重组禽流感病毒二价灭活疫苗对融水香鸭免疫效果

韦钰 曾庆伦 刘佳佳 谢艳林

摘要：为进一步研究重组禽流感病毒二价灭活疫苗对融水香鸭的免疫效果，该研究选择某养殖场养殖的14日龄融水香鸭120只，按随机原则将其划分为3个组别，第1个组别在14日龄进行首次免疫接种，第2组融水香鸭在14日龄进行第1次免疫接种，27日龄后进行第2次强化免疫接种，对照组的40只融水香鸭不进行免疫接种。研究结果显示，试验1组免疫21d后，H5免疫抗体平均滴度为5.90log2，合格率为85%，免疫28d后抗体滴度为7.05log2，抗体合格率为100%，但60d后平均滴度逐步下降到5.95log2，抗体合格率为100%。第2组融水香鸭进行2次强化免疫接种，28日龄平均抗体滴度为7.20log2，合格率为100%，60日龄抗体滴度能维持在较高水平为7.20log2，抗体合格率同样为100%。由此可得重组禽流感病毒二价灭活疫苗能有效刺激鸭子产生免疫保护抗体，适用于融水香鸭的免疫，但为提高免疫效果，建议对鸭子进行二次免疫。

关键词：重组禽流感病毒二价灭活疫苗;融水香鸭;免疫效果

中图分类号：S852.4

文献标识码：B

doi： 10.3969/j.issn.2096-3637.2019.09.008

0 引言

免疫接种是预防禽流感的有效措施，但由于禽流感病毒具有很多亚型，变异十分频繁且不同，毒株间极容易通过基因互换而转变形成新的亚型[1]。其中对家禽造成危害最严重的是H5亚型的多个变异分支。在进行及禽流感免疫接种时，单一的禽流感疫苗难以对动物进行有效保护，给该种疾病防控造成极大难度，因此必须结合禽流感病毒的变异情况，及时调整免疫方案，确保所选择的疫苗针对相应的毒株。2017年我国针对禽流感变异情况，启动新型重组禽流感病毒二价灭活疫苗[2]，最开始该疫苗没计适用于鸡群免疫，但由于鸭子对该种病毒也具有一定的敏感性，近年发生鸭子禽流感的病例呈现升高趋势。为进一步验证鸭子领域应用该种疫苗的免疫效果，本次研究选择融水香鸭为材料，利用重组禽流感病毒二价灭活疫苗对融水香鸭进行免疫接种，检测接种后的抗体水平，现将具体研究内容介绍如下。

1 材料与方法

1.1材料选取

该研究选取融水苗族白治县种鸭场提供的融水香鸭120只，日龄为14日龄，临床健康。在试验前采集鸭子的血清和棉签拭子样品进行禽流感病毒检测和母源抗体检测，均符合要求，不存在患病情况。疫苗选择使用重组禽流感病毒二价灭活疫苗，由融水县动物疫病预防控制中心提供，生产批号为01721089，生产日期为2018年8月22日。在进行禽流感病毒抗体水平检测中，主要应用到禽流感病毒荧光检测试剂盒，H5系禽流感病毒血凝和血凝抑制抗原，H7N9亚禽流感病毒血凝和血凝抑制抗原以及相应的标准阴性阳性血清。

1.2试验方法

按随机原则将选取的120只融水香鸭划分成3个组别，每组40只，命名为免疫1组、免疫2组和对照组，按照农业部关于禽流感的免疫程序，免疫1组融水香鸭在14日龄进行第1次免疫注射，颈部皮下免疫注射，每只鸭子注射0.5mL。免疫2组融水香鸭在14日龄进行第1次免疫接种后，间隔21d进行第2次强化免疫接种，首次免疫，每只鸭子颈部皮下免疫注射0.5mL，第2次强化免疫颈部皮下注射1.5mL。对照组不进行疫苗免疫接种。试验组和对照组的融水香鸭分别在免疫前Od和免疫后的第21、28、60天进行采样。对照组融水香鸭每次同步采集血液和拭子样品，对照组、免疫1组和免疫2组每次采集血清样品20份。选择使用荧光检测法采集到的样品进行禽流感病毒检测，CT值<40判定为阴性。采集到的血清样品应用HA/HI检测方法，分别对H5系亚型禽流感病毒抗体和H7N9禽流感病毒抗体进行检测，HI≥4log2表示免疫合格[3]。

1.3数据统计

选择使用SPSS 17.0统计学软件进行数据分析，对免疫1组和免疫2组进行t检验差异分析。

2结果

2.1

H5系亚型禽流感病毒抗体检测

结合表1数据可知，对照组的40只融水香鸭，在第0、21、28和60天，抗体合格率和平均抗体滴度均呈现下降趋势。免疫1组的融水香鸭在第0、21、28和60天抗体合格率呈现上升趋势，平均抗体滴度在0～28d呈现平稳上升趋势，到第60天后呈现下降趋势。免疫2组的融水香鸭进行第1次免疫接种后，21、28、60d H5系亚型禽流感病毒抗体合格率和平均滴度均呈现上升趋势，与免疫1组相比，28d和60 d平均滴度均高于免疫1组。但是免疫1组和免疫2组在免疫接种28 d的95%的置信区间1竽在交叉重叠，但2组之间对比不显著（P>0.05），免疫第60天后2个免疫组别95%置信区间存在无交叉重叠，2组对比差异性极其显著（P<0.01）。见表1。

2.2

H7N9亚禽流感病毒抗体检测

对照组融水香鸭在第0、21、28和60天，H7N9亚禽流感病毒抗体合格率和平均抗体滴度均呈现下降趋势。免疫1组在免疫接种疫苗的0～28d内，抗体合格率和平均抗体滴度均呈现上升趋势，但到第60天后呈现下降趋势。免疫2组的融水香鸭在免疫接种后的第21、28和60天H7N9亚禽流感病毒抗体合格率和平均抗体滴度均呈现上升趋势，28d和60d的平均抗体滴度显著高于免疫1组，但2组之间免疫28d的95%置信区间存在交叉重叠差异性不显著（P>0.05），免疫第60天后2个免疫组别95%置信区间1竽在无交叉重叠，2组对比差异性极其显著（P<0.01）。见表2。

3 结论

该研究选择14日龄的融水香鸭进行重组禽流感病毒二价灭活疫苗免疫试验，免疫试验結果显示，免疫1组和免疫2组融水香鸭分别在免疫接种21d后，H5系亚型禽流感病毒抗体和H7N9亚禽流感病毒抗体合格率均达到85%以上，免疫第60天后，抗体合格率高达100%，这说明本次所选择的灭活疫苗对鸭子具有很好的免疫保护效果。但也应该认识到免疫60d后，鸭子的抗体水平呈现下降趋势，表明进行1次免疫不能维持体内足够的保护能力，需要进行第2次强化免疫接种。

参考文献

[1] 李志贤，虞与理，禹婷婷.三黄鸡免疫重组禽流感病毒（H5+H7）二价火活疫曲血清抗体检测试验报告[J]兽医导刊，2018（19）：69-71.

[2]谢向萌，韦显凯，梁晟，等重组禽流感病毒（H5+H7）二价灭活疫曲在肉鹅中的应用效果评价[J] 中国动物检疫，2018，35（8）：76-80.

[3]罗守保，李少炎，虞育红.重组禽流感病毒（H5+H7）二价灭活曲接种鸭群免疫效果凋查报告[J].现代农业，2018（5）：76-77.