黄石结肠炎散的制备与临床应用

管毓向 安艳苏

（1 云南省曲靖市妇幼保健院 云南 曲靖 655000）

（2 云南省曲靖市食品药品检验检测中心 云南 曲靖 655000）

黄石结肠炎散（以下简称“本品”）系云南省曲靖市妇幼保健院与我市国立中医医院联合研制的纯中药制剂，由川黄连，石榴皮等7味中药组成。具有清热燥湿、理气止痛、收敛止泄之功效。临床用于治疗各类结肠炎取得满意疗效。现将其制法、质量标准、临床应用报道如下：

1.实验材料

1.1 实验仪器

美国安捷伦1260型高效液相色谱仪（包括G1311C系列四元泵，G1314FVWD检测器，G1316A柱温箱，G1329B自动进样器）；KQ-300UDB型双频数控超声清洗器（昆山）；METTLE MS205DU电子天平（上海）。

1.2 材料

硅胶G（山东XX化工有限公司，批号：180425），硅胶GF25（4山东XX化工有限公司，批号：180406）。

1.3 对照品、对照药材及试剂

盐酸小檗碱对照品（批号：110713-201212，中国食品药品检定研究院）；防风对照药材（批号：947-201209，中国食品药品检定研究院）；乙腈为色谱纯；水为重蒸馏水，其余试剂为分析纯。

1.4 样品

“本品”样品由我市国立中医医院生产（批号：20180701，20180902，20181210，20190102，20190218），固肠止泻丸（药店购买，西安XX公司）。

2.处方及制法

2.1 处方

川黄连30g，延胡索（醋炙）30g，木香30g，防风10g，石榴皮10g，罂粟壳（蜜炙）10g，椿根皮10g。

2.2 制法

取川黄连、石榴皮等七味中药材进行净制，延胡索、罂粟壳按规定方法进行炮制，然后加工成细粉，分装，每袋6g。

3.质量标准

3.1 性状

本品应为深黄色至棕黄色的粉末，味苦、涩，具木香特有气味。

3.2 鉴别

鉴别：（1）取“本品”4g，置具塞锥形瓶中，加丙酮20ml，振摇15分钟，滤过，滤液水浴蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为“本品”溶液。另取防风对照药材2g，同法制成对照药材溶液。照TLC[1]实验，取“本品”溶液和对照药材溶液，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，点样量各5μl，展开剂为氯仿-甲醇（8:2），展开，置254nm紫外光下检视。“本品”色谱中，在与防风色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。（鉴别防风的存在）

（2）取“本品”0.2g，置具塞锥形瓶中，加纯化水30ml，超声处理20分钟，过滤，滤液用氨试液调节pH值约9.5，加氯仿20ml，振摇提取，提取物加盐酸-乙醇（1:100）溶液2ml使溶解，作为“本品”溶液。另取盐酸小檗碱对照品5mg，加甲醇25ml使溶解，作为对照品溶液。照TLC[1]实验，分别点于同一硅胶G薄层板上，点样量各5μl，展开剂为正丁醇-冰醋酸-纯化水（10:2:2），展开，置365nm紫外光下检视。“本品”色谱中，在与盐酸小檗碱色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。（鉴别川黄连的存在）

3.3 检查

“本品”应符合中国药典2015年版四部0115[2]之规定。

3.4 含量测定

采用HPLC[3]测定。

3.4.1 色谱条件 色谱柱：美国安捷伦C18色谱反相柱（4.6mm×200mm，3μm）；流动相：乙腈-0.03mol/LKH2PO3溶液（55:45）；流速：1.0ml/min；检测波长：265nm。

3.4.2 对照品溶液的制备 取盐酸小檗碱对照品适量，用水制成含盐酸小檗碱8μg/ml的溶液，经0.45μm微孔滤膜过滤，即得。

图1 高效液相色谱图（A-盐酸小檗碱对照品、B-样品、C-阴性样品）

3.4.3 “本品”溶液的制备 取“本品”细粉约0.2g，置200ml烧杯中，加煮沸的纯化水适量，搅拌使盐酸小檗碱溶解，放冷，转移至200ml容量瓶中，加纯化水稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，经0.45μm微孔滤膜过滤，即得。

