益气养阴汤联合贝伐珠单抗治疗卵巢癌对患者免疫功能、炎性因子及肿瘤标志物的影响

古力米热·布然江，热孜亚·库尔班，艾力克木·阿不都玩克，李小文，古丽娜·库尔班

新疆医科大学附属肿瘤医院1妇科肿瘤放射治疗（二病区），2妇科专病门诊，4妇科肿瘤放射治疗（一病区），乌鲁木齐830011

3新疆维吾尔自治区人民医院儿科病区，乌鲁木齐8300110

卵巢癌是妇科临床常见的恶性肿瘤之一，发病率近年来一直呈升高趋势，该病多发于盆腔深部，起病隐匿，早期症状不明显，且目前仍缺少有效的筛查手段，导致疾病早期的发生、发展极易被忽视，超过70%的患者确诊时已发展至晚期，且已发生转移，远期生存率极低，居妇科肿瘤病死率首位，严重威胁女性健康[1]。以往临床治疗多以肿瘤细胞减灭术和放化疗为主，临床缓解率约为50%[2]，且不良反应较多。贝伐珠单抗属于靶向治疗药物，可强烈抑制肿瘤侵袭转移相关因子的表达；而益气养阴汤是一种传统中药，目前用于卵巢癌等多种肿瘤的治疗。新疆医科大学附属肿瘤医院应用益气养阴汤联合贝伐珠单抗治疗卵巢癌取得较好疗效，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集新疆医科大学附属肿瘤医院2014年3月至2017年5月因卵巢癌住院治疗患者的病历资料。纳入标准：①所有患者均符合卵巢癌的诊断标准[3]，经影像学和病理学检查确诊，存在可测量病灶，病灶直径≥2 cm；②患者生存时间均＞6个月；③既往未接受手术、化疗及贝伐珠单抗治疗。排除标准：①患有严重心、脑、肾、肝和肺部疾病者；②合并严重感染、免疫功能缺陷者；③有药物过敏史者；④精神异常。根据纳入排除标准共纳入80例患者，按照治疗方法的不同分为观察组（n=43）和对照组（n=37）。观察组患者给予益气养阴汤联合贝伐珠单抗治疗，年龄37～65岁，平均（51.3±14.1）岁；肿瘤类型：浆液性癌20例，黏液性癌14例，子宫内膜癌5例，未分化癌4例；临床分期：Ⅲ期33例，Ⅳ期10例。对照组患者给予贝伐珠单抗治疗，年龄39～66岁，平均（52.8±13.0）岁；肿瘤类型：浆液性癌13例，黏液性癌11例，子宫内膜癌6例，未分化癌7例；临床分期：Ⅲ期30例，Ⅳ期7例。两组患者年龄、肿瘤类型、临床分期比较，差异均无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2 治疗方法

对照组患者给予贝伐珠单抗治疗，贝伐珠单抗7.5 mg/kg+0.9%氯化钠溶液250 ml，静脉滴注，首次静脉滴注需在1.5 h内完成，从第2次开始每次静脉滴注时间不少于1 h，每2周静脉滴注1次，4周为一个疗程。

观察组患者在对照组基础上给予益气养阴汤，药物组成包括山药25 g、黄芪35 g、生地20 g、黄精15 g、玄参20 g、女贞子20 g、莪术15 g、山慈菇20 g、夏枯草15 g、桔梗10 g、大枣10 g，根据症状加减药量，水煎服，每日1剂，分早晚两次口服，4周为一个疗程。

1.3 观察指标

于治疗前和治疗后4周分别抽取患者清晨空腹静脉血，抗凝，离心，收集血清。采用流式细胞仪荧光抗体碱性磷酸酶染色法检测免疫细胞水平[4]，包括总T淋巴细胞（CD3+）、辅助性T细胞（CD3+CD4+）、免疫状态（CD4+/CD8+）、调节性T细胞（CD4+CD25+）和自然杀伤（natural killer，NK）细胞；采用酶联免疫吸附法（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）[5]检测炎性因子、血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）和肿瘤标志物水平，炎性因子包括白细胞介素-2（interleukin-2，IL-2）、白细胞介素-6（interleukin-6，IL-6）、白细胞介素-10（interleukin-10，IL-10）和干扰素-γ（interferon-γ，INF-γ），肿瘤标志物包括CD133、生殖细胞特异性蛋白DDX4（DEAD-box helicase 4，DDX4）、糖类抗原153（carbohydrate antigen 153，CA153）、糖类抗原19-9（carbohydrate antigen 19-9，CA19-9）、糖类抗原125（carbohydrate antigen 125，CA125）和癌胚抗原（carcinoembryonic antigen，CEA）。

