同母异父双胞胎亲子鉴定1例

杨泽登，兰玲梅，谢平丽，肖俊新，孟凡明，刘艳芳，孙淑乐，扎拉嘎白乙拉

（1.中南大学基础医学院法医学系，湖南 长沙 410013；2.中南大学湘雅司法鉴定中心，湖南 长沙 410013）

1 案 例

1.1 简要案情

某年7月，本鉴定中心受当事人孔某文的委托，受理了孔某文及其双胞胎孩子孔某萌（女）和孔某祥（男）有无血缘关系的案件。采集孔某文、孔某萌和孔某祥的血样进行STR基因座分型检测。

1.2 检验方法

1.2.1 DNA提取

使用常规的Chelex-100法提取DNA[1]。

1.2.2 常染色体STR基因座检测

采用Goldeneye®DNA身份鉴定系统20A［基点认知技术（北京）有限公司］对上述3个血样提取的DNA进行19个常染色体STR基因座和Amelogenin性别基因座的分型检测。采用Goldeneye®DNA身份鉴定系统22NC［基点认知技术（北京）有限公司］进行20个常染色体非CODIS STR基因座、1个常染色体CODIS STR基因座（D3S1358）和Amelogenin性别基因座的分型检测。扩增体系均为10μL，扩增程序按相关试剂盒说明书进行，扩增反应在9700型PCR仪（美国AB公司）上进行。扩增产物应用3130xl基因分析仪（美国AB公司）电泳检测之后，应用GeneMapper®IDv3.2软件进行数据分析。

1.2.3 X-STR基因座检测

采用Goldeneye®DNA身份鉴定系统17X［基点认知技术（北京）有限公司］检测孔某文和孔某萌X染色体上17个X-STR基因座的分型。依据试剂盒说明书进行扩增、电泳和结果分析。

1.2.4 同胞关系指数的计算

采用ITO法[2-4]计算孔某萌和孔某祥间的全同胞指数（full sibling index，FSI）、半同胞指数（half sibling index，HSI）以及全同胞指数与半同胞指数的比值（FSI∶HSI）。

1.3 检测结果

1.3.1 Goldeneye®DNA身份鉴定系统20A的检测结果

经Goldeneye®DNA身份鉴定系统20A检测，19个常染色体STR基因座和Amelogenin性别基因座的分型结果见表1。从表1可知：19个常染色体STR基因座中，孔某文和孔某萌在11个基因座（D19S433、D18S51、D6S1043、D3S1358、D7S820、D16S539、CSF1PO、Penta D、Penta E、D2S1338、FGA）的分型结果不符合孟德尔遗传定律，经计算，累积父权指数（combined paternity index，CPI）＜10-30，不支持孔某文作为孔某萌的生物学父亲；对于孔某文和孔某祥，19个常染色体STR基因座的分型结果均符合孟德尔遗传定律，且CPI＞10000（CPI=7581647.86），支持孔某文作为孔某祥的生物学父亲。

1.3.2 Goldeneye®DNA身份鉴定系统22NC的检测结果

三人的血样采用Goldeneye®DNA身份鉴定系统22NC检测后，21个常染色体STR基因座和Amelogenin性别基因座的分型结果见表2。从表2可知：孔某文和孔某萌的检测结果中，除了与Goldeneye®DNA身份鉴定系统20A检测的相同基因座D3S1358的基因分型不符合孟德尔遗传定律外，还有9个常染色体STR基因座（D15S659、D14S608、D3S1744、D2S441、D18S535、D10S1435、D11S2368、D19S253、D10S1248）的分型结果不符合孟德尔遗传定律，经计算，该22NC系统的CPI为1.028 9×10-25，不支持孔某文作为孔某萌的生物学父亲；对于孔某文和孔某祥，该检测系统的基因分型结果表明，所有基因座的分型结果均符合孟德尔遗传定律（CPI=419 736.75），明确支持孔某文作为孔某祥的生物学父亲。

