深圳市罗湖区8 071例女性人乳头瘤病毒感染情况及亚型分析*

许晓清， 张水兰， 阚丽娟， 汤花梅， 李育敏， 莫红梅， 张秀明， 熊丹

深圳市罗湖区人民医院医学检验科(广东深圳 518001)

人乳头瘤病毒(HPV)是一种嗜上皮性DNA病毒，可引起人皮肤、黏膜不同程度的增生性病变[1]。文献报道HPV 感染率与宫颈病变严重程度呈显著正相关HPV[2-3]。宫颈病变是宫颈癌发展的一个时期，在此时期进行早期干预可降低宫颈癌进展的概率[4]。根据导致宫颈癌的危险度，HPV分为高危型和低危型。高危型HPV与宫颈上皮内瘤、宫颈癌密切相关，而低危型HPV主要引起尖锐湿疣等良性病变[1]。Lefevere等[5]研究发现，宫颈癌与生活水平、卫生条件以及受教育程度相关联，而HPV检测是宫颈癌筛查的重要手段之一。不同HPV亚型有不同致病能力，多重HPV感染是加重宫颈病变的重要因素。因此，明确一个地区HPV流行的主要基因型，对本地区宫颈癌及其他女性生殖道疾病的防治和治疗有重要意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料 收集2016年1月至2017年1月期间在本院就医并行宫颈HPV筛查的女性患者，共8 071例，年龄16～77岁，平均(34.00±9.75)岁。按不同年龄分为<20岁，20～34岁、35～49岁、≥50岁共4个年龄段。

1.2 仪器与试剂 杭州晶格科学仪器有限公司提供PCR扩增仪Hema 960。深圳港龙生物技术有限公司提供人乳头瘤病毒(HPV)分型试剂盒(基因芯片法)以及检测阅读系统(HPV-GenoCam-9600)。

1.3 方法 采用基因芯片法，利用微量点样技术，严格按说明书操作，将26种HPV型(包括HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68、6、11、40、42、43、44、53、54、55、57、66、67、73)特异性探针点样于基因芯片基质上，制成基因芯片；经过对样本中的DNA进行PCR扩增、杂交和显色，通过HPV分型基因芯片检测阅读系统自动采集图像并分析和报告检测结果。

1.4 统计学方法 采用Excel录入数据，运用SPSS 17.0统计软件，采用2检验R*2列联表的方法比较4个年龄段人群感染率的差异。亚型单独或与其他亚型共同出现的感染率称为该亚型感染率或多重感染重复计算。以P<0.05为差异有统计学意义。任意两组HPV感染情况的比较，采用Bonferroni法进行校正，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 HPV感染总体情况及亚型结果 在8 071例HPV就诊女性当中，有1 467例感染HPV，感染率为18.18%，其中单一亚型感染有1 086例，感染率为13.46%；多重感染有381例，感染率为4.72%。26种亚型除HPV57型没有被检测出外，其余亚型均能检测。感染率居前5位的有高危型HPV16(2.96%)、HPV52(2.17%)、HPV58(2.14%)、HPV51(1.52%)以及低危型HPV6(1.26%)。

2.2 不同年龄段HPV感染及亚型分析 <20岁组HPV感染率为45.83%，感染亚型居前5位的是HPV6、HPV16、HPV58、HPV51、HPV18；20～34岁组HPV感染率为20.46%，感染亚型居前5位的是HPV16、HPV58、HPV52、HPV6、HPV51；35～49岁组感染率为14.98%，感染亚型居前5位的是HPV16、HPV52、HPV58、HPV68、HPV51；≥50岁组感染率为17.59%，感染亚型居前5位的是HPV58、HPV52、HPV16、HPV54、HPV53。HPV总感染率在20岁以下最高，形成第1个高峰，随之逐渐降低，在35～49岁达最低，在50岁以上有所抬高(图1)。≥50岁组与20～34岁组和35～49岁组间的HPV总感染率、高危型及低危型的差异无统计学意义(P>0.05),其余两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。见表1。

2.3 高危及低危HPV感染情况 高危亚型感染患者共1 442例，感染率为17.87%，其中单一感染865例，多重感染586例；低危亚型感染401例，感染率为4.97%，其中单一感染221例，多重感染180例；高低亚型混合感染145例，感染率为1.80%，在20～34岁组感染例数最多。见表2。

4个年龄组中，高危亚型感染率最高的是<20岁组(26.39%)，其余3组感染率分别为14.40%、12.29%、13.68%，呈单一峰分布(图2)。≥50岁与20～34岁、35～49岁间的高危HPV感染率差异无统计学意义(P>0.05)之外，其余两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。见表3。低危亚型感染率最高的是<20岁组(9.72%)，其余3组感染率无明显变化(图3)，≥50岁与20～34岁、35～49岁间的低危HPV感染率差异无统计学意义(P>0.05)，其余两两比较均有统计学意义(P<0.05)。见表4。

