子痫前期患者P-p38MAPK及TNF-α的表达及意义分析

陶跃平 钟少平

子痫前期是妊娠期高血压疾病中的一种严重表现形式，其严重危及孕产妇及围产儿的生命安全。目前较为公认的是胎盘“浅着床”在其中发挥重要作用［1］。最近研究表明，P-p38MAPK信号转导通路激活后，参与了肿瘤细胞侵袭过程；胎盘着床过程中具备类似肿瘤细胞生长侵袭过程［2-3］，P-p38MAPK信号途径是否亦参与了胎盘“浅着床”过程，并在子痫前期发病过程中发挥作用，作者通过检测P-p38MAPK在胎盘中的表达情况，同时亦对孕妇血浆中TNF-α水平的检测，从而探讨P-p38MAPK及TNF-α在子痫前期中的发病机制，现报道如下。

1 资料和方法

1.1 一般资料 取2016年8月至2018年6月在本院单胎足月阴道分娩患者57例为观察对象，其中轻度子痫前期18例，重度子痫前期19例，同期无任何并发症的正常足月组20例作为对照组。诊断及分类标准参考全国统编教材第8版《妇产科学》［4］。三组孕妇年龄、孕龄均无显著性差异，既往无心血管系统、泌尿系统及糖尿病史，近期无胎膜早破、早产及感染。三组孕妇分娩后立即收集胎盘组织，在胎盘组织母体面中央和四个象限中心无钙化及梗死处各取组织块约1cm×1cm×1cm大小，4%多聚甲醛固定，行石蜡包埋备用。相应孕妇进院后未进行任何药物治疗时采血4～5ml，置于不含抗凝剂的试管常温下静置10min待血液凝固后，离心15min（1000～1500转/min），收取上清液，分装于4个EP管中，立即存入-70℃冰箱中。

1.2 主要方法和试剂 采用免疫组化SABC法测定胎盘组织中P-p38MAPK表达及血清中TNF-α表达情况蛋白表达。获得免疫组织化学切片后，选取图片并通过HMIAS-2000 高清晰彩色病理图像免疫组化测量系统对其表达进行半定量分析：测定玻片上的细胞内的灰度值，灰度值大（染色强 度弱、 透光强）则蛋白表达少，反之则表达多。兔抗人P-p38MAPK抗体购自Santa Cruze公司，SABC试剂盒及人TNF-α ELISA试剂盒均购自于武汉博士德生物。

1.3 统计学分析 采用SPSS19.0统计软件。计量资料以（x±s）表示，组间比较采用方差分析，P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 各组孕妇胎盘组织的病理变化 与正常孕妇组相比，轻、重度子痫前期组胎盘合体滋养细胞结节细胞增多，细胞滋养细胞增生，绒毛血管减少，管腔狭窄，纤维素样坏死明显增多（见图1）。

图1 各组孕妇胎盘组织的病理图

2.2 各组孕妇胎盘组织中P-p38MAPK表达的比较 正常孕妇胎盘组织中仅见少量弱阳性细胞。主要为胎盘绒毛毛细血管内皮细胞及滋养细胞，P-p38MAPK颗粒微细，主要表达于胞桨和胞核（见图2）；在正常孕妇及轻、重度子痫前期患者胎盘组织中P-p38MAPK灰度值依次为（13.11±1.07）、（29.24±1.14） 及（43.17±6.21）（F=3.84，P＜0.05）；与正常妊娠孕妇相比，轻、重度子痫前期组胎盘组织P-p38MAPK表达水平明显增加，与对照组相比具有显著差异（均P＜0.05）。

图2 各组孕妇胎盘组织中P-p38MAPK表达情况

2.3 各组孕妇血浆中TNF-α水平的比较 在正常孕妇及轻、重度子痫前期患者血浆TNF-α依次为（39.27±1.16）pg/ml、（325.81±11.58）pg/ml及（635.24±32.82）pg/ml（F=4.02，P＜0.05）；与正常妊娠孕妇相比，轻、重度子痫前期患者血浆水平依次升高，差异均有统计学意义（均P＜0.05）。

3 讨论

子痫前期是妊娠期特有的一种并发症，严重危及孕产妇及围产儿的安全，因其病因和病理机制复杂，一直是产科的研究重点和热点。P-p38MAPK是丝裂原活化蛋白激酶（MAPKs）中重要组成成分之一，P-p38MAPK信号通路受到三级激酶链作用，当其被激活后，介导细胞应激及炎症反应，最近发现其在细胞增殖、分化及凋亡方面起到重要作用［5］。进一步研究证实，P-p38MAPK活化后，可激活c-jun和c-fos，从而介导caspases途径来诱导细胞凋亡［6］。

作为一种促炎症细胞因子，TNF-α能够在亚细胞水平上激发一些列级联反应，并可再诱导TNF-α等多种炎症因子表达上调；此外，TNF-α可作用于血管内皮细胞，从而增加毛细血管的通透性，诱导血栓形成，导致局部组织缺血缺氧。在本资料中，轻度子痫前期患者胎盘中P-p38MAPK显著高于正常妊娠中，且重度子痫前期患者胎盘组织中P-p38MAPK水平进一步增高，同时检测到母体血浆TNF-α具有类似改变。推测在妊娠过程中，滋养细胞处于相对缺氧状态，细胞组织处于相对缺氧条件时，促炎症细胞因子TNF-α表达水平升高，TNF-α作用于血管内皮细胞及滋养细胞；当胎盘部位的血管内皮细胞受到TNF-α作用后，内皮细胞受到损害，毛细血管的通透性增加，激发血栓形成，胎盘局部的栓子进一步恶化胎盘供血供氧，从而导致局部组织缺血缺氧。胎盘浅着床，子痫前期等疾病发生，同时并根据浅着床严重程度出现不同程度的临床症状，因此相应表现为轻、重度子痫前期等疾病发生。对母胎健康造成不同程度的威胁。

综上所述，妊娠过程中血浆TNF-α水平异常可诱导胎盘P-p38MAPK表达异常，参与子痫前期的发病，因此，TNF-α水平异常可作为子痫前期预测的发病指标之一，但其精准机制如何，仍有待进一步研究。