1.4 统计学方法

采用SPSS 17.0统计软件对所有数据进行数据分析。计数资料以例数表示，组间比较采用χ2检验；计量资料以均数±标准差（±s）表示，组间比较采用两独立样本t检验，组内比较采用配对样本t检验。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 治疗前后免疫细胞水平的比较

治疗前两组患者 CD3+、CD3+CD4+、CD4+/CD8+、CD4+CD25+和NK细胞水平比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）；治疗后观察组患者CD3+、CD3+CD4+、CD4+/CD8+和NK细胞水平均明显高于本组治疗前和对照组治疗后，CD4+CD25+水平明显低于本组治疗前和对照组治疗后，差异均有统计学意义（P＜0.01）。（表1）

2.2 治疗前后炎性因子和VEGF水平的比较

治疗前两组患者 IL-2、IL-6、IL-10、INF-γ和VEGF水平比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）；治疗后观察组患者IL-2和INF-γ水平均明显高于治疗前和对照组治疗后，IL-6、IL-10和VEGF水平均明显低于治疗前和对照组治疗后，差异均有统计学意义（P＜0.05）。（表2）

表1 治疗前后两组患者免疫细胞水平的比较

表2 治疗前后两组患者炎性因子和VEGF水平的比较

2.3 治疗前后肿瘤标志物水平的比较

治疗前两组患者CD133、DDX4、CA153、CA19-9、CA125和CEA水平比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）；治疗后观察组患者CD133、DDX4、CA153、CA19-9、CA125和CEA水平均明显低于本组治疗前和对照组治疗后，差异均有统计学意义（P＜0.01）。（表3）

表3 治疗前后两组患者肿瘤标志物水平的比较

3 讨论

近年来，中国经济迅速发展，人们生活水平不断提高，女性工作、生活压力增加和环境污染等因素导致卵巢癌每年新发病例逐渐增多，且呈年轻化趋势，病死率高达60%以上，居女性生殖系统恶性肿瘤病死率首位[6]。该病早期发病隐匿，且部位隐蔽，很多患者就诊时已发展至中晚期，失去手术治疗的最佳时机，病死率极高，严重影响女性生命健康。以往临床多以肿瘤减灭术或放化疗为主要治疗方法，但统计数据发现，肿瘤细胞仍可快速扩散至血液和淋巴系统，复发率较高，且放化疗的不良反应强烈，大部分患者可出现恶心呕吐、腹泻等消化道反应，以及肝肾不同程度的损伤和骨髓抑制等多种严重不良反应[7-8]。本研究经过长期临床经验总结，在贝伐珠单抗基础上应用益气养阴汤治疗，取得较好疗效。

贝伐珠单抗是目前临床一线抗肿瘤靶向药物，其选择性结合VEGF，通过抑制其与表面受体相互作用，继而降低其活性，阻断细胞增殖和肿瘤组织新生血管生成[9-10]。由于体内正常组织自然状态下新生血管概率很低，但肿瘤的生长在一定程度上依赖血管生成，因此，有效的抗血管生成治疗可以起到有效的抗肿瘤作用。另外，多项研究指出，贝伐珠单抗还可有效阻断VEGF向下游转导的信号，促进肿瘤血管系统趋于“正常化”，提高药物在细胞内的利用率，减少耐药性的发生[11-12]。随着中医学的迅速发展，中药制剂联合靶向药物治疗肿瘤已逐渐成为研究的热点。卵巢癌在中医学属“积聚”“癥瘕”等范畴，靶向治疗后，癌毒去除，但正气耗损，气血津液严重匮乏，机体阴阳俱衰，继而形成痰凝、气滞、瘀毒内结[13]。若不及时消解，极易造成严重影响，诱发肿瘤复发。该治疗以驱邪攻毒、扶正固本为主。益气养阴汤以清热解毒、益气养阴、散结扶正为主要功效，方中黄芪益气健脾、升阳固表、消肿利尿；山药健脾补肾、明目安神，山药中的多糖成分可有效抗肿瘤，抑制肿瘤细胞进入S期；生地清热生津、润燥凉血；玄参滋阴凉血、清热解毒；女贞子补益肝肾，提高对抗肿瘤的免疫作用；莪术行气止痛、消积散结；山慈菇和夏枯草清热解毒、散结消痈，两药合用可加快肿瘤细胞的凋亡。在现代药理学中，诸药合用可有效促进机体分泌免疫因子，治疗效果得到临床一致认可[14]。

