葡萄糖氧化酶对白羽肉鸡生产性能、养分代谢及肠道组织形态的影响

2019-10-15崔细鹏

饲料博览 2019年9期

崔细鹏，王敏，彭宇

（广东溢多利生物科技股份有限公司，广东珠海 519060）

葡萄糖氧化酶（GOD）是一种利用分子氧催化葡萄糖，氧化生成葡萄糖酸，同时产生过氧化氢的需氧脱氢酶。GOD 应用于动物饲料中，具有降低动物肠道pH、抑制有害菌增殖、促进消化等作用，是一种“绿色”、安全的饲料添加剂。研究表明，添加GOD 100 和200 g·t-1可显著提高樱桃谷鸭的平均日增重，降低料重比[1]。而在断奶仔猪日粮中添加GOD 120～300 U·kg-1对仔猪平均日增重、平均日采食量及料重比均无显著影响，但显著改变了仔猪的血清生化指标[2]。由此可知，GOD 作为一种新型饲料酶制剂具有耗氧、杀菌等方面作用，可以提高饲料的养分消化率，维持动物肠道菌群的平衡，降低腹泻率，提高饲料转化率，可在一定程度上替代抗生素、益生菌和酸化剂。本研究拟在白羽肉仔鸡日粮中添加不同浓度水平的GOD，以考察其对黄羽肉鸡生产性能、养分代谢和肠道组织结构的影响。

1 材料与方法

1.1 酶制剂

试验用GOD为粉状固体，酶活1 000 U·g-1，由广东溢多利生物科技股份有限公司提供。GOD 酶活定义为：在37 ℃、pH 6.0的条件下，每min内从过量底物中降解释放1 μmol 产物所需的酶量定义为1个酶活力单位，即1 U。

1.2 试验动物与设计

试验在广东溢多利生物科技股份有限公司产学研试验基地进行。选取200 只遗传背景、批次相同、体重接近的健康1日龄罗斯308白羽肉仔鸡（公母混合雏），采用单因子试验设计，随机分为4 个试验组，每个试验组5 个重复，每个重复10 只（公母各半）。试验分为前期（1～21 d）和后期（22～42 d）两个阶段，每阶段后期进行代谢实验。对照组饲喂玉米-豆粕型基础日粮，试验组分别在基础日粮中添加GOD 50、100 和200 U·kg-1。日粮组成及营养水平见表1。

1.3 饲养管理

试验鸡舍为全封闭式，采用3 层立式笼养。进鸡前对鸡舍设备进行消毒。人工控制光照，试验期红外灯供暖，舍内温度控制：1～3 日龄35 ℃，4～7日龄33 ℃，8～14 日龄30 ℃，15 日龄～试验结束25 ℃。鸡自由采食和饮水，清理粪盘1 次·d-1。饲养期间带鸡喷雾消毒2 次·周-1，按行规免疫程序进行免疫接种。

表1 基础日粮组成及营养水平

1.4 测定指标与方法

1.4.1 生长性能的测定

分别在试验开始第1 天和第21、42 天8：00 对各组鸡空腹称重（禁食12 h，仅供饮水），同时称量各重复剩余饲料重。每日观察鸡只健康状况，统计死亡率。计算各个阶段的平均日采食量、平均日增重、耗料增重比和死亡率。

1.4.2 养分利用率和表观代谢能的测定

通过外源指示剂法分别于17～21 日龄和38～42日龄进行代谢试验。分别在14 日龄和35 日龄8：00饲喂加入二氧化钛（分析纯）0.3%的试验日粮，预饲3 d，期间观察鸡只采食情况，并于17和38日龄8：00 开始收粪，每隔4 h 收粪1 次，收粪3 次·d-1。以组为单位，把每次收集的粪样混合均匀，挑除其中的羽毛、皮屑等，按粪便量的10%加入浓度为10%的硫酸溶液，混匀放入-20 ℃冰箱保存备用。于21 和42 日龄8：00 结束收粪，收粪期共计4 d。粪样自然解冻后放置于65 ℃烘箱中烘至恒重，回潮24 h后为风干样，粉碎过40目筛，混合均匀，装入样品袋中密封干燥保存，待测定用。

