过抑制平滑肌细胞的凋亡，降低平滑肌细胞的分解破坏速度，进而促进早期平滑肌细胞的异常分裂[4]。为了揭示SULT2A1、Bcl-2的表达与子宫肌瘤的病情关系，从而为临床上子宫肌瘤的诊疗及预后随访提供参考，本次研究选取2017年1月至2018年9月我院保存的子宫肌瘤标本110例，探讨了SULT2A1、Bcl-2的表达与子宫肌瘤的病情关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2017年1月至2018年9月我院保存的子宫肌瘤标本110例(子宫肌瘤组)，同时选取正常子宫肌层组织70例(正常子宫肌层组)，两组一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05)，见表1。纳入标准：(1)均经病理学确诊；(2)术前3个月内未使用过激素类药物；(3)临床资料保存完整。排除标准：合并有甲状腺疾病、恶性肿瘤、糖尿病等严重基础性疾病。

表1 两组一般资料比较 (例)

1.2 实验方法

石蜡包埋，连续性切片厚度3 μm，60 ℃烤片60 min，常规脱水后，采用EDTA进行抗原修复，加入10 μL蒸馏水，加入10%过氧化氢5il，室温下孵育30 min,磷酸盐缓冲液(PBS)洗涤3次*3 min，加入SULT2A1、Bcl-2蛋白的单克隆抗体(1∶1 000购自罗氏检测公司)，37 ℃孵育60 min，PBS洗涤3次*3 min，加入HRP标记的SULT2A1、Bcl-2蛋白二抗(1∶2 000购自罗氏公司)，37 ℃孵育20 min，PBS洗涤3次*3 min，加入DAB后，PBS冲洗和复染，脱水后在显微镜下进行观察。

1.3 结果判断

细胞核内或胞浆出现棕黄色颗粒为阳性细胞，根据半定量积分法，对染色强度和阳性细胞比例进行评分，染色强度：无着色为0分，浅黄色为1分，棕黄色为2分，棕褐色为3分；阳性细胞比例：<5%为0分，5%～25%为1分，26%～50%为2分，51%～75%为3分，>75%为4分。最终得分为染色强度和阳性细胞比例得分之积，分数<4分为阴性表达，≥4分为阳性表达。

1.4 统计学处理

采用SPSS19.0进行统计分析，计数资料比较使用χ2检验，相关性采用Spearman秩相关分析，以P<0.05表示差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 子宫肌瘤组和正常子宫肌层组SULT2A1、Bcl-2蛋白表达

子宫肌瘤组SULT2A1阳性表达率明显低于正常子宫肌层组(P<0.05)，而Bcl-2蛋白阳性表达率明显高于正常子宫肌层组(P<0.05)，见表2。

表2 子宫肌瘤组和正常子宫肌层组SULT2A1、Bcl-2蛋白表达 (例,%)

2.2 子宫肌瘤组不同分期SULT2A1、Bcl-2蛋白表达

子宫肌瘤组分泌期Bcl-2蛋白阳性表达率明显高于增生期(P<0.05)；子宫肌瘤组分泌期和增生期SULT2A1蛋白阳性表达率比较差异无统计学意义(P>0.05)。见表3。

表3 子宫肌瘤组不同分期SULT2A1、Bcl-2蛋白表达 (例,%)

2.3 不同大小子宫肌瘤SULT2A1、Bcl-2蛋白表达

直径<2 cm和≥2 cm子宫肌瘤组织SULT2A1、Bcl-2蛋白阳性表达率比较差异无统计学意义(P>0.05)，见表4。

表4 不同大小子宫肌瘤SULT2A1、Bcl-2蛋白表达 (例,%)

