某地区汉族人乙醛脱氢酶2基因Glu504Lys位点多态性与饮酒习惯的关系

杜 波 安敬威

（1 阜新市疾病预防控制中心，辽宁 阜新 123000；2 阜新市北控水务有限公司，辽宁 阜新 123000）

人体内的乙醛脱氢酶2（aldehyde dehydrogenase，ALDH2）的主要功能是将人摄入的乙醇所产生的有毒的乙醛代谢为无毒的乙酸，从而起到解毒的作用。然而由于其第12外显子基因G替换为A，从而使野生型ALDH2失去活性。辽宁阜新地区处于半农半牧地区，过量饮酒产生的相关疾病在当地比较严重。本研究考察阜新地区汉族ALDH2基因多态性以及ALDH2基因型与饮酒习惯的关系，我们对辽宁阜新地区322例正常汉族人进行了检测，对提高居民健康水平，预防因饮酒过量相关疾病提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 研究对象：辽宁阜新地区随机抽取322例汉族人群，年龄20～65岁，平均年龄为（40.51±12.53）岁。其中男性志愿者139例，平均年龄为（42.09±10.84）岁]，女性志愿者183人，平均年龄为（37.62±18.17）岁。

1.2 血样采集：全血样品采集，采用真空枸椽酸钠抗凝采血管采集静脉血5 mL，采样后立即-80 ℃保存。

1.3 基因多态性检测

1.3.1 人基因组DNA提取：利用硅膜柱吸附法提取人基因组DNA，提取后的DNA用紫外分光光度法测定浓度后-80 ℃保存。

1.3.2 ALDH2基因扩增：应用PCR技术，扩增人ALDH2基因，引物序列为：ALDH24F 5'-GTCAACTGCTATGATGTGTTTGG-3'，ALDH24R 5'-CCACCAGCAGACCCTCAAG-3'。目的片段为173 bp。PCR扩增体系为50 μL，50 μL PCR体系含有：内含5 μL 10×缓冲液，2 μL模板DNA，0.5 μmol/L引物，0.25 mmol/L dNTP，2.5 mmol/L MgCl2，2 IUTaq酶。扩增后取PCR产物5 μL，2%琼脂糖凝胶电泳1.2 h后紫外下观察电泳条带。

1.3.3 饮酒行为相关流调：调查主要内容有：每次饮酒体积（mL），酒品类型（白酒、红酒、啤酒）、饮用频率（次/月），本研究中定义饮用转化为纯乙醇＞600 mL/月为饮酒组。

1.4 统计分析：实验数据采用SPSS16.0软件进行分析，计数数据比较采用χ2检验，P<0.05认为差异具有统计学意义。

2 结 果

2.1 322例志愿者ALDH2基因变异情况：322例志愿者中，共检出3种基因型，分别为野生纯合型ALDH2*1/*1 211例，突变杂合型ALDH2*1/*2 78例，突变纯合型ALDH2*2/*2 33例；ALDH2*1基因频率为0.776，ALDH2*2基因频率为0.224，ALDH2基因频率符合Hardy-Weinberg平衡。

2.2 饮酒组和非饮酒组基因型频率和等位基因频率的比较：饮酒组的野生纯合ALDH2*1/*1基因型比例高于非饮酒组，但差异没有统计学意义（67.2%比64.3%，χ2=6.71，P=0.106）；饮酒组的ALDH2等位基因*1 基因频率高于非饮酒组，但差异没有统计学意义（0.671比0.882，χ2=2.090，P=0.159）。见表1。

2.3 男性饮酒组和非饮酒组基因型频率和等位基因频率的比较：对于322例志愿者，其中男性139例，对139例男性志愿者分析，男性饮酒组的野生纯合ALDH2*1/*1基因型比例高于非饮酒组，但差异没有统计学意义（57.6%比66.0%，χ2=0.976，P=0.447）；饮酒组的ALDH2等位基因*1基因频率高于非饮酒组，但差异没有统计学意义（0.489比0.266，χ2=2.051，P=0.164）。

2.4 女性饮酒组和非饮酒组基因型频率和等位基因频率的比较：对于322例志愿者，分析其中女性志愿者共183例，女性饮酒组的野生纯合ALDH2*1/*1基因型比例显著高于非饮酒组，差异具有统计学意义（86.7%比63.8%，χ2=0.617，P=0.022）；饮酒组的ALDH2等位基因*1基因频率显著高于非饮酒组，差异具有统计学意义（0.224比0.574，χ2=5.707，P=0.019）。

3 讨 论

本研究发现，辽宁阜新地区汉族族人中ALDH2基因突变频率（34.5%）低于中国南方人群（47.3%）[1]。统计显示，ALDH2基因第487位的GA位点突变率存在明显的地域差异[2]。普遍规律为中国南方人群等位基因频率高于北方地区，本研究结果显示，辽宁阜新地区等位基因*2基因频率为0.224，低于中国南方地区，这与其他研究结果相似。乙醇在体内代谢需要乙醛代谢为乙酸的关键酶——乙醛脱氢酶，此酶将有毒的乙醛代谢为乙酸，从而起到解酒的作用。此酶由ALDH2基因编码，之前研究显示[2]，ALDH2基因第487位的GA位点容易发生突变，导致乙醛脱氢酶的失活。

WHO建议，成年男子每日饮酒量（折合成纯乙醇）不能超过25 mL，成年女性每日饮酒量（折合成纯乙醇）不能超过15 mL，突变型人群饮酒后由于酶的活性缺失，导致体内游离的乙醛无法代谢，使此类人群在即使很少量饮酒后，就会出现脸红、头晕、恶心等酒精中毒症状，这在客观上限制了基因突变型人群的饮酒量，但如果此类人群认为“酒量是练出来的”，这将对其机体产生巨大伤害。所以，基因突变型人群不适合按照WHO建议的普通人每日饮酒量饮酒，否则此类人群将出现酒精中毒，进一步引起酒精性肝病、心血管疾病等饮酒相关疾病。相关研究显示[3]，日本人、中国南方人和中国北方人ALDH2基因突变型分别为49.1%、42.5%和36%，这与我们在的研究结果（34.5%）是相一致的。

表2 饮酒组和非饮酒组基因型频率和等位基因频率比较

本研究结果显示，322例志愿者中，饮酒组和非饮酒组ALDH2基因突变型比例并没有显著差异，但对322例志愿者中的183例女性亚组分析显示，女性非饮酒组的突变型比例显著低于饮酒组，差异具有统计学意义，其原因可能为，女性人群更注重身体健康，对饮酒引起的不是症状更为关注。对于119例男性志愿者，46.2%的男性志愿者为ALDH2基因突变型，但其饮酒量与野生型无显著差异，这可能与男性志愿者的饮酒行为受到社会文化等环境因素影响有关，这说明，对于男性ALDH2基因突变型人群，更应该加强此类人群的饮酒行为的健康干预和健康指导。