测定饲料与粪中外源指示剂二氧化钛的含量，饲料和粪样中水分、粗蛋白质、粗脂肪、总钙、总磷和总能含量参照GB/T 6435-2006 饲料中水分和其他挥发性物质含量的测定、GB/T 6436-2002饲料中钙的测定、GB/T 6437-2002 饲料中总磷的测定分光光度法[3]。计算公式见式1～2。

式中：A1、A2分别代表饲料和粪干物质中总能或营养物质含量；B1、B2分别代表饲料和粪中指示剂的含量[3]。

1.4.3 肠道pH

试验第43 天，从各组的每个重复分别随机选取1 只接近改组平均体重的肉鸡，颈动脉放血处死，取出十二指肠、空肠和回肠，准确称量各肠段食糜重量。取各段食糜用1：10 的稀释比例加入去离子水，用小型振荡器（250 次·min-1）振荡混合5 min，测定pH。

1.4.4 肠段组织结构观察

剥离出十二指肠、空肠、回肠，各自截取中段约3 cm 的肠道组织，用冰冷的生理盐水缓缓冲洗，浸入pH 7.4的福尔马林溶液中，用于制作石蜡切片。在光学显微镜下观察，每个切片随机抽取5个非连续性视野，每个视野统计3组数据，绒毛长度是指绒毛顶端到绒毛基部的长度，隐窝深度是指肠腺底部到两绒毛之间基部开口处的距离。

1.5 统计分析

试验数据采用SPSS 16.0 软件的One-Way ANOVA 方法进行单因素方差分析，Duncan's 法进行多重比较，结果以“平均值±标准误”表示。

2 结果与分析

2.1 不同添加水平GOD对肉鸡生长性能的影响

不同添加水平GOD 对肉鸡生长性能的影响见表2。

由表2 可知，添加GOD 对各组肉鸡死淘率无影响，试验期各组肉鸡成活率均为100%。与对照组相比，日粮中添加GOD 100 和200 U·kg-1显著提高肉鸡1～21、22～42 和1～42 d平均日增重（P＜0.05）。日粮添加GOD对肉鸡1～21 d平均日采食量无显著影响（P＞0.05），但添加GOD 100 和200 U·kg-1显著增加22～42 d 平均日采食量（P＜0.05），添加GOD 200 U·kg-1显著增加1～42 d 平均日采食量（P＜0.05）。日粮中添加GOD 对肉鸡22～42 d 耗料增重比无显著影响（P＞0.05），但添加GOD 100 和200 U·kg-1显著降低1～21和1～42 d耗料增重比。

2.2 不同添加水平GOD 对肉鸡养分代谢利用率和表观代谢能的影响

不同添加水平的GOD 对肉鸡养分代谢利用率和表观代谢能的影响见表3。

由表3可知，1～21 d添加GOD显著提高肉鸡干物质和表观代谢能的利用率（P＜0.05），添加GOD 100 和200 U·kg-1显著提高粗蛋白质的表观利用率（P＜0.05）。GOD 对1～21d肉鸡钙和磷的利用率无显著影响（P＞0.05）。22～42 d，添加GOD 100 和200 U·kg-1显著增加肉鸡干物质、粗蛋白质和表观代谢能利用率（P＜0.05），添加GOD 200 U·kg-1显著增加钙的表观利用率（P＜0.05）。

