银屑病小鼠焦虑样行为学检测与分析

何磊 ，陈军 ，陈丽莉 ，李雪飞 ，王皓 ，牛艳东 ，于淑萍 ，秦树存 ，李保强 ，段昕所

（1.承德医学院附属医院，河北承德067000 2.泰山医学院，山东泰安271000）

银屑病是一种常见的慢性炎症性皮肤病，目前认为是一种多系统性疾病[1]。银屑病影响着患者的心理健康，可以出现各种神经和精神症状，如焦虑等[2]。最新的研究表明有超过7%的患者存在焦虑[3]。虽然银屑病本身与心血管疾病死亡相关，但患银屑病的抑郁症患者有更高的患病风险[4]。因此，本研究拟使用旷场实验以及洞板实验评价银屑病小鼠模型焦虑的行为学改变，从而探讨银屑病对心理健康的影响。

1 材料与方法

1.1 一般资料

1.1.1 实验动物 健康SPF级雄性C57BL/6J小鼠，20 只，10 个月龄，体质量约 18～25 g，（北京维通利华实验动物技术有限公司，实验动物使用许可证号：SYXK（京）2016-0006）。实验期间喂养于泰山医学院动脉粥样硬化研究所实验动物中心。动物饲养于标准动物房：12 h昼夜交替，室温（24±2）℃，空气湿度（50±10）%，除造模及必要的断水断食外，小鼠均可自由进水进食。实验前动物先适应性饲养1周。本实验遵循实验动物3R原则。

1.1.2 主要试剂与仪器 5%咪喹莫特（四川明欣药业有限公司），凡士林（河北兰炼飞天石化），小鼠水迷宫实时测试系统（TopScan美国CSI）。

1.2 方法

1.2.1 银屑病小鼠模型制备 参考van der Fits[5]银屑病样动物模型制备方法。将小鼠通过腹腔注射4%水合氯醛（0.1 mL/kg）进行麻醉，并将其背部约2 cm×2 cm毛发剃除。C57BL/6J小鼠20只按体质量分成2组：正常对照组10只，外用凡士林；银屑病模型组10只，背部脱毛后给予5%咪喹莫特62.5mg/次，1次/d外涂，为期1周。

1.2.2 旷场实验[6]长宽高分别为50 cm×50 cm×40 cm的旷场实验箱，将实验箱内部呈蓝色，将箱底正方形平均分为16小格，沿箱壁的12方格记为外周格，中心4小格为中央格。箱体正上方连接视频记录系统。实验动物初始被放在外侧边缘格，记录实验5 min之内实验动物对各区域的探索表现。

1.2.3 洞板实验[7]长宽高分别为40 cm×40 cm×35 cm的洞板实验箱，底板有16个直径为3 cm，厚1 cm的等大圆孔。实验小鼠放入箱内，记录实验10 min之内小鼠的探洞次数。

1.3 统计学方法 实验结果均采用SPSS统计软件进行数据处理。实验数据均选用t检验。实验结果均以平均数±标准差（±s）表示，P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

银屑病对小鼠焦虑样行为的影响：旷场实验结果显示，银屑病模型组小鼠其探索潜伏期较正常对照组延长，但没有达到统计学意义（P＞0.05，见图1B），总路程较正常对照组缩短（P＜0.001，见图 1C），平均速度较对照组明显下降（P＜0.01，见图1D），中央区域停留时间缩短（P＜0.01，见图 1E），中央区域探索次数较对照组降低（P＜0.001，见图1F）。提示银屑病小鼠存在焦虑样表现。

洞板实验结果显示：银屑病模型组小鼠探索潜伏期较正常对照组延长，但无统计学意义（P＞0.05），见图2B，然而其探洞次数明显降低（P＜0.001），见图2C。提示银屑病小鼠存在焦虑样表现。

图1 旷场实验中银屑病对小鼠的影响

3 讨论

银屑病与心理疾病相关。国内外研究表明，银屑病患者有较高的焦虑患病率，我国约有10.6%的银屑病患者存在焦虑症状[8]。旷场实验以及洞板实验是用于评价动物在新异环境中自主行为、探究行为与紧张度的一种方法，被应用于动物焦虑行为学的评估。本研究为国内外首次采用旷场实验以及洞板实验评价银屑病对小鼠行为学的影响。本实验研究表明，银屑病模型小鼠探索潜伏期较正常对照组延长。旷场实验中，银屑病模型组总路程、平均速度、中央区域停留时间、中央区域探索次数较对照组减少，洞板实验中，银屑病小鼠模型组探洞次数较正常对照组减少。表明银屑病小鼠存在焦虑样行为表现，也从动物实验的角度再次证实了，银屑病对心理的影响。综上所述，银屑病小鼠存在焦虑样行为表现。提示临床需进一步观察银屑病患者心理状态，同时为进一步探讨银屑病伴随心理疾病的研究提供了新的思路。

图2 洞板实验中银屑病对小鼠的影响