复方海藻粥对便秘模型小鼠通便功能的作用研究

白旭，胡波，王尚仪，范雨萌，宋淑亮，梁浩，吉爱国，2，*

（1.山东大学（威海）海洋学院，山东威海264209；2.山东大学药学院，山东济南250012）

便秘是现代老人们生活中的常见问题[1-3]，随着生活方式和工作方式的改变，便秘也越来越多地影响到中青年人的生活[4]。现代很多人往往容易忽视便秘，但是便秘对人的身体健康有着很大的影响和损害[5]，一方面便秘会导致人体内毒素积累，降低五脏功能，甚至可能导致其他疾病的发生[6]，另一方面毒素的长期积累会使机体内分泌系统功能异常，激素代谢失调，导致肝脏的负担加重。

现在一些药物虽然可以有效改善便秘[7-11]，但是都不适合长期使用，而且大部分药物都存在不良反应。针对现状，本研究经长期的技术与实践探索，改变了以往通过单一饮食结构来调节便秘的方法，研究出一种能够通过食疗达到润肠通便、改善便秘症状，同时可以长期食用的复方海藻粥。本研究主要依据药食同源和食品类共同作用促进润肠通便的原则[12-13]，并且充分考虑到复方海藻粥中组合食材芋头、海带、无花果、低聚果糖、大枣、牛磺酸[14-16]等的自身性质与组合作用。其中海带具有消痰，利水的作用；芋头具有通便，调节肠道蠕动功能，调节中气和散结的功能；无花果味甘，性凉，归肺、胃、大肠经，具有开胃，止泻痢，治五痔，为缓和滋养润肠药；大枣，性甘，温，归脾、胃经，补中益气，养血安神；低聚果糖是一种天然活性物质，可以防治腹泻和便秘，在考虑海藻粥功能作用的同时还考虑到其口感。复方海藻粥贯彻的药食同源的原则——以海带为主要变量，将各种食材包括芋头、海带、无花果、低聚果糖、大枣、牛磺酸等一起熬制，不仅兼具每种食材的功效，同时还可以使食材互相调节，相互促进，而且将各种食材以粥的形式熬制，一方面有利于人体消化吸收，相较其他形式更容易发挥润肠通便的效果，另一方面，相较于市面上其他治疗便秘的药品以及其他治疗形式，复方海藻粥食用方便，更加适用于现在缺乏时间的中青年人。以粥的形式服用，在吃饭的同时起到治疗便秘的作用，更容易让人接受。总之经试验验证，复方海藻粥不仅食用方便，可以改善便秘情况，同时还提高了肠道蠕动功能[17]，在用于预防、辅助治疗或治疗便秘中具有良好的效果。本试验不仅可以为海带具有润肠通便的功效提供理论支持，同时为海带的综合利用提供了新的思路。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

芋头粉：江苏振亚食品有限公司；海带：荣成市福星海产有限公司；无花果：荣成市四季鲜生态有限公司；低聚果糖：江门市德昂生物科技有限公司；大枣：乌鲁木齐新边界贸易有限公司；牛磺酸：潜江永安药业股份有限公司；麻仁丸：6 g/袋，太极集团重庆桐君阁药厂有限公司，使用前配制成所需浓度的麻仁丸混悬液；盐酸地芬诺酯：2.5 mg/片，长春长红制药有限公司，使用前配制成所需浓度的复方地芬诺酯混悬液；碳墨混悬液（墨汁，首粒黑便指示剂）：准确称量100 g阿拉伯树胶，溶解至400 mL 水中，待煮沸至溶液澄清透明后，再在溶液中加入50 g 活性碳粉并煮沸3 次，溶液冷却后加水定容到500 mL，于4 ℃冰箱中保存，使用前混匀，加入等量蒸馏水，制得碳墨液（墨汁）待用[18-20]；清洁级SPF 级昆明种雄性小鼠90 只，体质量为 20 g～25 g。

1.2 主要仪器设备

BSA224S-CW 电子天平：德国赛多利斯集；秒表、手术剪、8 号灌胃针、5 cm 注射器：郑州康佳医疗器械有限公司；R4 动物笼具：苏州格勒试验设备有限公司；DF-101S 水浴锅：北京依诺泰仪器有限公司。