表1 三人血样经Goldeneye®DNA身份鉴定系统20A检测的结果

表2 三人血样经Goldeneye®DNA身份鉴定系统22NC检测的结果

1.3.3 Goldeneye®DNA身份鉴定系统17X的检测结果

经Goldeneye®DNA身份鉴定系统17X检测孔某文和孔某萌在X染色体上的基因分型，结果见表3。孔某文和孔某萌在8个STR基因座（DXS6795、DXS8378、HPRTB、GATA165B12、DXS6807、DXS6803、DXS10134、DXS10159）上未检见相同的等位基因。

表3 孔某文和孔某萌的血样经Goldeneye®DNA身份鉴定系统17X检测的结果

1.3.4 同胞指数计算结果

采用ITO法对Goldeneye®DNA身份鉴定系统20A和Goldeneye®DNA身份鉴定系统22NC共39个常染色体STR基因座的FSI、HSI和FSI∶HSI值进行计算，结果见表4。其中，HSI值明显大于19，FSI∶HSI值明显小于1，倾向于支持孔某萌和孔某祥为半同胞关系。

表4 ITO法计算孔某萌和孔某祥间同胞关系的结果

2 讨 论

本研究采用Goldeneye®DNA身份鉴定系统20A对被检父亲（孔某文）与异卵双胞胎姐弟（孔某萌和孔某祥）进行亲子鉴定，发现孔某文和孔某萌在11个常染色体STR基因座的分型结果不符合孟德尔遗传定律，而孔某文与孔某祥在所有基因座的分型结果均符合孟德尔遗传定律。因母亲样本缺失，所以本研究又采取了Goldeneye®DNA身份鉴定系统22NC进行了补充检验。最终两次检测结果均不支持孔某文作为孔某萌的生物学父亲，支持孔某文作为孔某祥的生物学父亲。由于父女之间X染色体上的STR基因座以单倍型的形式遗传，检测X-STR基因座在父女遗传关系的鉴定中可以提供有效的认定或排除信息，具有独特的优势，故本研究采用Goldeneye®DNA身份鉴定系统17X检测孔某文和孔某萌的17个X-STR基因座，结果表明，孔某文和孔某萌的X-STR基因座分型结果不符合X染色体遗传定律。

此外，在全同胞-半同胞的鉴定中，FSI与HSI的比值是较合适的定量指标[5]。依据陆惠玲等[3]以常染色体STR基因座为基础建立的同胞关系判定规则，即以 FSI∶HSI≥1 与 FSI∶HSI＜1 分别作为全同胞和半同胞的判定标准，以HSI≥19与HSI≤1分别作为半同胞和无关个体的判定标准。本例通过ITO法计算孔某萌和孔某祥的同胞关系指数，结果表明，HSI值明显大于19，FSI∶HSI值明显小于1，倾向于支持孔某萌和孔某祥为半同胞关系。结合常染色体和X-STR基因座的检测结果及案情，支持孔某萌和孔某祥为同母异父双胞胎亲缘关系。

双胞胎可以分为两类，即同卵双生子和异卵双生子。同卵双生子是由一个相同的受精卵分裂而来，双生子的基因组DNA完全一致；异卵双生子是由两个卵子几乎同时发生受精作用产生，双生子的基因组DNA并不完全一致。双胞胎的发生率很低，为1%～3%[6]，而异卵双生子的发生概率更低。据WENK等[7]报道，在13 000例双胞胎亲子鉴定案件中，只有1例案件的鉴定结果是同母异父双胞胎；据JAMES[8]报道，在美国，每400对双胞胎中只有一对双胞胎的母亲发生异父同期复孕。本案例中异卵双生同母异父的情况非常罕见，近年来国内只有个别相关案例的报道[9-10]。同母异父双胞胎情况的发生，是由于育龄女性在排卵日一次排出两个或者连续排出两个成熟的卵子，且在24 h内该育龄女性与两名男子发生性关系，导致两个卵子分别与两名男性的精子发生了受精作用，故而出现异卵双生的情况。本案例中，孩子生母承认在排卵期间曾与另一名男子发生过性关系。这种案件很罕见，故在进行亲子鉴定时应当谨慎，如果被检父亲与女儿之间不符合孟德尔遗传定律，建议加做X染色体遗传标记，如果被检父亲与儿子之间不符合孟德尔遗传定律，则建议加做Y染色体遗传标记。