2010-2017年天津市滨海新区健康人群人肠道病毒71型血清中和抗体动态变化研究

宋 婷 ，王 颖 ，王相超 ，崔 壮

（1.天津医科大学公共卫生学院流行病与卫生统计学系，天津300070；2.天津市滨海新区疾病预防控制中心传控科，天津300453）

手足口病（hand-foot-and-mouth disease,HFMD）是一种幼儿常见的急性肠道传染病，以发热和手、足、口等部位出现皮疹为主要临床表现。1995年，中国首次从手足口病患者分离出肠道病毒71型（EV71）[1]。近年来，EV71手足口病疫情持续在我国大规模流行。在我国手足口病病原学调查中，70%的重症病例和90%以上的死亡病例均由EV71引起[2]，引起了社会的恐慌和政府的关注。手足口病是一种急性自限性传染病，人类机体感染肠道病毒后可产生保护性中和抗体，在体内长期存在，能有效保护机体，避免再次感染[3]。而目前针对普通人群EV71中和抗体血清流行病学的研究还较少，仅在小年龄组儿童范围内开展研究[1,3-4]，对于有效防控EV71流行非常不利。本研究通过血清流行病学调查研究，了解滨海新区2010-2017年8年间滨海新区健康人群人肠道病毒71型血清中和抗体的动态变化，评价当前人群的免疫水平，进而为EV71引起的手足口病监测系统的完善提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 研究人群及资料 2010-2017年，在滨海新区地区开展，每年选择未患过手足口病的在滨海新区居住超过6个月以上的健康人群，分5岁及以下年龄组、5岁以上至15岁年龄组、15岁以上至25岁年龄组、25岁以上至35岁年龄组及35岁以上年龄组。在知情同意的前提下，每年每个年龄组均采用单纯随机的方法至少选择8人，8年共368人。工作人员进行流调随访，填写人口学资料、生活习惯、环境及既往史等信息。

1.2 标本采集 除5岁及以下年龄组人群采集3mL静脉血外，其余年龄组人群均采集5 mL静脉血。全血标本置于真空无菌采血管中，自凝后，分离血清，将血清移到2 mL外螺旋的血清保存管中，外表粘上带有唯一识别号码的标签。将血清置于-20℃以下冰箱中冷冻保存。

1.3 检测方法及判断标准 按照原卫生部发布的《手足口病预防控制指南（2009年版）》中的病毒中和抗体测定的操作步骤进行检测，每份血清标本进行 4 倍系列稀释，即 1:4、1:16、1:64、1:256、1:1 024。以＜1:4判为阴性，≥1:4判为阳性。

1.4 统计学分析 全部资料录入EXCEL数据库，用EXCEL2003制作线图，用SPSS15.0软件进行统计分析，计数资料采用χ2检验，影响因素的分析采用Logistic回归分析。检验水准为0.05。

2 结果

2.1 调查对象基本特征 2010-2017年共采集天津市滨海新区368名健康人群的血清标本，年龄范围在出生至50岁，年龄中位数为20岁，其中5岁及以下年龄组81人，5岁以上至15岁年龄组71人，15岁以上至25岁年龄组75人，25岁以上至35岁年龄组71人，35岁以上年龄组70人。男女比为1∶0.94。368人中有292人EV-A71抗体阳性，占调查对象的79.35%。

2.2 不同年份健康人群EV-A71抗体阳性率 2010-2017年天津市滨海新区健康人群EV-A71抗体阳性率呈周期性变化，有整体逐渐下降的趋势（χ2=6.695，P=0.0 1），2011 年最高为 100%，2016 年最低为70.21%。见图1。

图1 2010-2017年天津市滨海新区健康人群EV-A71抗体阳性率变化动态趋势Fig 1 The trend in the positive rate of EV-A71 neutralizing antibody among healthy people in Binhai New Area of Tianjin,2010-2017

