355例产ESBLs大肠埃希菌耐药性分析

马莉 黄梅 熊安英

（泸州市人民医院 四川 泸州 646000）

大肠埃希菌为临床分离出的最常见的一种革兰阴性杆菌，是一种条件致病菌，广泛分布在自然界内，且由于临床广谱抗生素的不断研发及应用，尤其是头孢菌素类抗生素的使用，大肠埃希菌在选择性压力下，发展出现耐药机制[1]。大肠埃希菌产生超广谱β-内酰胺酶是一种较为主要的耐药机制，且为临床治疗带来了较大的困难。对我院近2年尿液分离的产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌的耐药性进行分析。

1.资料与方法

1.1 一般资料

选择2017年1月—2018年12月我院尿液样本数共3163例，分离出大肠埃希菌：752例；检出产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的大肠埃希菌355例，分离率37.5%。排除同一患者的同一部位重复分离菌株。

1.2 方法

菌株的分离、鉴定及药敏：将尿液标本取10ul接种到血琼脂培养基和麦康凯培养基，恒温孵育24h后挑取疑似菌落分纯，再孵育24h。使用梅里埃VITEK2 Compa做鉴定及药敏，补充药敏实验，确证实验依据美国CLSI/NCCLS 2016年标准执行。对仪器鉴定为产ESBLs大肠埃希菌，再做ESBLs的确证实验。：使用头孢他啶、头孢他啶/克拉维酸组合与头孢噻肟、头孢噻肟/克拉维酸组合测量，若加克拉维酸抑菌环的直径与单药测定直径差在5mm以上，确证实验均为产ESBLs大肠埃希菌。

1.3 质控菌株

大肠埃希菌ATCC25922，肺炎克雷伯菌ATCC700603，铜绿假单胞菌ATCC27853，均来自四川省临检中心。

1.4 统计学方法

所有产ESBLs大肠埃希菌数据均进行准确核对和录入，采用WHONET5.6软件分析数据。

2.结果

表 ESBL大肠埃希菌耐药性测试结果

3.讨论

3.1 大肠埃希菌致病性及生物学特性

大肠埃希菌为人体肠道的正常菌群，在自然界中广泛存在，并为一种条件致病菌。当人体出现免疫力降低或者细菌侵入就可能会成为机会致病菌，可能会引发肠道外感染、呼吸道感染、泌尿系感染、消化道感染等，且范围较为广泛。大肠埃希菌引发的肠道外感染主要为泌尿系感染，尤其在泌尿道插管的患者中，由于泌尿道侵入性操作会导致尿道黏膜的皮损，细菌会穿过破损的黏膜屏障，进而侵入到人体内，引发感染的发生，而病原菌的上行也会导致导管的血流感染的发生[2]。

大肠埃希菌在自然界水中可以存活数周甚至数月，且对热抵抗力较强，对多种抗生素，包括链霉素、磺胺类及氯霉素等较为敏感。

3.2 大肠埃希菌耐药机制

随着目前抗生素的广泛使用，大肠埃希菌的耐药性也有明显的增强。由于第三代头孢菌素的过度滥用，选择性压力导致大肠埃希菌产生了产超广谱β-内酰胺酶ESBLs，其可以产生常用抗生素较强阻力的酶，并通过水解切割青霉素（包括氨苄西林）、单环类抗生素及头孢菌素等，导致药物失效。此外研究还发现，部分ESBLs菌株还会对氨基糖苷类药物、磺胺类药物产生水解。

分析导致大肠埃希菌耐药的机制主要为[3]：细菌能够形成多种钝化酶并作用到抗菌药物上，导致抗菌活性丧失；可以改变药物作用靶位，会导致抗菌药物合成失败；可以通过改变细胞壁通透性，细菌突变，并造成细胞壁外膜屏障失去活性，影响药物从细胞外向细胞内的运输，并产生耐药性；细胞膜外存在特殊的药物泵出系统，将进入到细胞内的抗菌药物向细胞外泵出，并导致细菌内的药物浓度降低；细菌代谢途径变化引发多重耐药性操纵子存在；通过转化、结合和传导等在细菌菌群中扩散耐药基因。此外，细菌聚集也会形成粘液并形成生物膜包裹内部菌群，屏蔽抗生素并对抗机体的免疫系统。

本文355例产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌对呋喃妥因、哌拉西林/他唑巴坦、头孢替坦、厄他培南、亚胺培南、阿米卡星的敏感度达到90%以上。同时，也可以看出，部分药物如氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦、头孢唑林、庆大霉素、环丙沙星、左氧氟沙星、复方新诺明均出现了不同程度耐药性。

综上所述，产ESBLs大肠埃希菌耐药性较高，为更好的减少细菌多重耐药，预防暴发流行等情况，需要临床医生合理使用抗生素，并根据药敏结果调整抗菌药物，尽量控制广谱抗菌药物使用量。