1.3 方法

1.3.1 粥的比例

1）低剂量实验组的配比为芋头60%，海带15%，无花果15%，低聚果糖4%，大枣4%，牛磺酸2%。

2）中剂量实验组的配比为芋头55%，海带20%，无花果15%，低聚果糖4%，大枣4%，牛磺酸2%。

3）高剂量实验组的配比为芋头50%，海带25%，无花果15%，低聚果糖4%，大枣4%，牛磺酸2%。

1.3.2 粥的熬制

1）原料的预处理：将芋头粉和海带粉分别过筛，并按照一定的比例均匀混合。

2）浸提液的制备：将无花果和大枣切碎成颗粒状，100 ℃水提30 min，过滤取提取液备用。

3）熬制：在锅中倒入少量冷水，并将芋头粉、海带粉分次倒入，中间适量添水，边搅拌边加热，直至成黏稠糊状，再将水提取的滤液分多次加入，加热搅拌20 min，待混合搅拌均匀后即成，得到复方海藻粥。

1.3.3 实验分组

将90 只昆明雄性小鼠随机分为便秘模型对照组，空白对照组，阳性对照组，高剂量实验组，中剂量实验组和低剂量实验组6 组进行实验。

1.3.4 复方地芬诺酯进行便秘模型诱导实验

将复方地诺芬酯片配制成一定浓度的复方地诺芬酯混悬液，给与小鼠复方地芬诺酯片1.56 g/kg 灌胃进行便秘造模[21-27]，每天一次，连续3 d，期间正常饮食。

1.3.5 小鼠排便实验

第3 天造模结束后，禁食不禁水，实验中阳性对照组给予1.56 g/kg 麻仁丸混悬液灌喂，高、中、低实验组均给与15.2 g/kg 的海藻粥灌喂，空白对照组和模型对照组用等量生理盐水灌喂，灌喂30 min 后以0.2 mL 墨汁灌喂，观察首粒黑便的排出时间，6 h 内每组小鼠的排便情况（大便粒数、大便湿重、大便干重、大便含水量），喂食7 d 并记录。实验中，小鼠均单笼饲养，正常饮食。计算公式：大便湿度/%=[大便湿质量（g）-大便干质量（g）]/大便湿质量（g）×100

1.3.6 小鼠小肠运动实验

第7 天灌胃后，所有小鼠禁食不禁水24 h，第8 天灌喂结束后，每只小鼠灌喂1.0 mL 碳墨液，30 min 后乙醚处死，剖腹，小心剥离并剪取从幽门到回盲部的小肠肠管，放置于平板上，轻轻将小肠肠管拉成一条直线，测量直线的总长度为“小肠总长度”，从幽门到碳墨前端的距离为“墨汁推进距离”，然后用公式计算小肠的碳墨推进率。计算公式：小肠碳墨推进率/%=墨汁推进距离/小肠总长度×100。

1.3.7 统计学处理

2 结果与讨论

2.1 复方海藻粥对小鼠粪便粒数、质量及含水量的影响

对小鼠进行灌喂不同配方的复方海藻粥，实验结果见表1 和表2。

由表1 和表2 可知，模型对照组较空白对照组6 h内的粪便数量、粪便质量和粪便含水量明显下降（p＜0.01），粪便粒数减少约31.37 %，粪便重量减少约25.58 %，含水率减少约14.34%，均符合便秘小鼠大便干结，排便困难的特点，说明复方地芬诺酯造模成功。实验组与空白对照组和阳性对照组相比虽然6 h内粪便粒数、粪便质量、粪便含水量均略偏低，但是实验组与模型对照组之间进行对比，在灌喂一定量的复方海藻粥之后，6h 内粪便粒数、粪便质量、粪便含水量均有增加（p＜0.05），且中、高剂量组有明显上升（p＜0.01），且高剂量组的粪便粒数、质量以及含水率在灌喂复方海藻粥之后各指标的增加基本与阳性对照组一致，高剂量组的6 h 粪便含水率增加百分比为17.51%，与空白对照组16.49%基本一致，表明复方海藻粥可以显著改善小鼠的排便情况，基本可以达到正常水平，且海带的润肠通便效果优于芋头粉。

表1 复方海藻粥对小鼠粪便粒数、质量及含水量的影响Table 1 Effects of instant porridge on the number，weight and water content of stool in mice

表2 实验组比模型组小鼠粪便粒数、质量及含水量的增加量Table 2 The increase in the number，weight and water content of stool in the experimental group compared with the model group

