富硒乳酸菌中药制剂对育肥猪免疫、抗氧化能力的影响

2019-10-17吴贵富李抒柏金英海

中国畜牧杂志 2019年10期

高畅，吴贵富，李抒柏，张敏，金英海

（延边大学农学院，吉林延吉 133000）

中药添加剂是将中药成分与中药理论和饲料营养理论相结合而制成的纯天然饲料添加剂，其主要成分为多糖、苷类、挥发油、蛋白质和无机盐等[1]。中药添加剂除提供药物作用，还可为畜禽提供丰富的营养，对畜禽的生长、疾病防控及副产品品质均有良好的促进作用。乳酸菌能改善胃肠道内菌群结构，可用于机体预防和治疗腹泻以及其他肠道疾病。乳酸菌在代谢过程中产生的大量有机酸可以有效降低动物日粮的碱值，增加饲料的适口性和可消化率，提高动物对饲料的利用效率，为畜禽生产创造更多的经济效益[2]。富硒乳酸菌利用乳酸菌微生物的富集特性将无机硒同化为有机硒，提高机体对硒的吸收利用率，降低无机硒的毒性。硒能影响乳酸菌生长、蛋白质表达，还能刺激乳酸菌相关酶的活性，因此富硒乳酸菌活性更高[3]。大量研究表明，富硒乳酸菌、大枣、山楂等中药成分均可提高机体免疫力，促进动物消化[4-8]，且益生菌与中药联合使用具有良好的协同作用，可促进动物生长[9-10]。

本试验以杜×长×大三元杂交育肥猪为研究对象，探讨富硒乳酸菌中药制剂（LSTCM）对育肥猪免疫力及血清、组织中抗氧化能力的影响，为LSTCM 在畜牧生产上的应用提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料试验材料包括富硒乳酸菌[11]（占饲料添加剂的6.3%，延边大学营养试验室自制）、神曲、山楂（辉县市跃辉食品有限公司）、红枣（沧州星盛食品有限公司）、桔梗（延吉西市场）、白术（毫州市众益堂中药材销售有限公司），将上述成分过40 目筛后，按一定比例混合制成LSTCM，饲料添加剂随配随用。

1.2 试验设计及饲养管理选择体况良好、遗传性状相同、体重（57±1.50）kg、4 月龄杜×长×大三元育肥猪60 头，试验场地在图们市富岩养殖场。试验采用单因素变量控制，分为4 个组，每组3 个重复，每个重复5 头猪。对照组饲喂基础日粮，0.1%、0.3%、0.5% 组分别在基础日粮中添加0.1%、0.3%、0.5% LSTCM，其中LSTCM 中硒含量为100 mg/kg。预试期10 d，正试期60 d。

基础日粮由康地饲料有限公司提供，其原料组成及营养成分见表1。在整个试验期间，各组育肥猪在同一猪舍，每个重复饲养于1 栏，保持光照和温度适宜，合理通风，自由采食和饮水，观察每组育肥猪生长和健康情况，随着体重增长适量增加饲喂量，遵循猪场常规管理条例。

表1 基础日粮组成及营养成分

1.3 样品采集

1.3.1 血样采集试验结束后，各组随机选取6 头育肥猪（每个重复选择2 头接近平均体重的猪），在晨饲前用采血器对其进行颈下采血，血液在常温下静置20 min后，3 000 r/min 离心，将获得的血清储存在-80℃冰箱中备用。

1.3.2 肉样采集在育肥猪屠宰前空腹12 h，保证其充足饮水。屠宰后，取第6～7 肋骨处背最长肌1 kg，并采集各组同一部位的肝脏和左肾，储存在-80℃冰箱中备用。

1.4 指标检测免疫球蛋白（IgA、IgG、IgM）含量采用免疫比浊法测定；总抗氧化能力（T-AOC）与谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性采用比色法测定；超氧化物歧化酶（SOD）活性采用黄嘌呤氧化物酶测定；丙二醛（MDA）含量采用硫代巴比妥酸法测定。测定所需试剂盒及检测结果均来自北京华英生物技术研究所。

1.5 统计分析试验数据用Excel 软件整理，并用SPSS 17.0 统计软件进行ANOVA 分析，结果表示为平均值±标准差，P＜0.05 表示差异显著，P＜0.01 表示差异极显著。

2 结果

2.1 LSTCM 对育肥猪血清免疫指标的影响由表2 可得，与对照组相比，各试验组血清中IgA、IgM 和IgG含量均有增加。其中，0.3%、0.5% 组血清中IgA 均高于对照组和0.1% 组（P＜0.01）；0.3%、0.5% 组血清中IgM 和IgG 含量均高于对照组（P＜0.05）。

