布拉氏酵母菌散剂治疗抗生素相关性腹泻疗效及对血TNF-α 和IL-6 水平影响

王忠敏 汤卫红 王惠庭 管敏昌

抗生素相关性腹泻（Antibiotic-associated diarrhea，AAD）是指应用抗生素后发生的、与抗生素有关的腹泻[1]。近年来，儿科临床抗生素滥用现象非常严重[2]。抗生素在杀灭病原菌的同时，也对患者肠道微生态系统造成了破坏。有报道称AAD 的发生率达5%～39%[3]。临床研究显示，微生态制剂能够降低AAD 的发生率，但其作用机制尚不完全明确[4]。殷朝阳等[5]研究显示，AAD 患儿血清肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factors，TNF-α）、白介素-6（Interleukin-6，IL-6）显著升高。本研究通过检测AAD 患儿血清TNF-α、IL-6 浓度变化，探讨TNF-α、IL-6 在AAD 中的变化及布拉氏酵母菌散剂对其影响。

1 临床资料

1.1 一般资料 收集2015 年3 月—2016 年3 月杭州市儿童医院综合病区抗生素相关性腹泻患儿70例，按随机数字法分为对照组和观察组，各35 例。本研究经医学伦理委员会审核通过。所有患儿家长对治疗方案均知情并同意，自愿签署知情同意书。

1.2 诊断标准 符合2001 年原卫生部颁布的AAD诊断标准[6]。

1.3 AAD 程度标准[7]AAD 严重程度[7]：轻度：无脱水，无中毒症状；中度：有脱水或有轻度中毒症状；重度：重度脱水，或有明显中毒症状（烦躁、精神萎靡、嗜睡、面色苍白等）。

1.4 纳入标准 （1）符合AAD 诊断标准：在抗生素治疗期间和（或）结束抗生素治疗2 周内发生，稀或水样便（BBS 5～7 型）≥3 次/天，并持续48h；（2）年龄在6～36 个月；（3）除外食源性腹泻、细菌性痢疾、克罗恩病、肠易激综合征、秋季腹泻、过敏性腹泻及功能性腹泻等。

1.5 排除标准[8]（1）合并严重心、肝、肾等重要脏器疾病；（2）先天性胃肠畸形，免疫性疾病病史者；（3）近2 周内接受局部或全身糖皮质激素、免疫抑制剂或免疫调节剂治疗者；（4）对布拉氏酵母菌散剂有过敏者；（5）院内感染性腹泻。

2 方 法

2.1 治疗方法 两组患儿按照原发病方案及相应补液支持治疗，停用初始治疗的抗生素，根据大便培养及药敏结果选择抗菌素，如果大便培养阴性，经验性选择抗菌素，对照组予蒙脱石散剂（3g×10 包，博福-益普生（天津）制药有限公司，批号T04836）1 岁以下，每天1 袋；1～2 岁，每天1～2 袋；2 岁以上，每天2～3 袋，均分3 次服用，疗程为10 天。观察组予口服布拉氏酵母菌散剂（0.25×6 袋，BIOCODEX（法国，批号3117）3 岁以上儿童：每次1 袋，每天2 次；3 岁以下儿童，每次1 袋，每天1 次，疗程为10 天[9]。

2.2 观察指标 比较两组治疗前、治疗中（治疗第5天）和治疗结束时（治疗第10 天）腹泻次数，并比较两组AAD 发生时间和持续时间。于治疗前和治疗后第5、10 天清晨空腹 静 脉血3mL，3500r/min 离 心10min，分离血清于-20℃冻存备用；采用双抗体夹心ELISA 法测定血浆TNF-α、IL-6 的浓度，试剂盒由Merck 公司提供，严格按说明书操作。

2.3 统计学方法 应用SPSS17.0 统计软件进行数据分析，计量资料以均数±标准差（表示，采用t检验；多组间比较采用单因素方差分析（One-Way ANOVA），均数两两比较采用LSD 法，计数资料比较采用χ2检验，以P＜0.05 表示差异有统计学意义，P＜0.01 为差异有显著统计学意义。

