UF-1000i全自动尿沉渣分析仪检测尿红细胞假阳性分析
2019-07-01杨云峰
杨云峰
【摘要】 目的 探讨UF-1000i全自动尿沉渣分析仪检测尿红细胞假阳性的原因。方法 选择 680例患者的10 ml清洁中后段尿液为检测样本, 充分混匀后分为两管, 每管5 ml。一管进行UF-1000i全自动尿沉渣分析仪检测, 另一管进行显微镜检测。将显微镜检测结果作为金标准。比较UF-1000i全自动尿沉渣分析仪检测结果与显微镜检测结果的差异。分析出现假阳性的原因。结果 本组680例标本中, UF-1000i全自动尿沉渣分析仪检测阳性134例, 阴性546例;顯微镜检测阳性117例, 阴性563例。UF-1000i全自动尿沉渣分析仪检测的假阳性率为8.17%(46/563), 假阴性率为24.79%(29/117), 敏感性为75.21%(88/117), 91.83%(517/563)。46例假阳性标本中, 结晶18例, 细菌20例, 酵母样菌5例, 其他3例。结论 酵母样菌、结晶、细菌等干扰UF-1000i全自动尿沉渣分析仪检测红细胞造成假阳性, UF-1000i全自动尿沉渣分析仪检测到红细胞阳性必须结合显微镜检测以降低误诊率、提高尿液检验质量。
【关键词】 UF-1000i全自动尿沉渣分析仪; 尿红细胞假阳性;显微镜检测
DOI:10.14163/j.cnki.11-5547/r.2019.06.030
先进尿液检测技术随着科学技术的飞速发展基本普及, 全自动尿沉渣分析仪使尿沉渣镜检实现了自动化, 提供的结果易于临床动态观察, 提高了尿液分析的准确性和特异 性[1-3], 全自动尿沉渣分析仪和尿干化学仪联机后, 两种方法的尿液检测, 即对有形成分和无形成分检测的交叉互检实现尿液检测的整体化和标准化[4]。但尿液检测干扰因素很 多, 随机性很强, 部分临床医生对检验数据缺乏分析能力, 过分依赖化验结果, 不能最大限度地发挥检验数据在诊治疾病中的指导作用, 不清楚检测数据假阳性、假阴性问题, 可能会由于一个错误的数据而引起误诊[5, 6]。这就要求重视尿液分析后的质量控制工作, 检测到红细胞阳性必须结合显微镜检测以降低误诊率、提高尿液检验质量。本文进行了实验观察和分析, 报告如下。
1 材料与方法
1. 1 仪器与试剂 自动染色尿沉渣分析仪及配套试剂, UF-check质控液, UF-1000i全自动尿沉渣分析仪及配套试剂CELLSHEATH鞘液、URINOPACK稀释液、URINOSEARCH 染液, neubauer计数板、Olympus显微镜、上海医用离心机厂400 g离心机。
1. 2 标本来源 标本来自随机抽取的2017年2~6月本院680例患者, 应用一次性塑料尿杯收集清洁中后段尿液。
1. 3 测定方法 全部的尿液标本均在2 h内完成检测。取10 ml新鲜清洁中后段尿液, 充分混匀后分为两管, 每管 5 ml。一管进行UF-1000i全自动尿沉渣分析仪检测, 另一管进行显微镜检测。
1. 3. 1 UF-1000i全自动尿沉渣分析仪检测 标本离心进行尿沉渣检测, 离心后标本上机按UF-1000i全自动尿沉渣分析仪操作说明进行检测, 检测前先作仪器的每日质控, 进样开头记录分析数据, 分析各种参数。UF-1000i全自动尿沉渣分析仪正常值参考范围[7]: 红细胞计数为0~25个/μl , 超出此范围即判定为阳性。
1. 3. 2 显微镜检测 在离心力为400 g(回转半径15 cm水平离心机1500 r/min)条件下离心5 min。取0.2 ml沉渣混匀后, 吸20 μl在Fast-Read-10板上计数红细胞, 正常值参考范 围[8]:红细胞计数为0~5个/ HP , 超出此范围即判定为阳性。
1. 4 观察指标及判定标准 将显微镜检测结果作为金标准。比较UF-1000i全自动尿沉渣分析仪检测结果与显微镜检测结果的差异。
2 结果
本组680例标本中, UF-1000i全自动尿沉渣分析仪检测阳性134例, 阴性546例;显微镜检测阳性117例, 阴性563例。UF-1000i全自动尿沉渣分析仪检测的假阳性率为8.17%(46/563), 假阴性率为24.79%(29/117), 敏感性为75.21%(88/117), 91.83%(517/563)。46例假阳性标本中, 结晶18例, 细菌20例, 酵母样菌5例, 其他3例。UF-1000i全自动尿沉渣分析仪与显微镜检测结果见表1。
3 讨论
UF-1000i全自动尿沉渣分析仪采用流式细胞仪的工作原理和电阻抗技术, 在染色液中具有选择性, 使细胞膜、细胞核分别染色两种染料, 通过检测单一有形成分的荧光强度(Fl)、前向散射光强度(Fsc)、前向荧光脉冲宽度(FIW)、前向散射光脉冲宽度(Fscw)分析细胞信息, 通过对每一个细胞信号和波形的特性对其分类[9-12]。
UF-1000i全自动尿沉渣分析仪虽然方便、快速、结果重复性好, 但在对尿红细胞检测的过程中受多种因素影响, 不能完全代替显微镜检测, 仍有许多局限性。当尿液中出现细菌、结晶、酵母菌时, 红细胞计数偏高, 可能会出现假阳性的结果, 为保证检验结果的可靠, 此时需要进行显微镜检测复核, 避免误诊。
红细胞没有细胞核, 仪器根据单一有形成分的Fl低和Fsc低将其归类为红细胞。尿液中存在的无定形结晶等, 会导致出现红细胞假阳性的结果 [13]。结晶在染色过程中不着色, 其Fl较红细胞更低, 结晶对红细胞假阳性结果影响最大, 草酸钙结晶Fl低和Fsc低的特征相似, 尿酸盐结晶散布于散点图中, 当其浓度增高时, 与红细胞散点出现交叉分布, 会对红细胞计数产生影响。细菌体积小, Fl比红细胞强, Fsc要比红细胞弱, 尿液中细菌浓度超过一定数量时, 仪器将大的或成双的葡萄球菌和链球菌误认为红细胞。单个的酵母菌大小与红细胞相似, 容易错判为红细胞[14]。由于蛋白尿中形成的管型短而小, 易被漏检, UF-1000i全自动尿沉渣分析仪尿沉渣分析仪检测管型的假阴性主要见于蛋白尿的检测, 但脂肪管型中的脂肪滴荧光强度较低, 造成假阴性[15, 16]。