图1 各年龄段HPV总感染情况

图2 各年龄段高危型HPV感染情况

图3各年龄段低危型HPV感染情况

表1 不同年龄段高危型HPV感染分布情况 例

表2 不同年龄段低危型HPV感染分布情况 例

3 讨论

深圳市罗湖区人民医院是三级甲等医院，毗邻香港，地处罗湖商业闹市区，就诊人群除了户籍常住居民，还有大量外来流动人口。本文结果显示，医院就诊女性HPV感染率为18.18%，高于刘秀卿等[6]统计深圳市女性HPV感染率(12.88%)，与江卫红等[7]、朱岩等[8]深圳地区HPV总感染率18.35%、20.76%相接近，推测感染差异可能与收集病例和标本例数有关。本文结果表明深圳地区女性HPV总感染率与广东粤西地区(18.77%)[9]、佛山地区(20.696%)[10]结果相符，与毗邻的海南地区(19.38%)[11]也比较相近，但却远低于上海地区(33.652%)[12]、陕西地区(32.14%)[13]和湖北地区(27.86%)[14]。提示女性宫颈HPV感染具有地域差异，可能受到当地受检人群以及经济卫生条件影响，表明对某地区女性人群进行HPV感染筛查和分型检测，了解HPV感染情况和亚型的分布特点，对该地区宫颈癌的早期诊断和预防有重要的临床意义。

表3 不同年龄段混合型、低危和高危型HPV感染情况 例

表4 各年龄段之间HPV感染率的比较

研究表明HPV感染与年龄有着密切关系[15]。Xue等[16]研究显示，不同年龄段高危型HPV感染率呈U型曲线，<20岁和≥60岁HPV感染率较高。本研究中HPV感染率随年龄变化呈近似“U”形分布，在<20岁是感染高峰期，排除本组数据收集过少原因外，可能是因为年轻女性宫颈发育不成熟，自身防御功能较差，导致感染概率增高。随后，在20～34岁与35～49岁HPV感染率下降，推测是因为女性宫颈发育成熟，且大部分HPV感染是一过性感染，大多可通过机体免疫应答而被清除，少数HPV感染发展成持续性感染[16]。50岁以上女性HPV感染率逐渐上升，再形成另一个高峰期。主要是因为绝经期激素发生明显波动，引起机体生理和免疫系统功能紊乱，对病毒的清除能力和抑制作用减弱，容易形成病毒的持续性感染或处于潜伏期的HPV被激活[17]。提示本院应该加强<20岁和≥50岁女性HPV筛查力度，力求降低宫颈病变风险。

本研究结果表明，高危HPV16、HPV18、HPV33、HPV35、HPV39、HPV45、HPV51、HPV52、HPV53、HPV56、HPV58、HPV66、HPV67、HPV68均以<20岁组感染率最高，与李军等[13]、王京伟等[14]报道的<20岁组HPV高危亚型感染率最低不同，可能与该年龄段标本数量少有关。其余高危型HPV31、HPV59、HPV73感染发生率极低(<0.8%)。低危亚型HPV6、HPV11、HPV40、HPV43、HPV55也以<20岁组感染率最高，低危HPV54以20～34岁组感染率最高，低危HPV42、HPV44感染发生率极低(<0.42%)，而低危HPV57未被检测出。各年龄段高危型HPV感染程度均比低危型HPV感染的严重。王洪珍等[18]报道，宫颈病变的严重程度与多重感染和HPV型别数目的多少无关，而是依赖于感染HPV亚型的致病能力。因此，本院应重视各年龄段高危型HPV感染人群，特别是细胞学筛查无异常而HPV高危型HPV16、HPV18阳性的患者，应立即进行阴道镜检查。其余高危型HPV阳性，则定期重复进行细胞学和HPV分型检测。

综上所述，深圳市罗湖区人民医院就诊女性HPV感染趋向低龄化，以单一亚型感染、高危型感染为主，感染最常见亚型为高危型HPV16、HPV52、HPV58和低危型HPV6。该院应加大对育龄妇女预防HPV感染的健康教育和宣传，加强对高风险感染人群(<20岁和≥50岁)进行常见高危型HPV16、HPV52、HPV58、HPV51等的筛查和监测，加强低龄组疫苗的应用。目前关于HPV多重感染组合的规律尚未见明确报道，其临床价值需进一步研究探索。