献血者ABO血型正反定型不符的原因及应对措施

薛风兰

【摘 要】目的是排除献血者血型鉴定的影响因素，采取积极有效的应对措施，在血型鉴定过程中，按照国家标准操作规程，切实保证血型鉴定的100%准确度，并满足临床输血的安全性和有效性。

【关键词】血型鉴定;ABO血型正反定型不符;影响因素;准确定型;处理方法

【中图分类号】R446.6【文献标识码】A【文章编号】1672-3783（2019）07-03--01

血液从供血者到临床用血的过程中，正反定型是其中的一个重要环节。ABO 血型正反定型不一致的原因可能是操作检验有误或献血者自身红细胞或血清标本存在问题，准确的血型鉴定有助于避免ABO血型正反定型不符的出现，提高血液采集的有效性，进一步保障临床输血安全。通过探讨血型正反定型不符形成的原因，采取更加积极有效的手段，排除血型鉴定的各种影响因素，从而保证输血的安全有效。

1 ABO血型正反定型不符的几种原因

1·1 标准操作规程不到位

表现为操作者工作责任心涣散，没有按标准操作规程操作，未认真核对，不细心观察，工作粗心大意，标本搞错等，试管中未添加标准血清或待检血清，添加血清及红细胞标本过程中放置混乱，这类问题出现时常较严重。还有技术水平差，血型判断错误，红细胞悬液太浓或太淡，红细胞和血清比例不适当，离心速度和离心时间与要求不符，血型试剂保存不当、室温放置时间过久，溶血被错误定性为阴性，冷抗体被误认为真凝集等。还有弱凝集结果判定时肉眼观察不细致，又不用显微镜观察。这些情况的发生都会导致血型误判。

1·2 红细胞标本自身问题

极少数献血者血液中存在某些ABO亚型红细胞（如A亚型、B亚型），红细胞表面抗体太弱，在正定型时出现假阴性表现。

出现红细胞多凝集现象或自身凝集问题。由于遗传性或获得性原因使红细胞表面发生异常，出现多凝集现象;也有某些疾病导致自身凝集现象而出现假阳性表现。

献血者以前接受过异型输血，其体内有其他血型的红细胞存在。

受到红细胞获得性抗原的影响，进行鉴定时血型有可能发生改变。

红细胞悬浮液中含有高浓度的其它血型物质，中和了抗A及抗B血清，出现假阴性表现，如某些献血者因为自身原因可造成血型物质浓度太高，需要多次洗涤红细胞后再进行鉴定。

红细胞悬浮液里含有某种不同成分的抗体，出现假阳性反应，需要最少洗涤三次红细胞后再进行鉴定。

摄入药物、抗凝剂等物质对血型结果造成影响。比如短期内输入大量右旋糖酐等胶体溶液，能吸附红细胞表面的抗原，引起红细胞聚集，可以使原有的抗原性发生改变，从而引起血型的改变。

某些疾病也会导致红细胞表面抗原减弱，在进行血型正定型鉴定时容易出现假阴性结果。

极少数献血者体内含有两类红细胞群体，血型鉴定时出现混合外观凝集。

接受放射性照射过量可能导致红细胞表面抗原发生变异，造成血型改变。

1·3 血清标本出现问题

操作者在用血浆或者血清做反定型时出现的呈凝胶状的纤维蛋白凝块被误认为是凝集。

某些疾病会导致血清中蛋白比例失调，或纤维蛋白含量过高容易出现假凝集。

献血者接受过异型输血容易刺激机体产生不规则抗体。

血清中含有其他不同的凝集红细胞的抗体，此类抗体会凝集红细胞发生假凝集。

献血者血清中的冷抗体造成的自凝现象，容易造成假凝现象，血型鉴定时用其红细胞和生理盐水在37℃水浴五至十分钟做阴性对照。

输入了异型血浆，导致血清中出现了意外抗体。

2 ABO血型正反不符的应对措施

2·1 最有效的处理方法

（1）按照标准操作规程重新鉴定血型，增强操作人员的责任心和技术水平，避免发生误判情况，工作中切勿出现血型试剂加漏或者标本加错，并通过业务技术的积累提高操作的准确性和判断力。

（2）排除标本错误或标准血清被污染引起的非特异性凝集，应该及时更换失效的标准血清和标准红细胞。

（3）为防止漏查冷凝集反应，还要通过显微镜观察配合肉眼观察，确保结果判断的准确性和可靠性。可通过做正定鉴定时用自身红细胞加生理盐水作对照，做反定鉴定时用自身血清加O型红细胞作对照。如果发现对照管出现凝集，说明血清中还有冷凝集素存在。

（4）对于筛选出的存疑标本，应该排除不规则抗原的存在，方法是用生理盐水将标本红细胞洗涤3次，去除吸附在红细胞表面的抗原后再重新鉴定血型。

（5）排除弱抗原抗体反应，方法是抗原抗体反应后应在室温20～24℃环境中放置半小时后，离心观察排除冷凝集素的干扰。

（6）弱凝集现象遇到外力作用会使凝块消失，所以试管从离心机取出后应当轻轻边摇边仔细观察，并配合显微镜观察。

（7）实在无法判定血型的标本，运用聚凝胺法、抗人球法等方法也可以作为鉴定血型的有效手段。

2·2 弱抗原所致血型正反定型不符的应对措施

极少数献血者由于自身体质原因或疾病导致抗原减弱出现正反定型不符，可通过试管凝集试验进行确认。抗原抗体反应时在室温20-24℃环境中放置半小时，能够增强抗A、抗B和抗A1B与红细胞抗原的结合;在4℃放置半小时更能增强抗原抗体的结合，参照O型和自身红细胞对照试验，排除冷凝集反应。

2·3 非特异性凝集所致正反定型不符的处理方法

非特异性凝集主要是冷凝集素在体内作用导致。冷凝集素是冷反应型抗红细胞抗体，在0-4℃时最易和红细胞膜抗原结合，是免疫球蛋白IGM抗体引起的自身免疫性凝集。健康人体内冷凝集素效价一般小于1：16，只在20℃以下反应，4℃反应最强，因此严重干扰了血型的鉴定，只有在37℃孵育10分钟，凝块减弱直至消失，这就表明该标本有冷凝集素。

2016年1月，我站采血车去同煤集团采血，当时外界气温零下十几度，采血车内温度也不太高，其中一位献血着在献血初筛时纸片法血型定为B型，后来站内检验科用试管法复查血型时，发现该献血者血型其实为O型，抗B血清与该献血者红细胞血液有轻微凝集，然后放置在37℃水浴箱孵育十分钟后发现凝集散开，证明该献血者血液中有冷凝集素存在。

综上所述，在AB0血型鉴定试验中，出现正反定型不符，不能立即判定血型结果，而是通过积累的丰富检验经验，建立和完善标准的操作流程，科学地分析ABO血型正反定型不符产生的真实原因，确保及时排除干扰，发现差错，并对异常结果进行系统全面地分析，确保ABO血型准确无误。如果发现正反定型不符的血液，不能用于临床输注，以保障临床用血安全。

参考文献

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