肺腺癌患者EGFR基因突变与血清VEGF和肿瘤标志物的关系研究

胡雨薇

肺癌的死亡率居众多肿瘤死亡率之首，而肺癌患者中有近80%的患者所患肺癌种类为非小细胞肺癌，而作为非小细胞肺癌重要类型之一的肺腺癌的发病率逐年上升，成为非小细胞肺癌中的主要类型[1，2]。近年由于诊断技术以及治疗方式逐渐改进，肺腺癌患者的预后有一定改善，但尚未达到预期效果，探究新型有效的治疗方式是肿瘤研究者们一直努力的方向[3]。靶向治疗可以特异性作用于肿瘤病灶，改善治疗效果，靶向治疗中使用酪氨酸激酶抑制剂可以对表皮生长因子受体（EGFR）基因突变癌细胞予以特异性抑制，改善患者预后[4]。肺腺癌患者血清中癌胚抗原（CEA）、血管内皮生长因子（VEGF）、细胞角蛋白19（CYFRA21-1）等的表达水平可用于评价肺腺癌的疗效[5]，但研究者们对这些血清肿瘤指标与EGFR 基因突变的关系意见不一。本研究深入探究肺腺癌患者血清CEA、VEGF、CYFRA21-1 的表达水平及与EGFR 基因突变之间的关系，为后期此类患者靶向治疗方案的制订提供依据。

1 材料与方法

1.1 一般资料 回顾性分析2017年9月～2018年9月在我院接受治疗的132 例肺腺癌患者的相关资料。其中男71 例，女61 例，年龄30～86 岁，平均（60.26±5.16）岁；肿瘤分期：Ⅰa～Ⅲa 和Ⅲb～Ⅳ分别为53 例和79 例。纳入标准：①病理检测证实为肺腺癌患者；②首次治疗前均接受血清标志物检查，且接受EGFR 基因突变检查；③患者资料均无遗失。排除标准：①鳞癌患者；②未被确诊者；③仅接受血清肿瘤标志物与EGFR 基因突变中一项检查者。

1.2 方法

1.2.1 血清肿瘤标志物测定 治疗前抽取静脉血后离心得到血清，使用酶联免疫吸附法测定CEA、VEGF、CYFRA21-1 水平，其指标处于下列范围显示为阴性，CEA：0～5.0μg/L，VEGF：0～50μg/L，CYFRA21-1：0～3.3ng/ml，超出上述范围显示为阳性。

1.2.2 EGFR 基因突变测定 使用ARMS 法对EGFR基因突变类型中各个外显子突变进行检测，所有检测均使用试剂盒进行，测试过程依据试剂盒说明书操作，质量控制采用阴性、阳性以及空白对照，其中Ct＜26 为 阳 性，而Ct≥29 与26≤Ct＜29 分 别 为EGFR 突变阴性以及可疑阳性。

1.3 观察指标 分析患者EGFR 基因突变情况、EGFR 基因突变与患者一般资料与血清肿瘤标志物之间的关系，EGFR 基因突变几率与患者血清CEA、VEGF、CYFRA21-1 水平的相关性。

1.4 统计学方法 采用SPSS 20.0 软件进行数据分析与处理，各组计数资料均使用χ2检验，计量资料如血清肿瘤标志物水平均以均数±标准差表示，使用t检验进行差异比较，相关性分析使用Pearson 相关性分析法，以P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 EGFR 基因突变情况 所有患者进行基因突变测定发现，EGFR 基因突变阴性与阳性分别81 例（61.36%）和51 例（38.64%），EGFR 基因突变阳性中21 号外显子错义突变以及19 号外显子缺失突变分别30 例（22.73%）和17 例（12.88%），并含两种突变4 例（3.03%）。

2.2 EGFR 基因突变与一般资料之间的关系 EGFR基因突变阳性中男性显著多于女性（P＜0.05），EGFR基因突变较常发生于无吸烟史患者中，而患者年龄与肿瘤分期与EGFR 基因突变之间关系不大（P＞0.05），见表1。

表1 EGFR 基因突变与患者一般资料之间的关系[n（%）]

2.3 EGFR 基因突变与血清肿瘤标志物之间的关系EGFR 基因突变阳性患者血清CEA、VEGF 水平显著高于EGFR 基因突变阴性患者（P＜0.05），而血清CYFRA21-1 在EGFR 基因突变阴性与阳性患者中差异无统计学意义（P＞0.05），见表2。

