土霉素分散片的制备及质量评价

蒋公建，魏世军，骆世军，雷元军，范建彪，符华林

（1.重庆市万州区畜牧站，重庆 万州 404100；2.重庆先锋动物药业有限公司，重庆 万州 404100；3.重庆市开州区畜牧兽医局，重庆 开州 405400；4.四川农业大学动物医学院兽药创新制剂工程技术研究中心，四川 成都 611130）

土霉素是20世纪40年代发现的四环素族广谱抗菌药物，兽医临床上广泛用于治疗大肠杆菌或沙门氏菌引起的下痢，多杀性巴氏杆菌引起的牛败血症、猪肺疫、禽霍乱，支原体引起的牛肺炎、猪气喘病，血孢子虫引发的泰勒焦虫病以及放线菌病等[1]。土霉素在水中极微溶解，易溶于稀酸和稀碱，故常用其盐酸盐。临床主要剂型有土霉素注射液、片剂、预混剂、混悬剂等[2-4]。

药物的起效时间与药物剂型息息相关，普通片剂由于崩解时间慢常常导致药物起效较慢。分散片是一种速释固体剂型，是指遇水迅速崩解并均匀分散的片剂，可口服或加水分散后饮用，也可咀嚼或含服，主要适用于难溶性药物及生物利用度较差的药物。现有的土霉素普通片剂，崩解迟缓，药物溶出速度慢，生物利用度差，不能满足临床需要[4]。本研究将土霉素普通片剂制成分散片，利用分散片能迅速崩解、溶出的特点，解决土霉素内服吸收不规则、不完全的问题，为提高其生物利用度奠定基础。

1 材料与方法

1.1 药品及试剂 土霉素，含量9%，来自石家庄某生化有限公司；羧甲基淀粉钠（CMS-Na）、微晶纤维素（MCC）、低取代羟丙基纤维素（L-HPC）、聚乙二醇（PEG4000），均购自安徽某药用辅料有限公司；可溶性淀粉，购自成都某化工公司。

1.2 主要仪器 片剂崩解仪，ZRS-6型智能溶出试验仪，TDP型单冲压片机，紫外分光光度计。

1.3 土霉素分散片的制备方法

1.3.1 崩解剂的筛选 影响分散片质量的最关键因素是崩解剂的选择，本研究主要对崩解剂的种类和用量进行了正交优化。以可溶性淀粉和糊精按3∶1的比例混合作为填充剂，以10%淀粉浆作黏合剂，以崩解时限为主要检测指标，对预试验筛选的羧甲基淀粉钠（CMS-Na）、低取代羟丙基纤维素（L-HPC）和微晶纤维素（MCC）三种不同崩解剂进行考察。3种崩解剂的用量范围分别为：CMS-Na 5%～9%，L-HPC 2%～4%，MCC 10%～20%。然后采取正交设计对各崩解剂的用量进行优化（见表1）。

表1 正交试验因素水平表

1.3.2 制备步骤 采取湿法制粒压片的方法制备土霉素分散片[5]，崩解剂采取内外加入法。具体制备过程：先称取处方量的L-HPC、CMS-Na、MCC混合均匀；随后分别称取处方量的土霉素原药、可溶性淀粉、糊精和50%崩解剂混合，加入适量10%淀粉浆，制成松、软、黏、湿度适宜的软材，过16目筛制粒，置于60℃干燥箱中烘干15 min；整粒过16目筛，加入润滑剂聚乙二醇（PEG4000）和剩余的50%崩解剂混合，用单冲压片机压片即得到土霉素分散片。

1.4 土霉素分散片的质量检测

1.4.1 崩解时限检查 按照《中国药典》附录XA规定的崩解时限检查法[6]，取土霉素分散片各6片，分别置崩解仪吊篮的玻璃管中，温度为37±1℃，启动崩解仪，记录崩解时间。

1.4.2 分散均匀性测定 按照《中国药典》附录IA有关片剂的规定[6]，分散片还应该进行分散均匀性测定，方法：取分散片6片，加入装有100mL水（水温控制在15～25℃）的烧杯中，照崩解时限检查法，选择筛孔内径为710μm的不锈钢筛网，振摇3 min，考察分散片是否全部崩解并通过筛网。

1.4.3 片重差异测定 取20片土霉素分散片，精确称量每片片重，求得平均值，计算片重差异，然后进行统计分析[6]。

1.4.4 脆碎度检查 按照药典2015版附录项下的检查法进行测定[6]。取若干片分散片，使其总重量约为6.5 g，用吹风机吹去脱落的粉末，精密称重，置圆筒中，转动100次，取出，同法除去粉末，精密称重，计算减失重量。

