膝关节骨性关节炎与髋关节退变的相关性研究

戴锡金

（沈阳市骨科医院，辽宁 沈阳 110044）

本文对膝关节骨性关节炎与髋关节退变的相关性进行探究，报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料：取60例幼鼠随机等分为三组，即正常对照组、直立组、直立联合Hulth组各20例。

1.2 试剂：乙二胺四乙酸二钠、氯霉素眼膏、磷酸二氢钠I、MMP-13的I抗与II抗、水、二甲苯、乙醇等。

1.3 仪器：电子称、量筒、切片机、自动脱水机、免疫荧光试剂盒、冷冻机、显微镜、常规手术器械等。

1.4 模型建设：把对立组、直立联合Hulth组中所有小鼠的双前肢毛发剔除并进行消毒常规处理，按照一定配比配置麻醉药物进行腹腔注射麻醉，在麻醉药物见效后，对小鼠实施手术操作，主要步骤有双前肢消毒、剥离周边软组织、结扎上肢肱动脉、桡动脉等重要静脉，利用手术器具夹断肱骨、有效止血后进行常规缝合。

1.5 形态学染色

1.5.1 HE染色：采用的药剂有无水乙醇、95%乙醇、85%乙醇、盐酸乙醇、氨水返蓝以及伊红染液等。

1.5.2 甲苯胺蓝染色：无水乙醇、95%乙醇、85%乙醇、甲苯胺蓝染液等，最后应用中性树胶密封，光学显微镜下观察并采片，对三组大鼠关节软骨结合Mankin评分标准进行打分。

1.6 免疫荧光检测：在光学显微镜下观察阳性细胞数目，每一个标本取胫骨内髁、胫骨外髁、关节中心3个主要区段，分别计算上述区段内所有细胞数目以及阳性细胞数目。

1.7 统计学处理：采用SPSS16.0软件包对本次研究数据进行处理，纳入到Excel表格中，计量资料采用（x-±s）表示，计数资料采用百分率（%）表示，比较行χ2检验。

2 结 果

2.1 动物情况：在建设直立大鼠KOA模型时，无死亡现象，但是在建设直立联合Hulth模型时，由2只大鼠死亡，病死率为3.3%。由此可见，去双前肢直立联合Hulth模型具有成活率高、病死率低、操作流程相对简单以及时间短暂等特征[1]。

2.2 膝、髋关节影像学检查：对三组大鼠膝、髋关节影像学检查结果进行整体分析，发现正常对照组中大鼠的膝关节结构与功能无异常，未出现典型性退变症状，但是其他两组大鼠的膝、髋关节可发现有不同程度关节缝隙狭窄、苗杜增高影，这代表直立组与直立联合假Hulth组大鼠的膝、髋关节存在不同程度的退行性改变。

2.3 关节软骨形态学观察

2.3.1 HE染色：直立组与左侧直立联合假Hulth组大鼠髋关节关节面结构平滑，软骨层次结构清楚可见，软骨细胞有次序分布在股骨头上，结合上述表征可以将其视为关节应力汇集的表现；右侧直立联合假Hulth组中关节面较粗糙但结构完整，关节缝隙狭窄，软骨细胞排列无规律，表层的软骨细胞数目减少，可见潮线，考虑髋关节退行性改变。

2.3.2 甲苯胺蓝染：右侧直立联合Hulth组中髋关节面较粗糙但结构完整，染色不均匀，表层的软骨细胞数目降低，且多以线型软骨细胞呈现，认为是髋关节退行性改变[2]。

2.3.3 免疫荧光检测：在不同波段荧光激发下，不同小组Aggrecan免疫荧光表达效果有所差异，除正常对照组之外，其他两组大鼠髋关节Aggrecan所表达的阳性细胞匀称的分布在表层、移形层与放射层的软骨细胞内，阳性细胞表达数目相对较多；右侧直立Hulth组中髋关节Aggrecan所表达的阳性细胞表达很少，荧光强度相对较低，髋关节软骨细胞中Aggrecan所表达的阳性细胞百分比如下表，可见右侧直立联合Hulth组中髋关节软骨的退变。见表1。

表1 Aggrecan所表达的阳性细胞百分比（±s）

表1 Aggrecan所表达的阳性细胞百分比（±s）

组别 例数(n) Aggrecan阳性百分比直立组 12 67.76±2.81左侧直立Hulth组 12 66.31±3.11右侧直立Hulth组 12 60.51±3.30

2.2.3 Collagen X免疫荧光测定：在直立组、左侧直立联合Hulth组中髋关节软骨Collagen X所表达的阳性细胞百分比分别为（34.70±2.02）、（35.95±2.13）、（40.37±2.37）。由于右侧直立联合Hulth组中髋关节软骨的Collagen X阳性，故此，可推测髋关节软骨的退变与其他两组相比更严重。

3 讨 论

膝关节骨性关节炎（KOA）又叫退行性骨关节病，为一种常见的风湿性疾病[4]。有报道显示，KOA的发生发展有明显的解剖与生物学基础，KOA可诱发附近髋关节力学改变，但是否影响髋关节退变依然没有确切结论[5]。

本次研究结果显示：通过对HE、甲苯胺蓝、藏红固绿、Collagenll、MMP-13进行染色，进而其他组相比较，Hulth组大鼠膝关节软骨Mankin评分与MMP-13阳性细胞比例最高、CollagenⅡ阳性细胞比率最低；和其他组相比，Malthus组大鼠同侧髋关节软骨Mankin评分与MMP-13阳性细胞比例最高、CollagenⅡ阳性细胞比率最低，软骨退行病变最严重。膝关节疼痛、僵硬、关节活动范围减缩以及X线检查结果和髋关节对应症状无相关性或相关性微小。由此可见，去双前肢直立联合Malthus组大鼠膝关节退变更为显著，大鼠的KOA可促使其髋关节退变更为严重化，对统计学结果进行分析，得出人体KOA和髋关节的退变之间无相关性的结论。