3.4.4 阴性样品溶液的制备 取去川黄连的“本品”处方，按“本品”制法制备阴性样品，按“3.4.3”项下制备待测定溶液，即得。

3.4.5 测定方法 按上述色谱条件，进样量10μl，以峰面积按外标法计算，即得。

3.4.6 系统适用性实验与专属性考察 在筛选的色谱条件下，取“3.4.4”项下溶液、“3.4.2”项下溶液与“本品”溶液各10μl进样，记录色谱图，阴性样品溶液在与盐酸小檗碱对照品峰处未见色谱峰出现，说明该方法专属性良好。高效液相色谱图见图1。

3.4.7 线性关系考察 精密吸取“3.4.2”项下的溶液5μl，10μl，15μl，20μl，25μl，分别测定色谱峰面积。以盐酸小檗碱进样量（W，μg）为横坐标、峰面积（A）为纵坐标进行线性回归，回归方程为A=1.37×103W+37.44，r=0.9996。盐酸小檗碱浓度在0.04～0.2mg·ml-1之间线性关系良好。结果见表1。

3.4.8 进样精密度实验 精密吸取“3.4.2”项下的溶液，连续进样6次，其峰面积的RSD为0.72%（n=6），说明进样精密度良好。

3.4.9 重复性实验 取“本品”，研成细粉，取约0.2g，共5份，精密称定，按“3.4.12”项下的方法测定，其结果的RSD为0.94%，说明重复性良好。

3.4.10 样品溶液稳定性实验 取样品溶液，考察其稳定性，实验结果表明样品溶液在制备后8h内测定稳定，能满足测定需要。

表1 盐酸小檗碱线性关系考察结果

3.4.11 回收率实验 取“本品”按“3.4.3”项下制备样品溶液，按“3.4.5”项下方法测定盐酸小檗碱含量为7.98mg·g-1（批号201860701），约0.1g，精密称定，精密加入盐酸小檗碱对照品溶液（50μg·mL-1）2ml，按“3.4.2与3.4.3”项下的方法分别制备对照品溶液与样品溶液，按“3.4.5”项下方法测定，计算，平均回收率为100.21%，RSD=0.49%（n=5）。结果见表2。

表2 加标回收率实验结果

3.4.12 本品中盐酸小檗碱的含量测定 取5个批号的“本品”，按“3.4.3”项下制备样品溶液，按“3.4.5”项下制备对照品溶液，进样量各10μl，以峰面积按外标法定量，结果见表3.

表3 样品测定结果（n=3）

4.临床应用

选取临床上确诊的结肠炎患者298例，随机分为治疗组、对照组，其中治疗组200例，用“本品”作治疗，对照组98例，用固肠止泻丸作对照治疗。

4.1 给药方法治疗组“本品”剂量每次6克，每日2次，饭后口服。对照组固肠止泻丸剂量每次4克，每日3次，口服。

4.2 疗效标准用药一周大便次数明显减少、腹痛、腹泻及其它伴随症状及体征消失或明显减轻为有效，以上症状无明显改善或加重为无效。

4.3 结果见表4。治疗组总有效率为97.5%，对照组总有效率90.8%，经统计学检验，χ2=5.17，疗效治疗组优于对照组，差异有显著性（P＜0.05）。

表4 黄石结肠炎散治疗组与固肠止泻丸对照组疗效比较

5.结论

“本品”合理运用中医标本兼治、治标固本、固肠止泻之理论，具有清热燥湿、理气止痛、收敛止泄之功效。临床用于治疗各种结肠炎（包括慢性非特异性结肠炎、过敏性结肠炎、息肉性结肠炎）。“本品”制法简单，质量容易控制、疗效肯定，在结肠炎治疗中效果满意。