高效液相色谱法测定芝麻丸中芝麻素的含量

2019-10-10曹亚兰罗艳萍罗锦杰郑丽美

农产品加工 2019年18期

曹亚兰，罗艳萍，罗锦杰，郑丽美

（广东一方制药有限公司，广东佛山 528244）

0 引言

芝麻丸为广东一方制药有限公司研发的产品，主要原料为黑芝麻，含有优质的蛋白质、丰富的矿物质，以及不饱和脂肪酸、维E和珍贵的芝麻素及黑色素，可延缓衰老、滋补肝肾、润养脾肺[1]。芝麻素是其主要活性成分之一，具有抗氧化、降低胆固醇、保护肝脏等生理活性功能[2-3]。试验采用高效液相色谱法（HPLC）测定芝麻丸中芝麻素的含量，为芝麻丸的品质控制提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

芝麻丸（批号：S20180903，S20180918，S20181021，S20181115，S20181201，S20181225，S20190110）广东一方制药有限公司提供；芝麻素对照品（批号：0836-200002），中国食品药品检定研究院提供。

1.2 仪器与设备

Aglient 1260型高效液相色谱仪，美国安捷伦公司产品；AB265-S/10型电子天平，瑞士梅特勒-托利多仪器有限公司产品；KQ-500DE型超声波清洗器，昆明市超声仪器有限公司产品；JYL-C022E型九阳料理机，九阳股份有限公司产品；TDL-4000C型台式离心机，上海安亭科学仪器厂产品。

1.3 方法

1.3.1 色谱条件

色谱柱为Agilent ZORBAX SB-C18（4.6 mm×150 mm，5μm），流动相为80%甲醇，检测波长290 nm，对照品溶液进样量20μL，供试品溶液进样量10μL，流速0.8 mL/min，柱温25℃。

1.3.2 芝麻素对照品储备液

精密称取4.0 mg芝麻素对照品，置于200 mL量瓶中，用适量80%甲醇溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，即得20μg/mL的对照品储备液。

1.3.3 供试品溶液

精密称取粉碎后的芝麻丸约2 g，置于九阳料理机中，加入体积分数80%的甲醇溶液40 mL，均浆30 s，置于具塞离心管中，超声处理30 min，置于离心机中以转速4 000 r/min离心5 min，重复提取2次，合并上清液于100 mL量瓶中，用体积分数80%甲醇溶液定容至刻度，混匀，静置，取上清液用微孔滤膜（0.45μm滤膜）滤过，取续滤液，即得。

2 结果与分析

2.1 专属性考查

取芝麻素对照品储备液与供试品溶液，按上述色谱条件分别注入高效液相色谱仪测定。

芝麻素含量测定HPLC色谱图见图1。

图1 芝麻素含量测定HPLC色谱图

供试品溶液中其他未知成分与芝麻素分离完全，对测定无干扰，芝麻素的保留时间为6.7 min。

2.2 线性关系考查

精密移取芝麻素对照品储备液适量，分别配制质量浓度为1，2，4，10，20μg/mL系列芝麻素对照品溶液，分别进样20μL，按上述色谱条件进行测定，记录峰面积。以芝麻素峰面积积分值（mV×S）为纵坐标（Y）、芝麻素对照品溶液进样量（μg）为横坐标（X），进行线性回归，得回归方程为Y=1 453.7X+2.268 9（R2=0.999 9），结果表明芝麻素在0.02～0.40μg的范围内呈良好线性关系。