3 结 果

3.1 两组抗生素相关性腹泻患儿一般资料比较 对照组35 例中肺炎18 例，扁桃体炎9 例，支气管炎8例；观察组35 例中肺炎17 例，扁桃体炎8 例，支气管炎10 例，其中抗生素应用种类包括：红霉素、头孢曲松钠、头孢西丁钠、阿奇霉素，抗生素用药种类和剂量经统计学处理，差异无统计学意义（P＞0.05）。两组患儿性别、年龄、严重程度、病程比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。见表1。

表1 两组抗生素相关性腹泻患儿一般资料比较（例）

3.2 两组抗生素相关性腹泻患儿治疗前后腹泻情况比较 治疗前两组腹泻情况比较，差异无统计学意义（t=0.16，P＞0.05）；两组治疗后第5 天，观察组腹泻次数较对照组减少（t=2.45，P＜0.05），两组治疗后第10 天，观察组腹泻次数较对照组显著减少（t=4.28，P＜0.01），见表2。

表2 两组抗生素相关性腹泻患儿治疗前和治疗后第5、10 天腹泻次数比较（次/天

表2 两组抗生素相关性腹泻患儿治疗前和治疗后第5、10 天腹泻次数比较（次/天

注：对照组：按照原发病方案及相应补液支持治疗加蒙脱石散剂；观察组：在按照原发病方案及相应补液支持治疗加布拉氏酵母菌散剂

组别对照组观察组t 值P 值例数35 35治疗前8.12±3.14 8.24±3.31 0.16＞0.05治疗第5 天7.45±3.25 5.75±2.52 2.45＜0.05治疗第10 天6.33±3.37 3.37±2.36 4.28＜0.01

3.3 两组抗生素相关性腹泻患儿AAD 发生时间和持续时间比较 两组AAD 发生时间比较，差异无统计学意义（t=0.59，P＞0.05）；两组AAD 持续时间比较，观察组较对照组显著减少（t=4.71，P＜0.01），见表3。

表3 两组抗生素相关性腹泻患儿AAD 发生时间和持续时间比较（天，

表3 两组抗生素相关性腹泻患儿AAD 发生时间和持续时间比较（天，

注：对照组：按照原发病方案及相应补液支持治疗加蒙脱石散剂；观察组：在按照原发病方案及相应补液支持治疗加布拉氏酵母菌散剂

组别对照组观察组t 值P 值例数35 35发生时间4.43±1.23 4.25±1.32 0.59＞0.05持续时间12.37±3.67 8.75±2.68 4.71＜0.01

3.4 两组抗生素相关性腹泻患儿治疗前后血清TNF-α 水平比较 血清TNF-α 水平比较，两组治疗前差异无统计学意义（t=1.65，P＞0.05）；治疗后第5天，观察组低于对照组（t=2.15，P＜0.05）；治疗后第10天，观察组较对照组下降更明显（t=6.18，P＜0.01）。两组治疗第5 天、治疗第10 天血清TNF-α 水平较治疗前均有显著下降（F=105.52～188.17，P＜0.01）。见表4。

表4 两组抗生素相关性腹泻患儿治疗前后血清TNF-α水平比较（pg/mL

表4 两组抗生素相关性腹泻患儿治疗前后血清TNF-α水平比较（pg/mL

注：对照组：按照原发病方案及相应补液支持治疗加蒙脱石散剂；观察组：在按照原发病方案及相应补液支持治疗加布拉氏酵母菌散剂；TNF-α：肿瘤坏死因子-α

组别观察组对照组t 值P 值例数35 35治疗前25.26±3.26 26.60±3.54 1.65＞0.05第5 天17.89±3.58 19.69±3.42 2.15＜0.05第10 天7.54±2.98 11.69±2.61 6.18＜0.01 F 值188.17 105.52 P 值＜0.01＜0.01

3.5 两组抗生素相关性腹泻患儿治疗前后血清IL-6 水平比较 血清IL-6 水平比较，两组治疗前无显著差异（t=0.16，P＞0.05）；治疗后第5 天观察组显著低于对照组（t=3.27，P＜0.05）；治疗后第10 天，观察组较对照组下降更明显（t=3.45，P＜0.01）。两组在治疗第5 天、治疗第10 天血清IL-6 水平较治疗前均有显著下降（F=180.03～257.24，P＜0.01）。见表5。

