4种药品包装材料的生物安全性评价

李晓春* 王莉芳 徐长根

（陕西省食品药品监督检验研究院，陕西 西安 710065）

药品包装的材料与结构形式，尤其是直接接触药品的包装材料，ā对保证药品稳定性起决定性作用。由于药包材与药品的接触时间可长达整个药品的有效期，因此对药包材生物安全性的重视应等同于对药品本身安全性的重视[1]。

聚丙烯是一种优质的输液包装材料，具有无毒、无臭、无味、力学性能优良、耐腐蚀、性质稳定等优点。三层共挤输液用膜（即聚丙烯/聚丙烯/聚丙烯三层共挤膜）是以聚丙烯为主体，采用共挤出工艺，不使用黏合剂所形成的三层输液用膜。袋是指由前者通过热合方法制成的输液袋。五层共挤输液用膜（即酯类共聚物/乙烯甲基丙烯酸酯聚合物/聚乙烯/聚乙烯/改性乙烯-丙烯聚合物五层共挤膜）是采用共挤出工艺，不使用黏合剂所形成的五层输液用膜。袋是指由上述膜通过热合方法制成的输液袋[2]。其中不含增塑剂，对热稳定，可121 ℃高温蒸汽灭菌而不影响透明度，惰性好，不与药物产生化学反应，柔韧性强，机械强度高，可抗低温，不易破裂，易于运输和储存，是我国临床使用十分广泛的输液包装材料[3]。我们收集了12个厂家的4个品种的药品包装材料，并对它们进行了生物安全性评价，现报道如下。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 供试品：聚丙烯输液袋，3个厂家生产（记为A、B、C厂），共3批；塑料输液容器用聚丙烯组合盖（拉环式），3个厂家生产（记为D、E、F厂），共3批；三层共挤输液用膜（Ⅰ）、袋，3个厂家生产（记为G、H、I厂），共3批；五层共挤输液用膜（Ⅰ）、袋，3个厂家生产（记为J、K、L厂），共3批。

1.1.2 材料、药品、试剂。高密度聚乙烯：批号：K0M357，美国药典委员会；氯化钠注射液，批号：6L88G3，中国大冢制药有限公司；草酸钾，批号：20151014，国药集团化学试剂有限公司；优级胎牛血清，货号：TBD21HY，天津市灏洋生物制品科技有限责任公司；RPMI培养基，批号：AB10125297，HyClone；青链霉素混合液（100×），批号：20170503，Solarbio；胰蛋白酶，批号：SLBP8607V，Sigma；苯酚，批号：20160317，国药集团化学试剂有限公司；无菌PBS，批号：05E16B21，武汉博士德生物工程有限公司；直径35mm平皿，批号：10516006，Corning；滤器，0.22 μm，批号：R6EA47847，Millipore；鲎试剂，0.25 EU/mL，批号：1703012，湛江博康海洋生物有限公司；细菌内毒素检查用水（BET水），批号：160006-201401，中国食品药品检定研究院；细菌内毒素工作标准品，80 EU/支，批号：150601-201580，中国食品药品检定研究院；甲醛溶液，批号：20170921，国药集团化学试剂有限公司；弗氏完全佐剂（CFA），批号：1002237101，Sigma；十二烷基硫酸钠，批号：20050926，国药集团化学试剂有限公司；液体石蜡，批号：890528，广州市化学试剂公司。

1.1.3 细胞及动物：细胞株，L929细胞，武汉博士德生物工程有限公司。昆明种小鼠，由西安交通大学医学部实验动物中心提供，实验动物生产许可证号：SCXK（陕）2012-003；新西兰家兔、白化豚鼠，由西安市迪乐普生物资源开发有限公司提供，实验动物生产许可证号：SCXK（陕）2014-001。饲养环境：温度22～26 ℃，相对湿度40%～70%，实验动物使用许可证号： SYXK（陕）2013-00。

表1 细菌内毒素、细胞毒性、皮肤致敏、皮内刺激、急性全身毒性、溶血、热原检查结果

1.1.4 仪器：电子天平，BS2202S，赛多利斯仪器有限公司；生化培养箱，BSP-250，上海博讯实业有限公司医疗设备厂；低速台式离心机，KA-1000，上海安亭科学仪器厂；双光束紫外分光光度计，UV-2550，日本岛津公司；电子恒温水箱，HH.W21，北京中兴伟业仪器有限公司；医用净化工作台，SW-CJ-2F，苏州安泰空气技术有限公司；CO2培养箱，HF151，上海力康医疗设备有限公司；倒置相差显微镜，XSZ-D2，重庆光学仪器厂；立式压力蒸汽灭菌锅，LDZF-50KB-Ⅱ，上海申安医疗器械厂；智能热原仪，ZRY-3/E，天津天大天发科技有限公司；电子称，DS-788，上海寺冈电子有限公司。