2.3 不同年龄组健康人群EV-A71抗体阳性率

2.3.1 性别 368人中男性178人，EV-A71抗体阳性的为134人，阳性率为75.28%；女性190人，EV-A71抗体阳性的为158人，阳性率为83.16%；经χ2检验，男、女EV-A71抗体阳性率无统计学意义，χ2=3.480，P=0.062。

2.3.2年龄 对不同年龄组人群的EV-A71抗体阳性率进行分析，发现小于等于5岁的人群抗体阳性率最低为59.26%，随着年龄的上升，EV-A71抗体阳性率也逐步升高，至大于35岁年龄组EV-A71抗体阳性率略有下降。经卡方趋势检验χ2=46.531，P＜0.01，有统计学意义，见表 1。

对5岁及以下年龄人群EV-A71抗体阳性率进行比较，1岁年龄组人群EV-A71抗体阳性率最高，为65.00%，随后随着年龄的增加逐渐降低，4岁组EV-A71抗体阳性率最低，为46.67%，至5岁年龄组又略有升高，为55.56%。但对5岁以下各年龄组人群的EV-A71抗体阳性率进行χ2检验发现5岁以下各年龄组人群的EV-A71抗体阳性率没有统计学意义（χ2=1.481，P=0.830）。

表1 2010-2017年天津市滨海新区不同年龄组健康人群EV-A71抗体阳性率比较Tab 1 Comparison of the positive rates of EV-A71 neutralizing antibody among different ages of healthy people in Binhai New Area of Tianjin,2010-2017

2.3.3 抗体滴度 对不同年龄EV-A71抗体滴度进一步分析，发现5岁组及以下年龄组、5岁以上至15岁年龄组、15岁以上至25岁年龄组、25岁以上至35岁年龄组和35岁以上年龄组人群不同抗体滴度构成比有统计学意义（χ2=25.310，P＜0.01），结果显示不同年龄组人群的EV-A71不同抗体滴度构成比有差异。对5个年龄组抗体滴度的构成比采用χ2检验进行两两比较，发现5岁及以下年龄组与5岁以上至15岁年龄组人群的EV-A71抗体滴度构成比没有统计学意义（χ2=2.523，P=0.773）；与其它 3个年龄组人群的EV-A71抗体滴度构成比有统计学意义 （χ2=32.252，P＜0.01；χ2=32.557，P＜0.01；χ2=36.104，P＜0.01）。5岁以上至15岁年龄组与其它3个年龄组人群的EV-A71抗体滴度构成比也有统计学意义 （χ2=22.365，P＜0.01；χ2=25.544，P＜0.01；χ2=25.255，P＜0.01）。其余年龄组两两间比较均无统计学意义（15岁以上至25岁年龄组与25岁以上至35 岁年龄组 χ2=2.341，P=0.800；15 岁以上至 25 岁年龄组与35岁以上年龄组χ2=2.770，P=0.735；25岁以上至35岁年龄组与35岁以上年龄组χ2=6.153，P=0.292），见图 2。

图2 2010-2017年天津市滨海新区不同年龄组健康人群EV-A71抗体滴度变化情况Fig 2 Change in the titer of EV-A71 nertralizing antibody among different ages of healthy people in Binhai New Area of Tianjin,2010-2017

2.4 影响因素

2.4.1 单因素Logistic回归分析结果 本次调查共涉及8个因素，将所有变量进行单因素条件Logistic回归分析，以α≤0.05初步筛选出与健康人群EVA71抗体阳性率有关的因素为：接触过手足口病患者、半年内去过医院2项，见表2。

表2 天津市滨海新区健康人群EV-A71抗体阳性率影响因素单因素Logistic回归分析Tab 2 Univariate Logistic regression analysis of the rate of EV-A71 neutralizing antibody of healthy people in Binhai New Area of Tianjin

2.4.2 多因素的条件Logistic回归分析结果 将单因素分析筛选出有意义的变量及被调查者年龄纳入多因素Logistic回归模型，分析结果表明年龄越大、半年内去过医院患病的风险增加，见表3。

