驴场发生非感染性关节炎的病例报告

王素红,夏 楠,马秀亮,刘桂芹,刘文强

(1.山东省聊城市畜牧站,山东 聊城 252000;2.聊城大学农学院,山东 聊城 252059)

引起动物关节疾病的原因很多,当家畜在不良道路上过度用力或运动,致使关节过度屈伸而发病,造成不同程度的关节损伤,副伤寒沙门菌或链球菌感染也容易发生本病。除非发生严重的病原菌感染,关节炎大多数属于散发病例,但是在规模化养驴场,为了排水便利或美观,经常会对运动场进行硬化改造。而且由于品种改良,种公驴大型化趋势造成关节负重增加,从而造成了比较严重的关节损伤,发病率较高。驴的关节损伤或挫伤会造成疼痛、跛行、不愿运动和关节肿胀等,继发浆液性关节炎,严重影响动物的利用价值。2016-2017年,在山东省规模化驴场,种公驴发生了较多的关节损伤病例,对此进行了诊断,报告如下。

1 发病情况调查

2016年7月-2017年9月,来自山东省某地市的一家繁育驴场,共有54头患有不同程度关节炎症状的成年种公驴(德州驴),动物长期处于硬质砖铺地面的驴舍和运动场,关节疾病发病率为67.5%：驴两侧膝关节有明显水肿、组织增生或肿大等情况(25.9%,14/54),轻度水肿(35.2%,19/54),大部分表现为不愿触碰和运动、走路跛行(66.7%,36/54),参考AAEP跛行分级标准达到3级混合跛行。体温38.5℃,心率45次/min,食欲无明显变化。

1.1 样品采集与处理 随机选取8头发病驴进行常规采血,检测血液常规指标和血清生化指标。无菌穿刺采集膝关节腔组织液,在1 h内(10 000 r/min离心15 min),收集上清液,-80℃保存备用。选取8头健康成年种公驴作为对照。

1.2 细菌分离和鉴定 将关节液病料涂片、染色镜检,然后划线接种于脑心浸液肉汤、血琼脂培养基、麦康凯培养基、TSI培养基和S.S.琼脂平板上,置于37℃培养24 h,观察细菌生长状况。同时接种于改良Thiaucourts氏PPLO固体培养基上,37℃培养5～7 d。

1.3 测定项目及方法 采血后进行血液常规指标(普朗公司)和血清生化指标(全自动生化分析仪TBA-120)的测定。使用ELISA试剂盒(上海赛默生物科技发展有限公司)对血清和关节液中的IL-1β、TNF-α和PGE2的含量进行检测[1-2]。

1.4 数据的统计分析 采用SPSS 17.0统计软件进行数据分析处理。

2 结果与分析

2.1 细菌分离和鉴定结果 病料经培养48 h后,增菌培养基和鉴别培养基上均无细菌生长,经培养7 d后无支原体生长。表明细菌和支原体分离鉴定结果为阴性。

2.2 血液常规指标测定 对发病动物和健康动物的血常规平均指标的比较可知,发生关节炎的动物嗜中性粒细胞数值显著升高,而其中的分叶核含量极显著升高(P＜0.01),单核细胞和白细胞数值显著升高(P＜0.05)。提示发生明显炎症。如表1所示。

表1 血液常规指标的检测结果

2.3 血清生化值测定结果 对发病动物和健康动物的血清生化平均指标的比较可知,发生关节炎的动物血清中的ALP值为322.6±9.52 U/L,与对照相比212.28±5.67 U/L,极显著升高(P＜0.01),提示有骨的疾病或损伤。CK(关节炎组448.15±9.54 U/L,对照组308.10±2.54 U/L)和AST(关节炎组521.85±6.24 U/L,对照组352.62±7.34 U/L)的值显著升高(P＜0.05),如中插彩版图1所示。其他指标未见明显变化,提示发生骨骼肌损伤。使用ELISA试剂盒对关节液中相关炎性因子的检测表明,IL-1β(关节炎组95.56±8.64 pg/L,对照组89.25±6.58 pg/L)、TNF-α(关节炎组 75.61 ±4.59 pg/L,对照组62.89± 6.11 pg/L)和PGE2(关节炎组402.26±26.17 pg/L,对照组359.44±22.58 pg/L)的检测表明,这些炎性因子数值发生显著升高,如中插彩版图2所示。

图1 部分血清生化指标的测定结果

图2 炎性因子的测定结果

3 讨论

关节疾病是马属动物的常见病,包括关节扭伤、挫伤、浆液性关节炎和化脓性关节炎等,大部分都是由于各种外力作用、机械性损伤、不良道路或各种病原体感染等因素有关,以散发居多。文献[3-4]表明在骨关节炎模型中,负重和过度运动可以加快造成兔、鼠的关节损伤。在规模化驴场,由于种公驴长期处于驴舍和运动场等硬质地面活动,加之种公驴的自身体重较大,各关节尤其是膝关节的长期负重明显,过度劳损,造成了疼痛、跛行和不愿运动为临诊特征的关节疾病,并且出现了较多病例。

文献[5-6]报道了新疆零星发生的约80匹马由于沙门菌引起的副伤寒性关节炎病例。本次观察的病例关节液中没有化脓性表现,也没有分离到沙门菌、链球菌和支原体等常见病原体,表明不属于感染性炎症。发生关节炎组的中性粒细胞、单核细胞和白细胞数值显著升高。提示发生明显炎症过程。血液中时间性粒细胞没有显著变化,提示未发生风湿性关节炎等变态反应性疾病。关节炎患病动物血清生化指标中,ALP、CK和AST的值显著升高,其他指标未见明显变化,提示发生关节或肌肉损伤等炎症过程。文献[7]建立的蒙古马骨关节炎模型,TNF-α和PGE2的含量有显著上升趋势,而且促进了蛋白酶的分泌和软骨的降解,可以作为关节炎的检测指标进行参考。而关节液中的生物标志物IL-1β、TNF-α和PGE2等促炎因子的检测结果同时表明,这些种公驴发生了非感染性炎症过程。

建议消除地面硬化,扩大公驴活动场地。临床治疗措施包括制止溢血,促进吸收(温敷或穿刺放液等),镇痛消炎,舒筋活血,防止结缔组织增生,避免遗留关节机能障碍。选择消炎止痛的治疗药物,包括吲哚美辛、双氯酚酸钠等进行对症治疗。