饲料中添加Penergetic-T 对种公牛精液品质的影响

田全召，高汉婷，刘修生，王天军，张 伟，白跃宇,3,*

（1.河南省鼎元种牛育种有限公司，河南郑州 450000；2.河南科技学院，河南新乡 453003；3.河南省动物卫生监督所，河南郑州 450008）

Penergetic-T 是 由 德 国Plocher Produktion 公 司研制的由天然原料经过特殊的物理性处理生产的一种动物营养性饲料添加剂。Penergetic-T 中98.1% 为天然碳酸钙，0.9% 为天然碳酸镁，其他成分占1%[1]。Penergetic-T 能够提高动物对营养物质的吸收能力，进而提高饲料利用率和产品品质，提高养殖效益[2-3]；还可改善动物排泄，从而改变畜禽舍内空气，为动物提供一个相对舒适的生存环境[4-5]。

张波等[2]研究报道Penergetic-T 能提高延边黄牛瘤胃发酵效率，提高了延边黄牛瘤胃液中菌体蛋白数量，同时也使总挥发性脂肪酸和丙酸浓度提高。Penergetic-T 对延边黄牛的育肥具有明显的促进作用,能够提高日增重，并能提高延边黄牛的免疫力, 减轻疲劳, 降低血液中的胆固醇和甘油三酯[3]。李官浩等[4]报道，饲料中添加Penergetic-T 可以显著提高种公猪的射精量、精子活率和精子密度。但对饲喂反刍动物特别是对牛的繁殖性能的影响鲜有报道。本文在前人研究基础上，研究饲喂Penergetic-T 对公牛精液品质的影响，为合理利用Penergetic-T 及认识其对反刍动物繁殖性能的作用机理提供参考依据。

1 材料与方法

1.1 试剂和设备 Penergetic-T、氯化钠、载玻片、盖玻片、试管、水浴锅、比色皿、密度仪、细管机、冷冻仪等，德国Minitu 公司生产；鸡蛋、柠檬酸、甘油、葡萄糖，郑州银丰公司生产；三羟甲基氨基甲烷（Tris） ，上海生工生物工程技术服务有限公司生产；吉姆萨染液，Sigma公司生产；固定液（含磷酸氢二钠、磷酸二氢钠）。

1.2 试验牛设计及日粮 选择2～3 岁、生长发育正常的西门塔尔种公牛120 头随机分为试验组和对照组，每组60 头，试验组进行饲喂试验。本试验分预试期和正试期。预试期30 d，正试期60 d。试验在2017 年10 月1 日—12 月30 日进行。试验组和对照组基础日粮相同，按精粗比为1∶2 的比例饲喂，即5 kg 全价精料、10 kg 羊草。试验组在精料中添加0.25 g/（d·头）Penergetic-T。添加方式为：按1 000 kg 精料中添加0.5 kg Penergetic-T的比例提前将Penergetic-T 与精料混匀，早饲和中饲时各取2.5 kg 给料，在饲养员监督下精料全部采食干净。每天饲喂3 次，自由饮水，常规光照。饲喂前将精料与粗料混合均匀。保证牛有清洁、干净的饮水和休息环境。种公牛基础精料组成及营养成分见表1。

表1 种公牛基础精料组成及营养成分

1.3 测定指标及方法

1.3.1 采精时间及采精方法 采用假阴道采精法对每头牛进行采精。每头公牛于采精日上午间隔1 天采精1 次，每周采精2 次。用带刻度的集精瓶直接读取射精量数据。

1.3.2 鲜精活力检测 取稀释液390 μL、鲜精10 μL 混匀，取10 μL 混匀后的精液滴于载玻片上，加盖盖玻片后在38℃恒温装置的相差显微镜上做活力判定，活力65% 以下精液做废弃处理，65% 以上进行密度及稀释量的测定。

1.3.3 精子密度 取精液35 μL 和0.9%的生理盐水3 500 μL混匀后置于精子密度仪中测量，得出被测精液的密度及总稀释量。

1.3.4 产量统计 测定出密度与稀释量后开始进行精液稀释，取1 只已盛有30 mL 稀释液经34℃水浴预先加温的试管对精液进行稀释，在34℃水浴中暂存10 min 后加稀释液到总稀释量，应包括第一次稀释时的30 mL 稀释液。精液稀释后用设定好的德国Minitu 自动灌装机灌装，灌装机设定为每剂量0.25 mL 精液、含大约2 000 万精子数。将灌装好的细管精液置于冷冻盘上统计产量，然后放入冷冻仪中冷冻。冷冻时预先打开冷冻仪，打开液氮阀门将冷冻仪降至4℃，然后打开冷冻仪盖子，迅速将分盘好的冻精放入冷冻仪中，盖好盖子，启动开始按钮，待温度降到-140℃维持7 min 后取出冻精，然后储存于液氮罐中。

1.3.5 畸形率检测 取储存于液氮罐中的冻精置于37℃水浴锅解冻，吸取10 μL 置于载玻片上抹片，风干5 min后用固定液固定30 min，然后用吉姆萨染液染色1.5 h后镜检计算畸形率。