表2 EGFR 基因突变与患者血清肿瘤标志物的关系（±s）

表2 EGFR 基因突变与患者血清肿瘤标志物的关系（±s）

类型 例数 CEA（μg/L） VEGF（μg/L） CYFRA21-1（ng/ml）阴性 81 35.52±10.18 89.35±10.76 6.81±1.09阳性 51 168.33±32.67 117.33±25.34 7.13±1.35 t 34.12 8.77 1.50 P＜0.05 ＜0.05 ＞0.05

2.4 EGFR 基因突变几率与血清CEA、VEGF、CYF RA21-1 水平的相关性分析 相关性分析显示患者血清CEA、VEGF 水平与EGFR 基因突变几率呈正相关（P＜0.05），而CYFRA21-1 水平与患者EGFR 基因突变几率无相关性（P＞0.05），见表3。

表3 EGFR 基因突变几率与患者血清CEA、VEGF、CYFRA21-1 水平的相关性分析

3 讨论

多项肿瘤治疗指南中提出非小细胞肺癌患者在进行EGFR 受体酪氨酸酶抑制剂靶向治疗前需要接受EGFR 基因突变测试以筛选出阳性患者，确保靶向治疗效果[6，7]。研究显示EGFR 基因突变情况与丰度是进行EGFR 受体酪氨酸酶抑制剂靶向治疗预测有价值的指标[8]。临床常通过患者一般资料来筛选EGFR 基因突变阳性的患者，蒲桂梅等[9]研究显示非吸烟肺腺癌患者出现EGFR 基因突变概率较大，与本研究中相关结果一致，但是其研究认为女性肺腺癌患者可能是EGFR 基因突变高发人群，这点与本研究结果不一致，两项研究差异可能是由于蒲桂梅研究中纳入研究对象中男性比例偏高，这在一定程度上会影响其研究结果。本研究中EGFR 基因突变阳性患者51 例，阳性率为38.64%，与另一项类似研究中结果一致[10]。EGFR基因突变多为21 号与19 号外显子发生基因突变，20 号与18 号发生突变情况较为少见，所以本研究中只测定了21 号与19 号基因突变，其中21 号外显子错义突变以及19 号外显子缺失突变发生率分别为22.73%和12.88%，并含两种突变的发生率为3.03%。

血清肿瘤标志物由肿瘤细胞释放，CEA 与CYFRA21-1 均为重要的肿瘤标志物，可由此判断患者的预后。已有研究证实CEA 浓度与肺癌患者EGFR 基因突变存在一定的关系[11]。李磊等[12]认为EGFR 基因突变导致患者下游信号通路被激活，从而诱导肿瘤细胞分化加快，致使CEA 蛋白合成增多。本研究中EGFR 基因突变阳性患者血清CEA 水平显著高于EGFR 基因突变阴性患者，而患者CEA 水平越高EGFR 基因突变概率越大。本研究中血清CYFRA21-1 在EGFR 基因突变阴性与阳性患者中差异不显著，这可能是由于CYFRA21-1多见于肺鳞癌，是诊断肺鳞癌特异性指标，而EGFR基因突变常见于肺腺癌[13，14]。由于VEGF 不是肿瘤标志物，其在肿瘤发生中的作用常被人们忽略，但是肿瘤整个发展阶段均需要血液提供氧气与营养物质，而VEGF 在整个血管发生过程中作用重大。有研究显示VEGF 可将EGFR 所致刺激送入细胞中，致使细胞大量增殖，从而发生肿瘤。韩影等[15]研究显示VEGF 与EGFR 在低分化非小细胞肺癌患者体内高表达，而在中高分化患者体内表达则较少，提示两者在肺癌患者体内呈正相关，两者共同作用诱导肿瘤的发生和发展。本研究中EGFR基因突变阳性患者血清VEGF 水平显著高于EGFR基因突变阴性患者，且VEGF 水平越高患者EGFR基因突变概率越大，同样提示VEGF 水平与患者EGFR 基因变化关系密切。这可能因EGFR 在信号转导期间介导肿瘤血管生成，其突变可以使患者体内VEGF 水平上调，致使细胞凋亡，EGFR 激活致使癌症细胞过增殖，细胞大量增殖对血氧大量需求导致血管增生[16]。

综上所述，肺腺癌患者血清CEA 与VEGF 水平与患者EGFR 基因突变关系密切，其可以结合患者临床资料筛选出EGFR 受体酪氨酸酶抑制剂靶向治疗优势人群，临床应用价值较高。