关于血同型半胱氨酸测定方法与意义的概述

耿剑

【摘 要】本文概述了血同型半胱氨酸的几种测定方法，并阐述了各自的原理、优缺点及临床应用情况。同时，还介绍了Hcy的临床意义，Hcy水平与多种疾病存在密切关系，因此对于Hcy的精准检测有助于相关疾病的诊断和治疗。

【关键词】Hcy;检测;临床意义;危险性

【中图分类号】R446 【文献标识码】A【文章编号】1002-8714（2019）11-0293-01

血同型半胱氨酸（Homocysteine，简称Hcy）。血同型半胱氨酸是蛋氨酸和半胱氨酸代谢过程中产生的一种中间产物，其实质是一种含硫氨基酸。Hcy本身并不参与蛋白质的合成，但在蛋氨酸代谢中间充当着重要角色。在血液中，部分Hcy是以同型半胱氨酸-半胱氨酸二硫化物的形式存在，少量以还原型同型半胱氨酸存在，大多数以二硫键与清蛋白结合的形式存在。Hcy有三种主要的代谢途径，（1）蛋氨酸循环，Hcy再甲基化后重新形成蛋氨酸;（2）Hcy在细胞内形成后排到血液中;（3）Hcy参与循环，与丝氨酸发生反应生成胱硫醚，进而生成胱氨酸和α-酮丁酸。Hcy自上世纪在尿液中首次被发现以来，研究发现多种先无性代谢缺陷疾病与Hcy密切关，例如胱硫醚-β-合成酶缺乏能够造成高性半胱氨酸尿症，Hcy代谢异常可导致动脉粥样硬化、血栓、冠心病、静脉栓塞、老年痴呆等疾病。因此准确、高效地测定同型半胱氨酸的浓度，具有十分重要的临床意义。

1 Hcy测定方法

Hcy的测定的主要方法有以下几种：

1.1高效液相色谱法

高效液相色谱法是比较经典的测定方法，该方法运用的是柱前衍生化荧光检测技术。其基本原理如下：（1）在还原剂的作用下，将血样中各种形式的Hcy均转换成还原形式;（2）用荧光试剂将其衍生程Hcy-荧光物质复合物;（3）对衍生后的样品进行色谱分析。因色谱固定相在不同物质上的吸附能力具有差异性，故流动相将其洗脱下来的次序也各不相同。根据这一原理将样品中的不同物质进行分离，再用荧光检测器监测洗脱下Hcy-荧光物质复合物的荧光强度，并与标准品/内标的比值进行比较与计算，就能够测定血液中Hcy的水平。随着检测技术的不断发展，因高效液相色谱法具有操作复杂、时间长、稳定性差等缺点，目前该方法已逐渐被取代。

1.2酶分析法

酶免疫分析法的基本原理：（1）将Hcy转化为游离型;（2）在胱硫醚-β-合成酶（CBS）催化作用下，与丝氨酸反应生成L-胱硫醚;（3）L-胱硫醚在胱硫醚-β-分解酶（CBL）的催化下又生成同型半胱氨酸、丙酮酸、NH3;用乳酸脱氢酶LDH和NADH检测生成的丙酮酸，因NADH转化成NAD+的速率与样品中Hcy的含量成正比，故可以检测到Hcy的水平。该方法具有操作方便、重复性好、数据可靠的优点，因此该方法也是临床上测定Hcy水平的常用方法。

1.3毛细管电泳法

毛细管电泳法的基本原理与高效液相色谱法基本类似：（1）在还原剂的作用下，将血样中各种形式的Hcy均转换成还原形式;（2）用荧光试剂将其衍生程Hcy-荧光物质复合物;（3）对衍生后的样品进行电泳分析。因不同物质所带电荷不同，其等电点也不相同，故在电场中的迁移速度也各不相同，将样品置于10kV的高压电场中，就能够将Hcy进行分离，再用荧光检测器监测洗脱下Hcy-荧光物质复合物的荧光强度，并与标準品/内标的比值进行比较与计算，就能够测定血液中Hcy的水平。该方法因具有操作复杂、耗时长、数据不稳定等缺点，仅应用于实验室研究。

1.4离子色谱法

离子色谱法的基本原理也与高效液相色谱法基本一致，其不同点在于固定相采用的是离子交换物质，根据其对不同离子的吸附能力的差异，从而将Hcy与其他物质进行分离测定。该方法在临床上使用较少，主要应用于实验室研究。

1.5全自动荧光偏振免疫检测法

全自动荧光偏振免疫检测法的基本原理是：（1）用还原剂将Hcy还原出来;（2）用特异性S腺苷Hcy合成酶将Hcy催化成S腺苷Hcy类似物;（3）对特异性的单克隆抗体进行竞争性结合，引起示踪物偏光性的改变，进而检测出Hcy的浓度。该方法具有灵敏度高，速度快的特点，每小时可检测20个样本，但其费用昂贵，不便普及。

2 Hcy的临床意义

2.1 Hcy与脑血管疾病的关系：相关研究显示，Hcy水平与脑梗死病发危险性存在密切关系，当Hcy浓度大于15umol/L时，发生脑梗死的危险性是正常人的6倍，当Hcy浓度大于20umol/L时，发生脑梗死的危险性是正常人的10倍。

2.2 Hcy与动脉粥样硬化的关系：有研究表明，高Hcy血症已成为冠状动脉粥样硬化的一个独立危险因素，当Hcy浓度小于8umol/L时，斑块较小，为0.17-0.76mm，当Hcy浓度大于8umol/L时，斑块明显变大，为0.27-1.04mm，因此可以得出Hcy浓度水平与冠状动脉病变程度正相关。还有研究表明，Hcy能够损伤血管，Hcy能够刺激血管成纤维细胞的增值及活化，Hcy还能诱导动脉粥样硬化斑块的血管平滑肌细胞增殖，从造成动脉粥样硬化。

2.3 Hcy与老年性痴呆的关系：大量相关资料显示，Hcy水平的升高，能够增大患病的危险性。有研究表明，当Hcy浓度大于14umol/L时，患老年性痴呆的危险性能够增加2倍，对阿尔茨海默症和血管性痴呆症患者血浆中Hcy的水平检测发现，两组患者的血浆中Hcy的浓度明显要高于正常人组，因此可以说明，Hcy与老年性痴呆疾病有密切关系。

2.4 Hcy与糖尿病及并发症的关系：国内外大量研究结果表明，Hcy水平能够作为2型糖尿病患者大血管疾病的独立危险因素。Hcy升高在糖尿病伴肾脏、视网膜及血管并发症的患者更为严重，与无糖尿病但具有相同浓度的Hcy相比，糖尿病患者血浆总Hcy每增加5umol/L时，在未来五年的死亡率会增加三倍。另外，Hcy浓度大于14umol/L时还能够导致糖尿病微血管并发症的发生与进展。

2.5 Hcy与其他疾病的关系：Hcy与很多疾病都有关系，比如慢性肾功能衰竭患者普遍有高Hcy血症，其发生率是正常人的33倍。Hcy还与产后抑郁症、习惯性流产、肺血栓栓塞症等有关。

3 结论

同型半胱氨酸作为多种疾病的独立危险因素正被大众广泛接受，因此对于同型半胱氨酸检测的需求和要求也越来越高，虽然目前检测方法有很多，但是这些方法仍然存在很多弊端，有待进一步优化，高效稳定的测定方法对于同型半胱氨酸水平相关疾病的诊断和质量具有重要意义。

参考文献

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