表2 LSTCM 对育肥猪血清免疫指标的影响 g/L

2.2 LSTCM 对育肥猪血清、组织器官抗氧化指标的影响

2.2.1 LSTCM 对育肥猪血清中抗氧化指标的影响由表3 可以看出，与对照组相比，0.3%、0.5%LSTCM 组血清T-AOC、SOD、GSH-Px 活性极显著增强，MDA 含量均极显著下降。0.1%LSTCM 组血清T-AOC、SOD、GSH-Px 活性较对照组分别提高了16.44%（P＞0.05）、8.29%（P＜0.05）、23.22%（P＜0.01），MDA 含量降低了28.99%（P＜0.05）。各试验组间，0.3%LSTCM 组血清中T-AOC 高于0.1%LSTCM 组（P＜0.01），SOD与GSH-Px 活性高于0.1%、0.5%LSTCM 组（P＜0.01），MDA 含量低于0.1%、0.5%LSTCM 组（P＜0.05）。

2.2.2 LSTCM 对育肥猪组织器官中抗氧化指标的影响从表4 可知，与对照组相比，0.3%、0.5%LSTCM 组肌肉、肝脏、肾脏中及0.1%LSTCM 组肌肉中的T-AOC均极显著提高，0.1%组肝脏中T-AOC 显著提高。各试验组间相比，0.3%LSTCM 组肌肉、肝脏、肾脏中T-AOC均高于0.1%、0.5% LSTCM 组（P＜0.01 或P＜0.05）。

表3 LSTCM 对育肥猪血清抗氧化指标的影响

表4 LSTCM 对育肥猪组织器官中抗氧化指标的影响

0.3%LSTCM 组肌肉、肝脏、肾脏中SOD 均高于对照组与0.1%LSTCM 组（P＜0.01），除肝脏中SOD外均高于0.5%LSTCM 组（P＜0.05），0.5%LSTCM 组肌肉、肝脏中SOD 高于对照组与0.1%LSTCM 组（P＜0.05或P＜0.01）。

0.3%LSTCM 组肌肉、肝脏中GSH-Px 均高于对照组和0.1%、0.5% LSTCM 组（P＜0.01 或P＜0.05），0.3%、0.5%LSTCM 组肾脏中GSH-Px 高于对照组（P＜0.05），对照组与0.1%LSTCM 组间均无显著差异。

0.3%LSTCM 组肌肉中MDA 均极显著低于其他组，肝脏中MDA 显著低于对照组，肾脏中MDA 极显著低于对照组与0.1%LSTCM 组。

3 讨论

3.1 LSTCM 对育肥猪血清免疫的影响 IgA、IgG、IgM 都是血清中重要的免疫指标，三者中IgG 含量最多，且持续时间久，主要对机体内的病毒、病菌起免疫作用[12]；IgA 则对机体的黏膜免疫作用效果显著；IgM 是最先产生的体液免疫蛋白，其作用时间短。邹粮泽[13]试验表明，富硒乳酸菌能增强仔猪的免疫及抗氧化能力。赵燕飞等[14]研究表明，白术通过调控抗菌肽PR-39 和Protegrin-1 的表达从而增强仔猪免疫能力。本试验中，添加LSTCM 后育肥猪血清中免疫球蛋白含量较对照组均有增加，表明LSTCM 可加强育肥猪的免疫力。

3.2 LSTCM 对育肥猪血清、组织抗氧化指标的影响T-AOC、SOD、GSH-Px、MDA 均是反映抗氧化性能的重要指标。机体的抗氧化系统可分为酶促反应系统和非酶促反应系统，SOD 和GSH-Px 是酶促反应系统中清除自由基的主要生物酶，可通过将活性氧分子转化为无毒化合物使机体免受氧化应激和组织损伤[15]。SOD 能破坏超氧自由基并形成H2O2，GSH-Px 及CAT将H2O2分解为水和氧，并防止羟基自由基的形成[16]。MDA 具有细胞毒性，是脂质过氧化的标志，其含量增多意味着机体细胞膜和肝组织被氧化受损[17]。硒在抗氧化和提高机体免疫力方面有着重要作用，是GSH 的重要组成部分，随GSH 一起通过分解机体内过氧化物途径，保护细胞膜不被氧化，清除自由基，提高机体抗氧化性。李乐等[18]试验表明，不同剂量的富硒乳酸菌能不同程度地增强蛋鸡血清、肝脏的抗氧化能力。韩东魁等[19]研究发现，给延边黄牛日粮中添加负离子中药复合制剂能提高其抗氧化能力。本试验结果显示，与对照组相比，LSTCM 试验组均能增强血清、组织与器官中T-AOC、SOD 和GSH-Px 活性，同时降低MDA 含量，表明LSTCM 可增强机体抗氧化能力、降低氧化损伤。