表3 天津市滨海新区健康人群EV-A71抗体阳性率影响因素多因素Logistic回归分析Tab 3 Multivariate Logistic regression analysis of the rate of EVA71 neutralizing antibody of healthy people in Binhai New Area of Tianjin

3 讨论

手足口病是肠道病毒引起的全球性传染病，1980年后我国内地出现相关报道[5]。EV-A71作为手足口病主要病原体之一，是引起重症及死亡病例的主要病原体，患者、无症状带毒者和隐形感染者均是本病的传染源。本研究采集了368名健康人群的血清学标本，标本覆盖了婴幼儿及成人，使用χ2检验及Logistic回归两种方法对结果进行统计分析。因此比较全面客观的反应EV-A71中和抗体在健康人群中的变化特征。

本次通过对天津市滨海新区健康人群EV-A71中和抗体连续8年的横断面调查研究，显示人群抗体阳性率较高，为79.35%。说明手足口病以隐性感染为主，这与天津市河东区健康人群隐性感染状况一致[6]，不同年龄组人群血清EV-A71中和抗体阳性率存在统计学差异，随着年龄的增长呈上升趋势[7]，年龄每增加1岁，EV-A71抗体阳性率就增加9.00%。5岁及以下年龄组儿童中和抗体阳性率仅为59.26%，而5岁及以下年龄组人群EV-A71抗体阳性率变化无统计学意义，提示5岁以下年龄组是EV-A71感染引起手足口病流行的最易感人群，由于该年龄组人群于外界接触密切，集中在托幼机构，可通过日常接触、玩具和其他教学用具传播EV-A71病毒，故该年龄组应作为EV-A71防控的重点对象[8]。

从人群血清EV-A71抗体构成比来看，不同年龄组人群的EV-A71不同抗体滴度构成比有差异（χ2=25.310，P＜0.01）。通过两两比较发现 5 岁及以下年龄组与5岁以上至15岁年龄组人群的EV-A71抗体滴度构成比没有统计学意义，但两年龄组人群分别与其它3个年龄组人群的EV-A71抗体滴度构成比有统计学意义。说明15岁及以下年龄组人群的EV-A71抗体滴度保持在1:4水平，而15岁以上年龄组人群的EV-A71抗体滴度保持在1:4、1:16及1:64等3个水平上。滴度≥1 024在各个年龄组人群中均有，提示人们对EV-A71普遍易感[9]。

经多因素Logistic回归分析发现，半年内未出入过医院人群隐性感染发生的风险小，这可能是由于医疗机构是各种病人聚集的场所，大大增加了直接或间接接触导致感染的概率。这一研究结果与天津市健康人群EV-A71抗体动态变化研究结果一致[10]。

手足口病是滨海新区的主要法定传染病之一，虽然从2017年引进了手足口病疫苗，但其为自费疫苗，群众的接受程度未知，所以作为防控工作者，要开拓思路，对手足口病防控知识的宣传要做到多角多方面。要多通过电视、广播、报纸等大众媒体在人群中普及手足口病防控知识，尤其加强幼儿园老师及家长等重点人群的手足口病相关知识的普及；加强学校、托幼机构以及医疗机构的联合防控，学校、托幼机构应多组织手足口病防控知识的讲座活动，医疗机构应设立手足口病诊疗专室或专区，规范手足口病患儿的就诊流程，一旦发现手足口病患者，应立即转至手足口病专区进行就诊，防止院内的交叉感染；医疗机构还应加强相关科室医务人员的数量，加快就诊速度，降低就诊人员滞留时间，医务人员应做到一诊一洗手，并加强病区的消毒工作。

通过本研究，初步掌握了滨海新区健康人群血清EV-A71抗体分布情况，流行规律及影响因素等流行病学特点，为制定手足口病预防与控制措施，完善EV-A71流行监测系统提供了帮助。