1.4.5 溶出度测定 先建立土霉素含量测定方法[4]。精密称取土霉素0.1 g，用适量稀盐酸溶解并定容至100mL，得到1mg/mL的溶液，分别移取2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0mL于50mL容量瓶中，用水定容至刻度。以水为空白，在354nm处测定吸光度（A）值，将A值对浓度（C）进行线性回归，得标准曲线方程：A=0.006874C-0.002389（r=0.9996，n=6）。结果表明，盐酸土霉素在29.4～116.7μg/mL浓度范围内，吸光度与浓度呈良好的线性关系，精密度和回收率良好，可用于土霉素定量。

参考《中国药典》附录规定的方法测定溶出度[6]。以水为溶出介质（500 mL），取最优处方土霉素分散片和自制土霉素普通片，分别投入溶出度测定仪，设置温度为37±0.5℃，转速为75r/min，然后计时，至规定的取样时间，每次吸取溶出液10mL（同时补充相同体积、相同温度的水），立即用0.45μm微孔滤膜过滤（取样至过滤应在30s内完成）。取澄清滤液，测定吸光度，并根据标准曲线计算药物浓度，然后推算出每片的溶出度。

2 结果与分析

2.1 崩解剂筛选结果 分散片与普通片的主要区别在于崩解时间不一样，因此本研究主要对崩解剂进行了优化，其结果见表2。采用极差法对不同崩解剂组合的崩解时间进行分析，得出3种崩解剂对崩解时间的影响顺序为A＞C＞B，即CMS-Na对崩解时间影响最大，其次是MCC，最后是L-HPC。3种崩解剂的最优组合是A3B2C3。

表2 崩解剂筛选正交试验结果

验证试验：由于最后得到的崩解剂组合并未包括在9次试验中，故进行了验证试验。按处方A3B2C3制备分散片，平行操作3次，结果3份样品的崩解时限分别为45、37、41s，平均41s。可见验证试验和正交试验结果一致，表明该处方稳定可行，所制得的三批分散片外观光洁、完整，在水中崩解快，符合分散片的各项质量指标。

2.2 最优处方土霉素分散片的质量评价

2.2.1 片重差异测定 20片土霉素分散片的片重及平均片重结果见表3。根据《中国药典》规定的片重差异限度计算各片的片重差异[6]，并判断各片是否符合规定。结果表明，制得的分散片片重差异在-2.810%～2.621%，符合《中国药典》规定的“0.3 g以下片剂的片重差异在±7.5%内”，说明本研究研制的土霉素分散片片重差异符合要求。

表3 土霉素分散片片重差异分析

2.2.2 分散均匀性测定 结果显示：所选取的6片分散片全部在3 min内崩解并通过710 μm筛网，符合《中国药典》规定[6]。

2.2.3 脆碎度检查 结果显示：所选取的分散片在规定时间内减失重量为0.27%，未检出断裂、龟裂和粉碎的药片，符合药典规定。

2.2.4 溶出度测定 按照《中国药典》附录XC规定的方法测定溶出度，计算每个药片在不同时间点的累积溶出度[6]，绘制分散片和普通片的溶出度曲线（图1）。从图1可以看出，土霉素分散片在30min时的累积溶出度已经达到85%，而普通片的溶出度仅为55%，分散片的溶出速率明显大于普通片，更有利于药物的吸收和疗效的发挥。

图1 土霉素分散片和普通片的溶出度曲线图

3 小结

控制分散片质量的主要因素是结合主药的性质选择能快速崩解溶出的适宜辅料，崩解剂的种类和量直接影响到分散片的内在质量[5]。本试验选择L-HPC、CMS-Na、MCC三种崩解剂联合使用，比单用一种崩解剂效果更好，而且在制备工艺中采用内外加法，既有利于崩解，又利于溶出，提高了分散性。

CMS-Na是一种白色无定形粉末，由于分子结构特殊致其在水中容易分散并溶胀，吸水后可膨胀至原体积的300倍，是性能优良的崩解剂。MCC具有海绵状的多孔管状结构，具有优良的填充性和崩解性，常用于调节溶出速率。L-HPC具有很大的表面积和孔隙度，所以有很好的吸水速度和吸水量，其吸水膨胀率在500%～700%，崩解后的颗粒较细，利于药物溶出。

通过以上试验结果分析得出，盐酸土霉素分散片崩解迅速、溶出度高，符合分散片制剂要求，所用辅料价格便宜，且制备工艺简单，适合工业化生产，具有良好的开发利用价值。