进展性脑梗死患者血清CTRP3的表达及其与炎症因子的相关性

李柏林 梁春娜 谭文静 阮炎鹏 梁明俊 谢富华

进展性脑梗死（progressive cerebral infarction，PCI）是常见的临床急症，临床表现为局限性脑缺血、神经缺失的症状进行性加重，可持续数小时到数天，致死率和致残率很高。PCI患者血清肿瘤坏死因子 α（tumor necrosis factor α，TNF-α）、白细胞介素 6（interleukin-6，IL-6）释放增多，血小板黏附聚集形成血栓能力增强，动脉血管进一步狭窄，血栓面积增大，神经功能恶化加快[1,2]。C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白 3（C1q/TNF-related protein 3，CTRP3）是一种新脂肪细胞因子，与脂联素高度同源，且能下调炎症因子表达[3]。研究发现在冠状动脉狭窄患者及高血压肥胖患者中CTRP3表达降低，与冠状动脉狭窄程度负相关，过表达CTRP3可以减轻脓毒血症造成的心肌损害[4,5]。CTRP3在调节糖脂代谢、保护心肌缺血损伤以及促进血管新生等方面也发挥正向作用，而CTRP3与PCI患者病情严重程度和炎症因子表达的相关性目前尚不清楚[6]。因此本研究通过观察CTRP3在PCI患者血清中的表达水平，分析CTRP3与PCI患者病情进展及与炎症因子表达的关系，探讨CTRP3在PCI发生和发展中的作用及可能机制，从而辅助判断PCI病情进展情况。

资料与方法

一、一般资料

选择开平市中心医院神经内科自2017年3月至2018年3月收治的PCI患者55例，其中男性28例，女性 27 例，年龄（61.16±7.42）岁，范围 47～72岁。所有患者均根据1995年第四届全国脑血管病学术会议修订的诊断标准，并采用颅脑CT或者MRI等方法确诊，其中PCI患者符合以下标准：（1）入院时神经功能症状较为明显；（2）入院后局限性脑缺血、神经功能缺失症状进行性加重；（3）神经功能缺损评分增加9分或以上；（4）头颅CT复查后排除脑出血和脑缺血再次发作的可能。排除标准：严重心脏疾病、肝肾疾病、自身免疫性疾病、恶性肿瘤和恶病质的患者。同时选取55例健康体检者作为对照组，男性 30 例，女性 25 例，年龄（62.62±6.84）岁，范围47～70岁。2组受试者的性别、年龄等基本情况差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

二、方法

（一）治疗方法

PCI患者入院后，严格按照脑梗死相关治疗指南进行系统全面的治疗，所有患者均卧床休息，进行抗凝、溶栓、活血化瘀及纠正酸碱平衡紊乱的治疗。

（二）检测方法

2组受试者在清晨空腹状态下，由专业的护理人员使用专用的真空采血管小心采取受试者治疗前后的静脉血3～5 mL，置于含枸橼酸钠抗凝管中，以3500 r/min，离心半径 15 cm，离心 15 min，收集血清，采用专用的酶联免疫吸附法（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）试剂盒（武汉伊莱瑞特生物科技有限公司）分别检测研究组和对照组血清炎症因子TNF-α、IL-6和CTRP3的水平，同时分析PCI患者治疗前后血清CTRP3与TNF-α、IL-6水平的相关性。

三、统计学分析

采用SPSS20.0统计学软件进行分析，计量资料以均数±标准差（Mean±SD）表示，组间比较用t检验或配对t检验，相关性分析用Pearson等级相关分析法；计数资料以率（%）表示，采用χ2检验。以P＜0.05为差异有统计学意义。

结 果

一、2组受试者治疗前血清 TNF-α、IL-6和CTRP3表达水平比较

研究组治疗前血清TNF-α、IL-6水平均高于对照组，差异均有统计学意义（P＜0.05）；研究组治疗前血清CTRP3水平低于对照组，差异均有统计学意义（P＜0.05），具体信息见表 1。

表1 2组受试者治疗前血清TNF-α、IL-6和CTRP3表达水平比较

二 、PCI患 者 治 疗 前 后 血 清 TNF-α、IL-6 和CTRP3表达水平比较

研究组治疗后TNF-α、IL-6水平较治疗前均降低，CTRP3水平较治疗前增高，差异均有统计学意义（P＜0.05，表 2）。

三 、PCI患 者 治 疗 前 后 血 清 TNF-α、IL-6 和CTRP3表达的相关性

治疗前PCI患者血清 TNF-α、IL-6水平增高，CTRP3的表达降低，血清CTRP3与TNF-α水平呈负相关（r=-0.351，P=0.009），血清 CTRP3 与 IL-6 水平也呈负相关（r=-0.465，P=0.003，图 1A～B）。治疗后PCI患者血清 TNF-α、IL-6水平降低，CTRP3的表达增高，血清CTRP3与TNF-α水平呈负相关（r=-0.326，P=0.015），血清CTRP3与IL-6水平也呈负相关（r=-0.569，P=0.001，图 1C～D）。

