冠心病患者血浆富含半胱氨酸蛋白61表达水平及临床意义▲

张 欢 夏 豪 徐 林 范稣圳 余 明 陈 涛

(武汉大学人民医院心血管内科，湖北省武汉市 430060，电子邮箱:2459042670@qq.com)

冠心病的主要病理基础是动脉粥样硬化，而动脉粥样硬化是由高脂血症引起的发生在动脉壁的慢性炎性疾病[1]。近年来，炎症在冠心病发生发展中所起的作用越来越被认可，而炎症因子可促进不稳定粥样斑块的破裂脱落及继发血栓的形成[2]。富含半胱氨酸蛋白61(cysteine-rich protein 61，CYR61)是结缔组织生长因子家族成员。CYR61可通过介导溶血磷脂酸诱导平滑肌细胞迁移来参与动脉粥样硬化的形成[3]。尽管既往有研究表明CYR61与冠心病相关[4]，但目前有关CYR61与冠心病的研究仍然较少。本研究探讨CYR61在冠心病患者中的表达情况及其意义。

1 资料和方法

1.1 临床资料 纳入2018年3～10月于武汉大学人民医院住院的108例冠心病患者(冠心病组)，均经冠脉造影检查确诊。其中心绞痛患者63例(稳定型心绞痛30例，不稳定型心绞痛33例)，急性心肌梗死患者45例；心绞痛、心肌梗死的诊断均符合中华医学会心血管病学分会制定的标准[5]。选取同期入院疑诊为冠心病，但冠状动脉造影检查未见明显狭窄，且有临床证据排除冠脉痉挛及微循环病变的30例患者为对照组。所有研究对象均无严重肝肾功能障碍、恶性肿瘤、免疫系统疾病、血液系统疾病、严重感染，排除近期有服用影响本研究指标药物史的患者。所有研究对象均签署知情同意书。

1.2 资料收集 收集所有患者的临床资料，包括年龄、性别、高血压史、糖尿病史、吸烟史、饮酒史、家族史、药物使用情况，以及入院时的总胆固醇、三酰甘油、LDL-C、HDL-C、超敏C反应蛋白(high-sensitivity C-reactive protein,hs-CRP)、肌钙蛋白水平。

1.3 CYR61的检测方法 所有患者于入院24 h内抽取空腹静脉血5 mL，室温下静置30 min后，于4℃下2 000 r/min离心10 min，取上清备用。采用酶联免疫吸附法检测血浆CYR61水平，试剂盒购自Abcam公司(批号：ab238267CYR61)。

1.4 统计学分析 采用SPSS 19.0软件及MedCalc 19.1软件进行统计分析。非正态分布的资料以M(P25，P75)表示，组间比较采用秩和检验；采用多因素Logistic回归模型分析冠心病发生的独立危险因素；采用受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析CYR61诊断急性心肌梗死的效能。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 冠心病影响因素的单因素分析 冠心病组患者的年龄大于对照组，高血压者比例、血浆CYR61及hs-CRP水平均高于对照组(均P<0.05)。见表1。

表1 冠心病组与对照组的一般临床资料及CYR61水平比较

2.2 冠心病影响因素的多因素分析 将冠心病作为因变量，以年龄、性别、吸烟、饮酒、高血压、总胆固醇、三酰甘油、HDL-C、LDL-C、CYR61、hs-CRP作为自变量，纳入Logistic回归模型进行分析，变量赋值见表2。结果显示，除男性外，血浆 CYR61、hs-CRP水平升高亦是冠心病发生的独立危险因素(均P<0.05)。见表3。

表2 变量赋值

表3 冠心病影响因素的多因素Logistic回归分析

2.3 不同类型冠心病患者的一般资料及CYR61水平比较 心绞痛及急性心肌梗死患者的性别、年龄、吸烟及饮酒史等一般资料差异均无统计学意义(均P>0.05)，具有可比性。急性心肌梗死患者血浆hs-CRP及CYR61水平均高于心绞痛组(均P<0.05)。见表4。

表4 心绞痛组与急性心肌梗死组的一般资料及CYR61水平比较

2.4 CYR61诊断急性心肌梗死的效能 CYR61诊断急性心肌梗死的ROC曲线下面积(area under the curve，AUC)为0.869(95%CI：0.800～0.920，P<0.001)，肌钙蛋白诊断急性心肌梗死的AUC为0.787(95%CI：0.696～0.826，P<0.001)。CYR61的AUC与肌钙蛋白的AUC比较，差异无统计学意义(z=1.148，P=0.251)。见图1、图2。

