肝康健2号对HBeAg阳性慢性HBV携带者的抗病毒作用及对T淋巴细胞亚群的影响

张双喜 王维琼 何国敏 邱庐山 郭洁仪

[摘要] 目的 观察肝康健2号对HBeAg阳性慢性HBV携带者的抗病毒作用及对T淋巴细胞亚群的影响。方法 选择2014年6月～2017年1月于广州中医药大学顺德医院就诊的符合纳入标准43例HBeAg阳性慢性HBV携带者，采用随机数字表法分为治疗组（21例）和对照组（22例）。治疗组予以肝康健2号口服，1包，3次/d;对照组予以葡醛内酯口服，0.2 g，3次/d。观察治疗前和治疗72周后两组患者病毒学指标、T淋巴细胞亚群、三大常规、肾功能。 结果 治疗72周后，治疗组血清HBV-DNA低于治疗前及对照组，差异有统计学意义（P < 0.05）。治疗72周后，治疗组血清HBeAg低于治疗前及对照组，差异有统计学意义（P < 0.05）。两组CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+组间、组内比较差异均无统计学意义（P > 0.05）。治疗72周后，两组复查血常规、尿常规、粪常规、肾功能均未见明显异常。 结论 肝康健2号可有效降低HBeAg阳性慢性HBV携带者的HBV-DNA、HBeAg定量值，中药对于抑制HBV复制、调节乙肝免疫耐受有肯定的疗效。

[关键词] 肝康健2号;中医;HBeAg阳性慢性HBV携带者;T淋巴细胞亚群

[中图分类号] R512.6          [文献标识码] A          [文章编号] 1673-7210（2019）08（a）-0080-04

[Abstract] Objective To evaluate antiviral effect of Gankangjian 2 on HBeAg positive chronic HBV carriers and its effect on T lymphocyte subsets. Methods Forty-three HBeAg positive chronic HBV carriers who met the inclusion criteria in Shunde Hospital of Guangzhou University of Traditional Chinese Medicine from June 2014 to January 2017 were selected and divided into treatment group （21 cases） and control group （22 cases） by using random number table method. Treatment group was given Gankangjian 2 orally， one package， three times a day. Control group was given Glucurolactone orally， 0.2 g， three times a day. Virological indices， T lymphocyte subsets， three routine and renal function between two groups were observed before treatment and 72 weeks of after treatment. Results After treatment of 72 weeks， serum HBV-DNA level in treatment group was lower than that before treatment and in control group， the difference was statistically significant （P < 0.05）. After treatment of 72 weeks， serum HBeAg level in treatment group was lower than that before treatment and in control group， the difference was statistically significant （P < 0.05）. There were no significant differences in CD3+， CD4+， CD8+， CD4+/CD8+ between and within two groups （P > 0.05）. After treatment of 72 weeks， there were no significant abnormalities in blood routine， urine routine， fecal routine and renal function in two groups. Conclusion Gankangjian 2 can effectively reduce the quantitative values of HBV-DNA and HBeAg in HBeAg-positive chronic HBV carriers. Traditional Chinese medicine has a definite effect on inhibiting HBV replication and regulating immune tolerance of hepatitis B.

[Key words] Gankangjian 2; Traditional Chinese medicine; HBeAg positive chronic HBV carriers; T lymphocyte subsets

根據世界卫生组织（WHO）流行病学调查显示，乙肝病毒（HBV）的感染率呈逐年上升趋势，而在我国乙型肝炎的发生率占6%，乙肝表面抗原的携带率约为10%，HBV携带者约为1.2亿人，此类患者对抗病毒治疗反应欠佳[1]。近来研究认为[2]，中医药可能通过调节患者特异性免疫功能，从而抑制HBV复制。本研究应用肝康健2号治疗处于免疫耐受期的HBeAg阳性慢性HBV携带者72周，观察其抗病毒疗效及HBeAg阴转率，同时检测了目前被认为与慢性乙肝免疫相关的（CD4+T、CD8+T及CD4+T/CD8+T），观察肝康健2号在降低HBV-DNA、实现血清转换的同时，细胞免疫学是否得以恢复，并寻找HBeAg血清学转换与T淋巴细胞亚群之间是否存在关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2014年6月～2017年1月于广州中医药大学顺德医院（以下简称“我院”）就诊的HBeAg阳性慢性HBV携带者共43例，采用随机数字表法分为对照组和治疗组。对照组患者22例，男12例，女10例，年龄35～54岁，平均（44.53±5.22）岁;治疗组21例，男10例，女11例，年龄35～55岁，平均（45.08±5.40）岁。两组性别、年龄比较差异无统计学意义（P > 0.05），具有可比性。本研究经我院医学伦理委员会批准。纳入标准：①参加本研究患者均符合《2010年慢性乙型肝炎防治指南》[3]中的相关标准;②HBeAg均为阳性，且HBV-DNA≥104（相当于2000 U/mL）cps/mL;③患者对本研究知情。排除标准：①患有器质性病变的患者;②对研究使用药物有禁忌证的患者;③在入组前使用过抗病毒药物、干扰素等药物的患者;④有非法用药史的患者。

1.2 试验设计

1.2.1 试验方法  总例数43例，采用简单随机法将合格病例按照1∶1的比例分为治疗组和对照组，治疗组21例，对照组22例，治疗72周。治疗组予以肝康健2号（菟丝子、五味子、丹参、枸杞子、车前子、虎杖、覆盆子、茵陈、赤芍、大黄等）口服，1包，3次/d;对照组予以葡醛内酯（江苏天士力帝益药业有限公司，批号：200903212）口服，0.2 g，3次/d，两组均观察72周。