1.4 统计分析 利用 Excel 中的“数据”、“数据分析”“单因素方差分析”对结果进行统计分析。

2 结果

2.1 Penergetic-T 对公牛射精量、精子密度、产量的影响 如表2 所示，对照组和试验组平均值比较，经过统计分析，P＜0.05，表明饲料中添加Penergetic-T，种公牛鲜精的射精量、精子密度以及冻后产量均高于对照组，且差异显著。

2.2 Penergetic-T 对种公牛精子活力和畸形率的影响由表3 可见，对照组和试验组平均值比较，经过统计分析，P＜0.05，表明饲喂时饲料中添加Penergetic-T 的试验组精子畸形率低于对照组，精子活力高于对照组，且差异均显著，分别比对照组改善了14.1%和13.0%。

表2 添加Penergetic-T 对公牛射精量、精子密度、产量的影响（平均值）

表3 添加Penergetic-T 对种公牛精子活力和畸形率的影响（平均值）

3 讨 论

种公牛精液品质的好坏直接决定了牛精液生产性能的高低和冷冻精液质量的优劣，它直接影响着种公牛站的经济效益，同时在一定程度上也影响着牛冷冻精液改良推广的社会效益。评定种公牛精液品质的指标主要有射精量、精子活力、精子密度、畸形率等，而这些指标又受到各种因素影响。何江等[6]报道，影响种公牛精液生产的因素有先天性因素、射精功能性障碍、睾丸及副性腺机能障碍。张海涛等[7]认为，影响种公牛精液产量和品质的主要因素有遗传、环境、营养等。张黎黎等[8]报道精液生产能力10%取决于遗传因素，90%取决于环境，其中主要是饲养管理条件。

营养是维持生命机能和生产精液的物质基础，营养过度、不足或失衡都会影响精液的产量与品质。张小茶等[9]研究表明，日粮营养对种公牛的精液品质有重要影响，合理的营养是种公牛发挥最大繁殖能力和延长使用年限的重要保证。因此，开发一种既能使公牛生产出大量优质精液又能获得良好体况的日粮，成为提高公牛冻精生产效益的关键。种公牛日粮中必须含有足够的能量、蛋白质、矿物质、维生素等。其中，矿物质是种公牛保持健康和较高繁殖性能不可缺乏的营养物质，对精液的产生和精子的形成也有一定影响。牛所需要的矿物质元素约有20 多种，其中钙能够为精子活动提供能量，如果钙含量不足，会影响种公牛的生长发育，导致精子的形成受阻，精子活力变差。Penergetic-T 的主要成分之一是碳酸钙，补钙可以刺激精细胞的糖酵解过程，增加精子活动所需的能量，从而加强精子的活力，还可以通过睾丸、肾上腺和类固醇的生物合成来影响繁殖进而降低精液的精子畸形率，提高精液品质。Penergetic-T的另一主要成分是碳酸镁，王文丹等[10]研究报道镁缺乏可导致种公牛性欲减退、精子发生出现异常、数量减少、畸形精子增加，严重时可导致失去配种能力，因此在日粮中适当添加镁能改善公牛性欲，降低畸形率，提高公牛的精液品质。Penergetic-T 还具有提高机体免疫力和提高细胞活性的作用[1，11]，从而提高了精子在睾丸内与精囊内的抗病毒能力和应激能力，这可能是本研究中试验组精子畸形率低于对照组的原因。

Penergetic-T 含有丰富的黄酮类化合物、不饱和脂肪酸、维生素E、维生素C 及微量元素锌、硒等，具有抗氧化作用。罗海玲等[12]报道，维生素E 对提高公羊的精液品质和胚胎移植成功率都有良好的促进作用。郎海芳[13]试验表明，维生素E 在机体内可能主要参与抗氧化反应，并且通过抗氧化保护作用来达到提高精液品质的目的。维生素C 具有抗精子的非特异性凝聚作用，可提高公牛受精率，缺乏时会导致精子发育不良，活动能力下降；锌对雄性动物的内分泌机能、生殖器官、生殖细胞、精子的生成及精液品质等均有重要作用，从而影响其繁殖性能[14]。徐振华等[15]报道，公牛饲料中添加锌可明显缩短性反射时间，增强公牛性欲。同时，添加锌可显著改善公牛的鲜精活力、精子冻后活力和顶体完整率；硒是动物体内非常重要的一种不可缺少的微量元素，对于公牛而言，硒缺少时精子活力降低、受精能力下降，畸形率增加，精子生成减少[16]。推测，正是由于Penergetic-T 含有丰富的矿物质（钙镁）、维生素E、维生素C 及微量元素锌、硒，公牛日常饲养管理中适当添加Penergetic-T 能够在一定程度上提高精液品质。后期可综合环境因素、饲养管理条件、季节等因素在其他品种进一步研究合适的饲喂量与饲喂方式，最后应用到整个牛群，为种公牛站创造更多经济效益。

4 结 论

饲料中添加Penergetic-T 能够显著提高种公牛的射精量、精子密度、鲜精活力及产量，显著降低精子畸形率，说明饲料中添加Penergetic-T 可显著提高种公牛的精液品质及产量。