表2 不同添加水平的GOD对肉鸡生产性能的影响

表3 不同添加水平GOD对肉鸡养分利用率和表观代谢能的影响

2.3 不同添加水平葡萄糖氧化酶对肉鸡肠道pH 的影响

不同添加水平GOD 对肉鸡肠道食糜pH 的影响见表4。

由表4 可知，添加GOD 对肉鸡十二指肠和空肠食糜pH 无显著影响（P＞0.05），但添加200 U·kg-1GOD显著降低了肉鸡回肠食糜pH（P＜0.05）。

2.4 不同添加量的葡萄糖氧化酶对肉鸡肠道组织结构的影响

不同添加水平GOD 对肉鸡肠道组织形态的影响见表5、图1～3。

由表5、图1～3 可知，肉鸡日粮中添加GOD 对十二指肠、空肠和回肠的绒毛高度、隐窝深度、绒毛高度/隐窝深度均无显著影响（P＞0.05）。

表4 不同添加水平GOD对肉鸡肠道食糜pH的影响

表5 不同添加水平GOD对肉鸡肠道组织形态的影响

图1 不同添加水平GOD对十二指肠肠道形态的影响

图2 不同添加水平GOD对空肠肠道形态的影响

图3 不同添加水平GOD对回肠肠道形态的影响

3 讨论

GOD 在动物胃肠道消化酶作用下产生的葡萄糖酸和过氧化氢能通过消耗肠道中的氧气，通过改善动物肠道微生态平衡和肠道形态，提高动物消化能力，促进动物生长。目前GOD 对黄鸡、猪和肉鸭生长性能的影响已有研究，未见在白羽肉鸡上报道[1-2,4]。白羽肉鸡生长周期短，饲养密度高，因此GOD 能否通过提高营养物质消化率，改善肠道环境和形态来提高肉鸡生长性能需要进一步研究。

3.1 添加不同水平的GOD 剂对白羽肉仔鸡生产性能的影响

庞家满等研究结果表明，GOD 制剂对黄羽肉鸡的日增重和料重比有显著影响，添加葡萄糖氧化酶制剂对黄羽肉鸡的干物质、有机物质、粗蛋白质、粗脂肪的消化代谢有显著影响（P＜0.05）[4]。GOD 在动物胃肠道酶解产生的葡萄糖酸可以提升胃的酸性环境、激活胃蛋白酶活性，以及酶解产生的少量过氧化氢和消耗肠道中的氧气，能有效抑制有害菌、促进有益菌生长、改善动物肠道微生态平衡和肠道形态，从而改善动物肠道健康和消化能力，提高动物对饲料营养物质消化和吸收，促进动物生长。

3.2 不同添加水平的GOD 对肉鸡养分代谢利用率和表观代谢能的影响

养分表观消化率是衡量饲料营养价值的重要指标。消化率受饲料本身的性质、加工和饲喂方法、动物种类与年龄、测定分析方法等因素影响。GOD在胃肠道内发挥酸化剂的作用，能够激活胃蛋白酶，加快饲料中粗蛋白质的消化。本试验发现，饲粮中添加GOD 能够显著提高肉鸡对干物质、粗蛋白质和总能的消化率，与前人研究结果一致[5]。说明饲粮中添加GOD 能够提高肉鸡对饲粮养分的消化吸收，从而提高生长性能。

3.3 不同添加水平的GOD 对肉鸡肠道组织结构的影响

小肠黏膜的上皮绒毛高度和隐窝深度与肠黏膜的吸收能力存在很大的关联，绒毛变短、隐窝变深说明绒毛萎缩，吸收能力下降绒毛的高度与隐窝深度比值越大说明肠上皮表面积越大，消化和吸收能力越强[6]。本试验发现，饲料中添加GOD可降低肉鸡肠道pH，与对照组相比，3个试验组十二指肠pH降低2.03%、2.34%、3.75%，差异不显著（P＞0.05），空肠pH 降低1.43%、2.86%、4.13%，差异不显著（P＞0.05），回肠pH降低2.47%、5.07%、9.18%，其中处理3 组的回肠pH 与对照组差异显著（P＜0.05）。试验各组的十二指肠和空肠的绒毛高度、隐窝深度、绒毛高度/隐窝深度均差异不显著（P＞0.05），且肠黏膜均结构完整，肠绒毛及隐窝均发育良好，未发现葡萄糖氧化酶对肉鸡肠道组织有影响。