图1 CYR61诊断急性心肌梗死的ROC曲线

图2 肌钙蛋白诊断急性心肌梗死的ROC曲线

3 讨 论

CYR61是一种重要的促炎因子，其以整合素依赖性方式介导内皮细胞增殖，并通过介导外周血单核细胞、巨噬细胞的黏附和迁移、激活促炎基因谱等途径来诱导平滑肌细胞的增殖[6]。在颈动脉球囊损伤实验模型中，降低CYR61水平可抑制血管平滑肌细胞的增殖，从而减少内膜增生[7]。另一方面，CYR61可与整合素α6β1结合,成为溶血磷脂酸和整合素信号传导的新型桥连分子，使局部黏着斑激酶活化，从而导致平滑肌细胞迁移[3]。此外，Gα12/13可调节血管平滑肌细胞中CYR61的表达，促进血管平滑肌细胞朝内膜迁移并异常增殖，导致新内膜增生[8]。以上途径均在动脉粥样硬化的形成中起到重要作用。有研究表明，在接受冠状动脉移植和颈动脉粥样硬化斑块旋切术患者的动脉中CYR61呈高度表达[8]。本研究中，冠心病组血浆CYR61水平高于对照组，Logistic回归分析也显示血浆CYR61是冠心病发生的独立危险因素之一(P<0.05)，这提示CYR61与冠心病的发生密切相关，CYR61或可作为冠心病一级预防的观测指标以及新的治疗靶点。

冠心病患者的动脉管腔狭窄，可致心肌缺血缺氧，严重时可引发心绞痛，而急剧的缺血缺氧则可引发急性心肌梗死，其病情进展迅速、预后差，甚至危及患者生命，因此尽早诊断急性心肌梗死极为重要。目前，临床上常用肌钙蛋白诊断急性心肌梗死，但由于肌钙蛋白延迟入血，需3～4 h才能显著升高，可能造成部分患者漏诊或延误诊断，尤其是当患者的胸痛症状及心电图改变不显著时[9]。此外，某些可造成心肌损伤的疾病也会导致肌钙蛋白升高，如心肌炎、心力衰竭等，但患者既往存在心电图ST-T的陈旧性改变时，又容易造成误诊[10]。因此，发现更多能反映心肌坏死的可溶性生物标志物能为这些高风险人群的早期诊断和评估提供更多的观测指标[11]。CYR61是一种血管生成诱导剂，不仅能促进新生血管的生成[12]，还可以调节其他血管生成因子(如血管内皮生长因子)的表达和活性[13]，能增加炎症细胞(如单核细胞)的趋化性和黏附性，并且可以促进血小板的聚集，增加斑块的不稳定性及促进血栓的形成。有研究表明，在容易发生破裂的动脉粥样硬化斑块中CYR61的表达水平升高，特别是在新生血管形成的区域或渗透有炎性细胞的区域[14]。此外，CYR61在缺血性心肌病患者的心肌细胞和心肌梗死后心脏重塑的心肌组织中高度表达[15-16]。在本研究中，与心绞痛患者相比，急性心肌梗死患者血浆CYR61水平增高(P<0.05)，提示CYR61可能与动脉硬化斑块不稳定及血栓的形成相关。有研究显示，心肌梗死后患者血浆中CYR61比肌钙蛋白提前升高，诊断心肌梗死的灵敏度更高[14]，这提示CYR61或能作为急性心肌梗死的标志物反映心肌早期损伤。本研究ROC曲线分析结果显示，CYR61诊断急性心肌梗死的AUC为0.869，具有较好的诊断效能；其AUC虽大于肌钙蛋白，但差异并无统计学意义(P>0.05)，因此有待更多的研究以探讨CYR61替代肌钙蛋白早期诊断急性心肌梗死的临床价值。

综上所述，与对照组相比，冠心病组CYR61水平明显升高，CYR61或可成为冠心病的一级预防观测指标。急性心肌梗死患者的CYR61水平明显高于正常对照组及心绞痛组，且其诊断急性心肌梗死具有一定效能，有望成为急性心肌梗死的新型生物标志物，并且为开发治疗靶点提供新思路。但本研究样本量过少，缺乏CYR61动态变化的监测资料，故未来仍需大样本研究来验证其结论。