不同等级浑源黄芪中黄芪多糖含量对比研究
2019-06-04
(山西卫生健康职业学院,山西 晋中 030619)
浑源黄芪产于中国北岳恒山,生态环境独特,造就上佳品质,素有“天下黄芪之宗”的美誉。主要含有皂苷类、黄酮类、多糖类、微量元素硒以及氨基酸类等。药理实验表明黄芪中的黄芪多糖可以调节机体的免疫功能,具有抗氧化、保肝、促进血管内皮增生、抑制肿瘤、防治脑损伤、抗病毒等作用[1],黄芪多糖能改善1型糖尿病小鼠血糖水平,改善外周组织对胰岛素的抵抗[2]。
围绕《云南省农业发展“十二五”规划纲要》的总体要求,抓住中国至东盟自由贸易区建设带来的机遇,充分发挥资源优势,以“稳面积、调结构、提质量、保增收”为发展目标。以省内、国内、国际市场市场为导向,以经济效益为中心,以主导产业、产品为重点,优化组合各种生产要素,实行区域化布局、专业化生产、规模化建设、系列化加工、社会化服务、企业化管理的新型发展方式。
本文采用水回流提取、比色法测定的方法,对不同等级浑源黄芪进行黄芪多糖的含量进行对比研究,旨在为浑源黄芪的合理种植采集、开发利用提供科学依据,合理利用有限的药材资源和地质资源,提高黄芪基地的经济效益和社会效益。
据统计,此次健康体检惠及1200余名职工,让职工切实感受到了企业的关怀和关爱,切实维护了职工的权益。□
1 实验材料及仪器
1.1 材料
不同等级浑源黄芪(由山西省浑源县黄芪基地提供),基源鉴定鉴定为蒙古黄芪Ast ragal us membranaceus Bge.var.mongholicus (Bge.) Hsiao;D-无水葡萄糖标准品由中国生物制品检定所提供(批号110833-200503);实验用水均为蒸馏水;其他试剂均为分析纯。
1.2 仪器
前期通过试验筛选,确定提取方法为水回流提取,进一步采用L9(33)因素水平表设计正交试验优选提取工艺。3因素选择对黄芪多糖提取率影响显著的溶剂用量、提取时间、提取次数,溶剂用量3水平为10倍、15倍、20倍,提取时间3因素为1 h、1.5 h、2 h,提取次数3水平为1次、2次、3次。以葡萄糖为对照品,采用苯酚-硫酸比色法进行含量测定,最终确定最佳提取工艺为20倍量水,提取3次,每次提取1h 。
2 方法与结果
2.1 方法
756MC型紫外分光光度仪(上海分析仪器总厂); FA1104型万分之一电子分析天平(上海精密科学仪器有限公司天平仪器厂); 202 V1型电热恒温干燥箱(上海试验仪器厂有限公司)。
传统治疗通常采用外固定支架或跨关节外固定架作为一期治疗,二期在软组织条件允许后改行切开复位内固定[6]。外固定支架作为初始固定,可以方便对伤口进行处理[7,8],并初步维持骨折复位,为软组织的修复提供稳定的平台。但这种方案治疗周期较长,初期外固定支架对患者日常活动影响较大,术后限制功能活动的时间较长,钉道感染、松动、血管神经损伤、肌肉损伤及关节软骨损伤、持续疼痛、瘢痕及再骨折的发生率较高[9]。复位丢失发生率高,二期内固定复位困难。许多患者有其他的多种合并症及内科问题,短期无法改行内固定,导致二期内固定延迟,外固定支架存留时间及关节固定时间延长,从而影响关节功能恢复[10]。
标准曲线绘制浓度在0.01~0.15 mg/mL范围内呈良好的线性关系。
该方法精密度试验RSD为0.73%,加样回收法回收率为96%,RSD为0.74%,稳定性实验RSD为1.08%。结果均符合实验要求。
回归方程为:y=14.622x+0.076 R2=0.999
2.2 4个等级黄芪多糖含量测定
4个等级黄芪为一级、二级、三级和四级。分别按照优选的提取条件进行提取。提取液浓缩干燥得浸膏。浸膏蒸馏水溶解转移定容,精密定量醇沉,抽滤后滤取物于105℃烘干6h至恒重,得粗多糖。粗多糖用蒸馏水溶解定容过滤,取续滤液定容得供试品溶液。取已制备好的4个等级的供试品溶液2.0mL,按标准曲线项下的方法,分别加入新鲜制备的5.5%苯酚溶液1.0 mL,摇匀,迅速加入5.0 mL浓硫酸,振摇5 min,置沸水浴上加热15 min,然后置冷水浴中冷却15 min,随行空白,在491nm波长处测定吸光度[4],计算。1~3号为一级,4~6号为二级, 7~9号为三级,10~12号为四级,数据显示一、二、三、四级黄芪粗多糖含量随等级变化趋势未表现出明显规律,而多糖含量却随等级降低而升高。见表1。
表1 各等级黄芪中多糖含量测定
3 讨论
目前黄芪的等级划分主要依据药材根头部和中部直径及药材长度,一般认为黄色、细皮、质坚粉足、粗壮顺直、断面色浅黄色者佳,而本实验结果显示,在黄芪4级样品含量测定中,作为黄芪中重要的一类有效成分黄芪多糖,其含量高低不完全支持现有等级划分,多糖含量是否与生长期限与部位有关(主根或侧根)有待于进一步考察。粗多糖含量却没有表现出同样的规律,分析可能是粗多糖分离时未去蛋白所致。 基于此,如果产业化提取黄芪多糖,原材料的选择可以考虑选择毛条,毛条价低,既可以降低厂家成本,还可以充分利用有限的药材资源。