1.2 方法：按国家药包材标准进行试验[4]。

1.2.1 细菌内毒素：聚丙烯输液瓶供试液的制备：取供试品60 cm2，剪成0.5 cm×3 cm的小条，加入10 mL BET水，经（121±2）℃ 60 min灭菌，放冷，作为试验液，并用同批水作为空白液。塑料输液容器用聚丙烯组合盖（拉环式）供试液的制备：按每个组合盖加50 mL BET水的比例混合，振摇1 min，湿热灭菌（121±2）℃保持30 min，冷却至室温，即得。三层、五层共挤输液用膜（Ⅰ）、袋供试液的制备：取空袋，加入标示容量的灭菌注射用水，封袋后，置高压蒸汽灭菌器内，（121±2）℃保持30 min，放冷，即得。依法检查（《中国药典2015年版》四部通则1143[6]），每1 mL供试液中含内毒素不得过0.25 EU。

1.2.2 细胞毒性：取供试品60 cm2，用适宜的清洁剂清洗除去油污，再用纯化水冲洗干净，滤纸吸干后切成0.5 cm×2 cm条状，湿热灭菌后，置玻璃容器内。加入10 mL含血清培养基，（37±1）℃浸提（24±2）h。照细胞毒性检查法（YBB00012003-2015）测定，（聚丙烯输液瓶按第四法测定，其余按第一法测定）应符合规定。

1.2.3 皮肤致敏：取供试品60 cm2，用肥皂水清洗除去油污，再用纯化水冲洗干净，滤纸吸干后切成0.5 cm×2 cm条状，置玻璃容器内，加入氯化钠注射液20 mL，置高压蒸汽灭菌器内，121 ℃保持60 min。照皮肤致敏检查法（YBB00052003-2015）测定，致敏反应不得过Ⅰ度。

1.2.4 皮内刺激：取供试品120 cm2，用肥皂水清洗除去油污，再用纯化水冲洗干净，滤纸吸干后切成0.5 cm×2 cm条状，置玻璃容器内，加入氯化钠注射液20 mL，置高压蒸汽灭菌器内，121 ℃保持60 min。照皮内刺激检查法（YBB00062003-2015）测定，应无刺激反应。

1.2.5 急性全身毒性检查：取供试品60 cm2，用纯化水冲洗干净，滤纸吸干后切成0.5 cm×3 cm条状，湿热灭菌后，置玻璃容器内。加入10 mL氯化钠注射液，（37±1）℃浸提（24±2）h。照急性全身毒性检查法（YBB00042003-2015）测定，应无急性全身毒性反应。

1.2.6 溶血检查：称取3份供试品，每份5 g，切成0.5 cm×2 cm条状。照溶血检查法（YBB00032003-2015）测定，溶血率应小于5%。

1.2.7 热原检查：取供试品600 cm2，用纯化水冲洗干净，滤纸吸干后切成0.5 cm×3 cm条状，置浸提容器内，高压蒸汽灭菌，115 ℃保持30 min。加入100 mL氯化钠注射液，（37±1）℃浸提（24±2）h。照热原检查法（YBB00022003-2015）测定，应无热原反应。供试用家兔及试验前准备应符合《中国药典2015年版》四部通则1142的要求[4]，供试液的制备应按无菌操作法进行。

2 结 果

细菌内毒素检查、细胞毒性检查、皮肤致敏检查、皮内刺激检查、急性全身毒性检查、溶血检查、热原检查结果见表1。

结果显示，4个品种12个厂家的药包材，按照国家药包材标准规定，进行7项生物安全性项目检查，结果均符合规定。

3 讨 论

国家药包材标准中细胞毒性检查法（YBB00012003-2015）中的第一法（相对增殖度法）对阳性对照液做出了规定，为6.3%苯酚的细胞培养液。我们在试验中发现，在加入6.3%苯酚培养液的时候和培养48 h后，均无法在镜下观察到细胞形态。《中华人民共和国国家标准医用输液、输血、注射器具检验方法第2部分：生物学试验方法》GB/T 14233.2-2005中规定阳性对照液为0.5%苯酚的细胞培养液[5]。我们发现，在加入阳性对照液时，可在镜下观察到细胞形态，未见明显异常，培养48 h后，镜下未见细胞内颗粒，溶解的细胞超过70%，毒性分级为4级（重度毒），同时阴性对照的毒性分级为0级，认为试验系统有效。故采用后者结果进行毒性分级。

本文综合了《中国药典2015年版》中的细菌内毒素检查法及国家药包材标准中相应的试验方法，对12个厂家的4个品种的药包材进行了生物安全性评价，结果均符合规定。可以认为聚丙烯输液袋、塑料输液容器用聚丙烯组合盖（拉环式）、三层共挤输液用膜（Ⅰ）、袋、五层共挤输液用膜（Ⅰ）、袋作为药包材用于临床是安全的。