2.2 复方海藻粥对小鼠排便时间的影响

复方海藻粥对小鼠排便时间的影响、实验组比模型组小鼠排便时间的减少量见表3 和表4。

通过表3 和表4 可知，模型对照组的首粒黑便时间较正常对照组明显增加（p＜0.01），与便秘小鼠排便困难的特点符合，结合表1 中6 h 内的粪便数量、粪便质量和粪便含水量明显下降的实验结果说明复方地芬诺酯造模成功。实验组较模型组首粒黑便时间明显缩短，高、中、低剂量组均比模型对照组的时间短（p＜0.01），且随着剂量的增加，首粒黑便时间减少，高剂量组排便时间较模型组时间缩短约28.56%，与阳性对照组30.23%基本一致，说明复方海藻粥中的海带可以更有效改善小鼠的便秘情况。

表3 复方海藻粥对小鼠排便时间的影响Table 3 The effect of instant porridge on the time of defecation in mice

表4 实验组比模型组小鼠排便时间的减少量Table 4 The reduction of defecation time in the experimental group compared with the model group

2.3 复方海藻粥对小鼠小肠推进率的影响

便秘的典型特征之一是肠胃蠕动功能受到影响减慢，故进行了小肠推进率实验，即通过小肠推进率来证明复方海藻粥的肠道改善功能，实验结果见表5。

表5 实验组比模型组小肠推进率的增加量Table 5 The increase of intestinal propulsive rate in the experimental group compared with the model group

由表5 可知，与空白对照组相比，模型对照组的小肠推进率明显降低（p＜0.01），说明复方地芬诺酯造模成功。和模型对照组相比，复方海藻粥高、中、低剂量组均可以明显增加小肠推进率（p＜0.01），促进小鼠的小肠蠕动，高剂量组相比于中、低剂量组小肠推进率明显偏高，高剂量组小肠推进率比模型对照组增加约32.27%，与空白对照组增加35.56%、阳性对照组增加33.07%基本一致，高剂量组复方海藻粥对便秘鼠的小肠蠕动功能改善效果明显，说明海带具有较好的润肠通便功能。

3 结论与讨论

本试验采用地诺芬酯造成小鼠功能性便秘模型，研究复方海藻粥对便秘模型小鼠的便秘改善作用和润肠通便作用。在使用地诺芬酯造模后，小鼠6 h 内排便粒数，排便质量，粪便含水量与空白对照组明显减少，说明造模成功。在用不同配方的复方海藻粥灌喂小鼠后，小鼠的便秘功能得到明显改善。6 h 内小鼠排便粒数高、中、低剂量组分别比模型对照组增加10.75%、22.58%、38.17%，空白对照组和阳性对照组6 h 内小鼠排便粒数分别为45.70 %和40.32 %，可以看出高剂量组的排便增加数已经基本与空白对照组和阳性对照组一致，高剂量组的粪便质量和粪便含水率分别达到25.00 %和17.51 %，与空白对照组34.38 %和16.49%基本一致。从6 h 内小鼠排便粒数、粪便质量和粪便含水率3 个指标来看高剂量组小鼠与模型对照组具有极显著差异（p＜0.01），与空白对照组无显著性差异，说明复方海藻粥可以改善便秘情况，且随着海带剂量的增加便秘情况的改善作用更加明显。空白对照组和阳性对照组的首粒黑便时间分别比模型对照组缩短了41.87%和30.23%，高剂量组时间减少约28.56%，与阳性对照组基本一致，高剂量组首粒黑便时间与模型对照组有极显著性差异（p＜0.01），与空白对照组无显著性差异。同时，高、中、低剂量组与模型对照组相比小肠推进率有极显著性差异的（p＜0.01），与空白对照组相比无显著性差异，且高剂量组小肠推进率比模型对照组增加32.27%，与空白对照组和阳性对照组持平，综合来看，复方海藻粥可以达到改善便秘，润肠通便的作用，且高剂量组效果最佳。

综合实验结果可以说明，复方地芬诺酯片可以成功构建小鼠便秘模型。服用研制的复方海藻粥可以有效增加排便质量，提高粪便含水量，减少首粒黑便排出时间，增加小肠推进率，因此具有明显的润肠通便的作用，且从高、中、低3 个剂量组结果对比来看，高剂量组对小肠蠕动功能改善效果明显，说明海带具有良好的通便作用，复方海藻粥组合中其他食材芋头、无花果、低聚果糖、大枣、牛磺酸各食材均有润肠通便的作用，几种食材相互组合与海带协同发挥作用。虽然与阳性对照相比，润肠通便效果稍差，但是作为无不良反应的食物使用，且可以长期食用，因此仍具有良好的应用和开发前景。