表2 研究组患者治疗前后血清TNF-α、IL-6和CTRP3表达水平比较

讨 论

PCI发病急、病情严重、病死率高，早期抗凝治疗避免血栓进一步扩大至关重要，但缺乏早期明确的CT诊断，且早期的神经受损症状不典型，常发生漏诊，错过最佳治疗时期，血浆N末端脑钠肽和D-二聚体水平对PCI患者预后有明显影响，但是特异性和敏感性不高[7]。因此寻找早期敏感的诊断指标有助于提高PCI的确诊率，寻找新的蛋白质作为治疗靶点促进PCI的恢复也极为重要。

CTRP3是一种新型的脂肪因子，可以显著改善病理性的血管重构、降低炎症反应、舒张血管等[8]。研究发现给予外源性的CTRP3可以降低脂多糖刺激结肠后IL-8的释放，而且降低了转化生长因子-β1的表达，减少Ⅰ型胶原的分泌，发挥抗结肠炎症和纤维化的作用，CTRP3抑制转化生长因子诱导的成纤维细胞增殖[9]。在抗心肌纤维化，激活细胞沉默调节蛋白1促进缺血再灌注损伤或者药物损伤心肌细胞的恢复中也发挥重大作用，由此推断在脑梗死时补充外源性的CTRP3可能助于脑血管侧枝循环的重建[10,11]。PCI时脑组织及时供氧至关重要，CTRP3促进新生血管形成，促进内皮细胞的增殖和迁移，促进促血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）的释放，从而提高血液中氧气的供应[12]。此外，CTRP3与脂联素是高度同源的蛋白质，脂联素可以激活AMP依赖的蛋白激酶磷酸化，释放一氧化氮，促进血管生成增多和氧气供应，相关研究发现CTRP3可以激活磷脂酰肌醇3-激酶的磷酸化，促进缺氧诱导因子α和VEGF的释放，对于PCI发生后及时供血供氧极为重要。

本研究发现PCI组患者的血清TNF-α、IL-6明显高于对照组，说明PCI组患者体内炎症系统激活，炎症因子水平显著增高，介导脑血管内膜损伤和血管内斑块的脱落，在经过综合治疗后，PCI组患者体内炎症因子TNF-α、IL-6显著下降，但是仍然高于对照组，说明炎症反应与免疫功能紊乱与PCI的病情严重程度密切相关，TNF-α、IL-6水平增高不仅反映了体内炎症水平增高，也反映了PCI患者病情程度的加重。PCI组患者的CTRP3水平低于对照组，治疗后PCI患者血清CTRP3表达增高，但仍低于对照组。且治疗前后CTRP3的表达与炎症因子TNF-α、IL-6水平均呈负相关，说明CTRP3参与了PCI的发生发展，与疾病的严重程度密切相关，可能在辅助诊断PCI方面发挥作用，且CTRP3与脂联素高度同源，脂联素在心脑血管疾病中具有抗炎、抗糖脂代谢紊乱作用，相关研究也表明单核细胞分泌的CTRP3可以减少TNF-α、IL-6的释放而发挥抗炎作用，还可以减轻脂多糖诱导的脂质积累和炎症反应[13]。CTRP3在改善血脂代谢上也发挥着重要作用，可以降低脑血管脂质沉积，减少斑块形成，还参与了糖脂代谢紊乱、胰岛素抵抗的调节，因此CTRP3可能是脂肪组织中的一个新的免疫调节蛋白，在PCI的诊断和治疗中也许发挥重要的调节作用[14-16]。

图1 PCI患者治疗前后血清TNF-α、IL-6和CTRP3表达的相关性

综上所述，PCI患者血清CTRP3表达下降，炎症因子TNF-α、IL-6表达增高，综合治疗后CTRP3表达显著上升，机体炎症因子TNF-α、IL-6表达下降，初步推断CTRP3是一种减轻PCI患者脑损伤产生的炎症反应的脂肪因子，且CTRP3水平的变化与PCI的发生发展密切相关。因此，检测血清CTRP3的表达可能对辅助判断PCI病情严重程度有重要临床意义，适当进行外源性CTRP3补充有望成为治疗PCI的一个新的靶点。