2.4 相关性分析

子宫肌瘤组织SULT2A1和Bcl-2蛋白表达无相关性(rs=-0.008，P>0.05)，见表5。

表4 相关性分析

3 讨 论

遗传易感性因素、雌激素受体敏感性的改变，均能够促进子宫肌瘤的发生，在年龄大于35岁的育龄期女性人群中，子宫肌瘤的发病率可进一步的上升[5]。临床上子宫肌瘤的发生，不仅能够严重影响到患者的工作学习，同时还能够增加子宫肌瘤交界性或者恶性病变的风险，增加子宫肌瘤肉瘤样变的可能[6-7]。现阶段缺乏对于子宫肌瘤发病或者预后评估的生物学因子，而通过对于相关蛋白的分析，能够为临床上子宫肌瘤的预防、治疗后复发的随访提供依据。部分研究者认为，雌激素受体a的表达，能够在子宫肌瘤的发生过程中发挥作用。但雌激素受体a的表达与子宫肌瘤患者的临床病理特征并无明显的关系。本次研究通过对于子宫肌瘤患者体内SULT2A1、Bcl-2的表达分析研究，不仅能够揭示子宫肌瘤的发病机理，同时能够为临床上子宫肌瘤的诊疗提供理论方面的参考。

SULT2A1是磷酸基团转移酶，其能够通过对于雌激素及睾酮等激素受体的修饰，进而影响到雌激素的作用效果，干预到雌激素下游信号通路的激活程度。SULT2A1结构上含有的多重丝氨酸结构，能够通过磷酸修饰平滑肌细胞膜上的糖蛋白，进而导致雌激素敏感性的改变[8]；Bcl-2是凋亡相关调控因子，其能够通过抑制上皮细胞的凋亡，降低子宫平滑肌细胞的凋亡比例，促进平滑肌细胞间质成分的纤维化，进而导致肌瘤的发生发展。相关临床研究还认为，Bcl-2能够影响到子宫肌瘤的新生血管的形成，促进平滑肌组织的血流灌注[9]。相关研究已经探讨了SULT2A1的表达与子宫肌瘤的关系，认为在子宫肌瘤患者中，SULT2A1的表达下降与肌瘤的早期发生密切相关[10]，但缺乏对于SULT2A1和Bcl-2在子宫肌瘤患者不同月经周期中的分析。

本次研究通过免疫组化研究了SULT2A1和Bcl-2在子宫肌瘤病灶组织中的表达情况，发现在子宫肌瘤病例组患者中，SULT2A1蛋白的表达阳性率明显的下降，而Bcl-2蛋白的表达阳性率明显的上升，提示了SULT2A1和Bcl-2的差异性表达均能够显著影响到子宫肌瘤的发生发展过程。分析其内在的原因，考虑由于SULT2A1和Bcl-2的下列几个方面的病理性改变有关[11-14]：(1)SULT2A1的表达下降，失去了其对于雌激素下游NF-KB信号通路的修饰调控作用，导致平滑肌细胞核DNA的分裂速度明显加快；(2)Bcl-2的表达上升，能够提高平滑肌细胞周期中G1/S期的比例，提高了平滑肌细胞的持续性扩增能力，最终促进了肌瘤瘤体的形成。王随郧等[15]研究者也发现，在子宫肌瘤病灶组织中，Bcl-2蛋白的表达阳性率可平均上升45%以上，在多发性子宫肌瘤或者子宫肌瘤病程较长的患者中，Bcl-2蛋白的表达阳性率可进一步的上升。本次研究还探讨了不同月经周期中SULT2A1和Bcl-2的表达，发现在分泌期患者中，Bcl-2蛋白的表达阳性率明显的上升，高于增生期患者，统计学差异显著，提示了月经周期可能影响到了Bcl-2蛋白的表达，这主要由于不同月经周期的肌瘤组织，其瘤体细胞膜受到周期性雌孕激素的调控，导致凋亡相关蛋白Bcl-2的转录活性明显上升，最终促进了Bcl-2蛋白的合成和释放。但本次研究并未发现SULT2A1的表达与月经周期的关系，提示SULT2A1蛋白的表达具有一定的稳定性。在不同子宫肌瘤病灶直径的患者中，并未发现SULT2A1和Bcl-2的表达差异，提示SULT2A1和Bcl-2的表达与子宫肌瘤患者的一般性临床特征并无明显的关系。

综上所述，在子宫肌瘤患者病灶组织中，SULT2A1蛋白的表达明显下降，而Bcl-2蛋白的表达明显上升，说明SULT2A1和Bcl-2与子宫肌瘤发生发展有密切关系。