急性冠状动脉综合征患者外周血单个核细胞TLR4和TNF—α的变化及其临床意义

朱杰 周鑫 胡文杰

摘要：目的：分析急性冠状动脉综合征患者外周血单个核细胞Toll 样受体4（TLR4）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的变化及其临床意义。方法：2017年1月～2018年2月，六安市人民医院收治的急性冠脉综合征患者84例，纳入观察组。同期收治的稳定性心绞痛冠心病患者50例，纳入对照组。观察对照组、观察组对象的外周血单个核细胞TLR4和TNF-α水平。观察组按照预后进行分组，入院时、1周后的外周血单个核细胞TLR4和TNF-α水平。结果：观察组TLR4、TNF-α水平高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。TLR4、TNF-α水平ROC下曲线面积分别为0.924、0.882。观察组84例，其中预后不良的对象35例、预后良好的对象49例。1周后，预后良好与预后不良对象TLR4、TNF-α低于入院时，预后不良对象高于预后良好者，差异有统计学意义（P<0.05）。结论：急性冠状动脉综合征患者外周血单个核细胞TLR4和TNF-α可以作为冠脉疾病诊断指标，同时可以预测患者的预后。

关键词：急性冠状动脉综合征；外周血；TLR4；TNF-α

急性冠脉综合征是冠心病患者常见并发症，已成为人类死亡常见病因之一[1]。因人口老龄化、烟草的泛滥、高血压等慢性疾病的发生率逐年上升，我国冠心病发生率呈快速上升趋势[2]。冠脉综合征预后影响因素较多，本文尝试采用对照研究，分析急性冠脉综合征患者外周血单个核细胞TLR4和TNF-α水平以及变化情况，评价两种指标在急性冠脉综合征诊断、预后预测中的价值。2017年1月～2018年2月，医院收治的急性冠脉综合征患者84例，现报道如下。

1资料及方法

1.1 一般资料

2017年1月～2018年2月，六安市人民医院收治的冠脉综合征患者84例，纳入观察组，其中男50例、女34例，年龄（61.0±8.4）岁，其中不稳定性心绞痛53例、急性心肌梗死31例。纳入标准：①临床资料完整；②明确诊断为急性冠脉综合征；③患者及其家属知情同意。排除标准：①各种原因诱发的急性冠脉综合征，如急性一氧化碳中毒引起急性冠脉综合征；②入院时出现休克，濒死。同期收治的稳定性心绞痛冠心病患者50例，纳入对照组，其中男31例、女19例，年龄（60.5±8.4）岁。纳入标准：①明确诊断为稳定性心绞痛；②知情同意；③门诊收治。排除标准：①其他重大疾病急性发作；②拒绝参与研究。

1.2 方法

所有对象入院时，都采集外周静脉血5ml，检测外周血单个核细胞TLR4和TNF-α。观察组对象需要在1周后，再次采血复查。

采用流式细胞仪检测外周血单个细胞中的TLR4、TNF-α。每份标本分装4管，分别标记为A、B、C、D，加入100μl血清学，A中加入5μl TLR4-APC、5μl FITC-CD14抗体，B管加入二者等量的同型对照抗体，室温下避光反应20min，A、B管中加入1ml溶血素，避光反应5min，室温下2000r/min离心5min，弃上清液。A、B管加入1mlPBS，室温下2000r/min离心5min，弃上清液，加入200μl鞘液重悬。按照规范处理C管、D管。流式细胞仪检测，收集20000个细胞/管，选择Cell Quest软件进行细胞分析，以前向角、侧向角固定单核细胞，参照TLRs同型对照设定阴性对照，使同型对照阳性率在2%以下，检测单个核细胞TLR4阳性表达率，同法严格按照说明书检测TNF-α。

1.3 观察指标

对照组、观察组对象的外周血单个核细胞TLR4和TNF-α水平。观察组按照预后进行分组，所有对象都进行冠脉介入治疗、血管开通治疗，其中预后良好（血管开通、无严重并发症），预后不良（血管未完全开通、出现心力衰竭等严重并发症）对象，入院时、1周后的外周血单个核细胞TLR4和TNF-α水平。

1.4 统计学处理

采用SPSS18.0软件进行统计学分析，实验室指标外周血单个核细胞TLR4和TNF-α指标水平服从正态分布，采用（ ±s）表示，服从正态分布，比较采用t检验或配对t检验，以P<0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 诊断价值分析

观察组TLR4、TNF-α水平高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。TLR4、TNF-α水平ROC下曲线面积分别为0.924、0.882。

2.2 预后价值分析

观察组84例，其中预后不良的对象35例、预后良好的对象49例。1周后，预后良好与预后不良对象TLR4、TNF-α低于入院时，預后不良对象指标高于预后良好者，差异有统计学意义（P<0.05）。见表2。

3 讨论

Toll样受体是一种新型保守模式识别的受体家族，可促进白细胞活化，在先天免疫系统中发挥重要作用[3]。TLR4广泛分布在内皮细胞、免疫系统、肾脏之中，可以识别多种配体，识别DAMPs，可以激活NF-kB，引起炎症细胞因子、趋化因子表达，在炎症、内皮损伤中发挥重要作用[4]。TNF-α是一种重要的细胞损伤相关因子。本次研究显示，急性冠脉综合征患者，TLR4、TNF-α水平高于对照组稳定性心绞痛患者，差异有统计学意义（P<0.05），反映了冠脉综合征对象的炎症、细胞损伤明显偏高，这与冠脉综合征导致急性心肌细胞缺血、冠脉损伤有关[5]。

从预后来看，预后良好、不良的对象入院时、1周后的TLR4、TNF-α水平差异显著，预后不良入院时、1周后指标更高，提示较高水平的对象预后相对更差，同时1周后若仍然处于高位，患者预后更差。高TLR4、TNF-α水平提示患者病情更重，再开通血管难度更大，心肌梗死面积更大，出现再灌注损伤的风险更高，预后也更差。

小结：急性冠状动脉综合征患者外周血单个核细胞TLR4和TNF-α可以作为急性冠脉疾病诊断指标，同时可以预测患者的预后。

参考文献：

[1]何晓全，刘梅林.中国冠心病防治策略[J].中国全科医学，2015，1（18）：239-240

[2]景国际，刘大伟，李敏静，等.平谷地区慢性心力衰竭流行病学调查研究及治疗对策分析[J].中国地方病防治杂志，2016，31（06）：652-653.

[3]刘俊田.动脉粥样硬化发病的炎症机制的研究进展[J].西安交通大学学报（医学版），2015，36（2）：141-152.

[4]饶璇，李元建.内皮细胞损伤与修复的研究进展[J].中国动脉硬化杂志，2017，25（05）：531-535.

[5]王建旗，史旭波，马长生，等. 炎症预测和预防动脉粥样硬化性心血管事件的研究进展[J]. 心血管病学进展，2018，39（5）：687-690.

作者简介：朱杰，（出生于1988年8月）男，安徽省六安市，2015年毕业于江苏大学内科学，现供职于安徽医科大学附属六安医院，住院医师，硕士学位，研究方向：动脉粥样硬化的基础与临床。邮编：237005