表5 两组抗生素相关性腹泻治疗前后血清IL-6 水平比较（pg/mL

表5 两组抗生素相关性腹泻治疗前后血清IL-6 水平比较（pg/mL

注：对照组：按照原发病方案及相应补液支持治疗加蒙脱石散剂；观察组：在按照原发病方案及相应补液支持治疗加布拉氏酵母菌散剂；IL-6：白介素-6

组别观察组对照组t 值P 值例数35 35治疗前22.71±4.20 22.54±4.59 0.16＞0.05第5 天15.40±2.45 17.34±2.52 3.27＜0.01第10 天8.89±2.05 10.83±2.62 3.45＜0.01 F 值257.24 180.03 P 值＜0.01＜0.01

3.6 观察组AAD 患儿布拉氏酵母菌散剂治疗时间与血清TNF-α、IL-6 水平相关性 观察组血清TNF-α 和IL-6 水平均与布拉氏酵母菌散剂治疗时间呈显著正相关（r=0.92、0.88，P＜0.01）。

4 讨 论

AAD 一般发生于使用抗菌药物的2 个月内或住院72h 后[10]。研究显示，肠道菌群失调则失去生物拮抗作用，潜在致病菌趁机大量繁殖，益生菌可诱导T细胞、巨噬细胞产生多种细胞因子，包括IL-6 和TNF-α 等，通过激活全身免疫系统，预防AAD 的发生[11]。布拉氏酵母菌散剂是一种儿童常用的口服的真菌类微生态制剂，可干扰致病菌在肠道定植[12]；本研究显示，布拉氏酵母菌散剂治疗AAD，腹泻持续时间显著减少，治疗后第5 天腹泻次数显著减少（P＜0.05），而治疗后第10 天，腹泻次数减少更明显（P＜0.01）。提示布拉氏酵母菌散剂治疗AAD 有效，可有效重建肠黏膜屏障功能。

TNF-α 由激活的单核巨噬细胞产生，在炎症反应充当炎症介质引起组织损伤，同时有免疫调节作用[13]。有研究资料显示，轮状病毒性肠炎患儿急性期血清TNF-α 水平高正常，而细菌感染时TNF-α 明显升高，提示TNF-α 可作为细菌感染急性期炎性指标，具有一定特异性[14]。本研究中原发病经治疗后均显著改善，可以认为TNF-α 浓度与原发病无相关性，而与AAD 相关，治疗前两组TNF-α 浓度无显著差异（P＞0.05），而布拉氏酵母菌散剂治疗后第5 天和第10 天，AAD 患儿血清TNF-α 显著降低，提示布拉氏酵母菌散剂可显著降低血清TNF-α 浓度；进一步直线回归分析显示，血清TNF-α 浓度与布拉氏酵母菌散剂治疗时间呈显著正相关（r=0.92，P＜0.01）。推测布拉氏酵母菌散剂可能通过竞争性作用，干扰致病菌在肠道定植抑制其生长繁殖，从而降低血清TNF-α 水平而发挥作用。

IL-6 是一种免疫调节细胞因子，为活化成纤维细胞及T 细胞分泌的淋巴因子，有启动炎症信号作用，参与肠道炎症的发生与发展过程[15-16]。江先雨等[17]研究显示，急性病毒感染期，血清IL-6 含量显著提高。訾和平等[18]研究显示急性细菌感染时，血清IL-6 水平也有显著升高。提示血清IL-6 水平在细菌和病毒感染时均有显著提高，对细菌感染特异性不强。本研究显示，布拉氏酵母菌散剂治疗后第5 天、第10 天，血清IL-6 水平均较治疗前有显著下降。直线回归分析显示，血清IL-6 浓度下降与治疗时间呈显著正相关（r=0.88，P＜0.01）。提示布拉氏酵母菌散剂显著降低血清IL-6 水平。

综上所述，布拉氏酵母菌散剂可有效减少AAD患儿腹泻次数和持续时间，其作用机制可能通过降低血清IL-6 和TNF-α 水平，从而减轻炎症反应。