有报道称，恶性肿瘤的生长和机体免疫功能关系密切，指出免疫功能是评估恶性肿瘤治疗效果的重要指标[15]。肿瘤患者机体免疫功能异常，抗肿瘤作用以细胞免疫为主，其中T淋巴细胞发挥主要效应，其变化是人体细胞免疫功能状态的有效体现。肿瘤细胞可分泌生物活性因子抑制T细胞增殖，破坏免疫细胞，继而进一步降低免疫功能。CD3+和CD4+能够增强机体抗肿瘤免疫反应，有效杀灭肿瘤细胞，CD8+可反映细胞免疫损伤，属于关键性的抑制性T细胞，对细胞免疫反应具有抑制作用，CD4+/CD8+主要反映肿瘤细胞杀伤活性，CD4+CD25+细胞通过对细胞毒性T细胞的激活，发挥免疫调节功能。从本研究结果可见，治疗后观察组患者CD3+、CD3+CD4+、CD4+/CD8+和NK细胞水平均明显高于治疗前和对照组治疗后，CD4+CD25+水平明显低于本组治疗前和对照组治疗后，表明联合用药可有效加强机体免疫功能，改善卵巢癌患者免疫状态，提高抗肿瘤疗效。当机体免疫功能下降时易受感染，IL-2和INF-γ通过介导免疫炎性反应，调理细胞抗体和补体，促进细胞免疫；IL-6和IL-10两种白细胞介素具有较强的细胞免疫调节作用，可有效抑制产生NK细胞，抑制T细胞功能。从本研究结果可见，观察组患者治疗后IL-2和INF-γ水平均较治疗前明显升高，且明显高于对照组治疗后，而IL-6和IL-10水平在治疗后明显低于治疗前，且明显低于对照组治疗后，表明观察组抗炎性反应更明显，免疫细胞因子释放更快[16]。VEGF水平对卵巢癌的预后具有一定影响，其水平越高，患者预后越差，有效抑制该因子活性对卵巢癌的治疗具有关键作用。VEGF是刺激血管内皮细胞增殖的细胞因子，当肿瘤直径＞2 cm时，进一步加重缺氧，不断促进VEGF升高，形成恶性循环[17-18]。从本研究结果可见，两组患者治疗后VEGF水平均较治疗前降低，且观察组治疗后VEGF水平较对照组更低，表明联合用药可有效抑制血管新生以及VEGF的生成，减缓肿瘤生长，对肿瘤的治疗具有重要意义。肿瘤标志物是肿瘤细胞增殖过程中所生成的，对肿瘤的诊断和预后具有重要意义。CD133和DDX4是肿瘤干细胞标志物，其表达水平越高，肿瘤病理分级越高；CA153属上皮糖蛋白，在大部分卵巢癌患者中呈高表达状态；CA19-9是一种与多种肿瘤相关的标志物，尤其在黏液性卵巢癌诊断中具有较高灵敏度；CA125是目前临床诊断卵巢癌应用最广泛、最具价值的标志物，是一种抗原糖蛋白，对浆液性卵巢癌诊断灵敏度极高[19-20]；CEA属于广谱肿瘤标志物，于卵巢癌早期即可见升高。从本研究结果可见，两组患者治疗后各标志物水平均较治疗前下降，且观察组患者治疗后 CD133、DDX4、CA153、CA19-9、CA125和CEA水平均明显低于对照组，表明联合用药可更有效地降低肿瘤标志物水平，继而控制肿瘤生长，提高疗效。综上所述，益气养阴汤联合贝伐珠单抗治疗卵巢癌临床效果显著，可有效提高患者免疫功能，降低炎性反应，控制VEGF表达，降低肿瘤标志物水平，推荐临床广泛应用。