1.2.2 观察指标  ①病毒学标志：血清HBeAg和HBV-DNA定量，治疗前、治疗72周检测。②T淋巴细胞亚群指标：CD3+（参考范围：955～2860个/μL）、CD4+（参考范围：450～1440个/μL）、CD8+（参考范围：320～1250个/μL）、CD4+/CD8+（参考范围：1.5～2.5），治疗前、治疗72周检测。③安全性指标：治疗前、治疗72周检查血尿粪三大常规、肾功能指标。

1.3 统计学方法

采用SPSS 16.0统计学软件进行分析，计量资料用均数±标准差（x±s）表示，采用t检验，计数资料采用χ2检验，以P < 0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 试验完成情况

治疗组脱落4例，17例患者完成了72周的治疗;对照组脱落2例，20例患者完成了72周的治疗。

2.2 两组治疗前后血清HBV-DNA比较

治疗前，两组患者血清HBV-DNA比较差异无统计学意义（P > 0.05）;治疗72周后，治疗组患者血清HBV-DNA低于治疗前及对照组，差异均有统计学意义（P < 0.05）。见表1。

2.3 两组治疗前后血清HBeAg比较

治疗前，两组患者血清HBeAg比较，差异无统计学意义（P > 0.05）;治疗72周后，治疗组患者血清HBeAg低于治疗前及对照组，差异有统计学意义（P < 0.05）。见表2。

2.4 两组治疗前后T淋巴细胞比较

两组CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+组间、组内比较，差异均无统计学意义（P > 0.05）。见表3。

2.5 安全性

治疗72周后，两组患者复查血常规、尿常规、粪常规、肾功能均未见明显异常。

3 讨论

慢性HBV携带者多处于免疫耐受期，其特点是血清HBsAg和HBeAg阳性，HBV-DNA载量高，常常>106 U/mL，但血清ALT正常[3]。而HBeAg阳性和/或HBV-DNA>2000 U/mL（相当于104 cps/mL）是引发肝硬化和肝癌的主要因素。慢性HBV携带者自发性血清HBeAg转换有一定风险，特别是年龄较大者，如果能在治疗中转换，可以显著降低肝损害，故无症状的慢性HBV携带者也需要临床早期干预[4-5]。临床治疗HBV通常选用核苷（酸）类似物与干扰素，且治疗的效果较为理想，国际国内指南都不推荐对其进行抗病毒治疗[3.6-7]，只推荐定期随访，就导致慢性HBV感染者的病情加重。

近年来，中医通过以补肾为主的辨证施治慢性HBV携带者，获得良好疗效[8-11]。根据中医理论，处于免疫耐受期的慢性HBV携带者，以肾虚为主，应从肾治之[8]。首先，从发病机制看，中医认为“正气存内，邪不可干”，“邪之所凑，其气必虚”，“肾为先天之本”，而人体之元气与正气均来源于肾。這能很好地解释为什么围生期和婴幼儿时期HBV感染者一般都有一个较长的免疫耐受期。其次，从脏腑关系看，乙癸同源，当肾肝同治。再次，免疫活性细胞来源于骨髓干细胞，而中医认为肾主骨生髓，且经两个研究证实，肾气的盛衰和胸腺发育、衰退、萎缩的时间基本一致[8-11];推测通过补肾法将能调节免疫，打破慢性乙肝的免疫耐受，从而清除HBV。

肝康健2号以古方五子衍宗丸为底，填精补髓、疏利肾气，另外加入丹参、赤芍、虎杖、大黄、绵陈等药物，均具有活血化瘀、利湿退黄的功效，将所有药物联合使用具有扶正祛邪、标本兼顾之效。五子衍宗丸出自《证治准绳》，属于补肾的特效药方，从古至今一直在沿用，在药方中重用枸杞子、菟丝子，具有补肾益精的功效，作为主药，菟丝子更是具有益阴兼能扶阳、温而不燥、补而不滞的功效;覆盆子、五味子具有固肾涩精、助阳止遗的功效;车前子具有泻肾经虚火的功效，使水窍常开，则小便利而湿热外泄，与补肾药配合使用，具有泻中寓补、补中有泻的功效，是补肾固精平和之药。经现代药理证实，肝康健2号中枸杞多糖、氧化苦参碱、枸杞子、北五味子、覆盆子、赤芍、丹参、大黄、菟丝子有免疫调节作用;五子衍宗丸复方、丹参、大黄、赤芍、虎杖、茵陈均可保护肝细胞功能，并抑制HBV复制和促肝细胞再生的作用[12-18]。

使用抗病毒药物治疗慢性HBV的效果并不是很理想，分析其原因与自身免疫耐受度有直接的关系，张敏等[19]研究发现，发生HBV感染后，特异性T淋巴细胞亚群对病毒清除和疾病的转归起着重要的作用。故目前多数针对慢性HBV携带的免疫调节治疗，希望通过抑制细胞受体及免疫分子对T淋巴细胞功能的抑制作用，从而打破免疫耐受最终清除HBV感染的靶细胞，并彻底消除HBV感染[20-21]。然而本研究发现，通过72周的治疗，肝康健2号可有效降低HBeAg阳性慢性HBV携带者HBV定量、HBeAg定量，提示中医对于抑制HBV复制、调节乙肝免疫耐受方面有肯定的疗效，但对T淋巴细胞亚群无明显影响，可以考虑T淋巴细胞不能代表慢性HBV携带者的特异性免疫功能，提示在中药治疗乙肝过程中存在其他免疫调节途径，还需要进一步寻找敏感的检测指标，从而为取得慢性乙肝免疫治疗的根本性突破。

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（收稿日期：2018-10-31  本文编辑：李亚聪）