抗肿瘤药物Rigosertib研究进展

王涛，彭涛，温晓雪，王刚，张首国，王林

1.北京工业大学 生命科学与生物工程学院，北京 100124；2.军事科学院 军事医学研究院 辐射医学研究所，北京 100850

Rigosertib（ON 01910.Na）是由 Onconova Ther⁃apeutics 公司研发的小分子抗肿瘤药物（商品名：Estybon），能引起肿瘤细胞中心体和多级纺锤体异常，导致纺锤体和染色体集合不稳定，使细胞阻滞在G2/M 期，最终导致肿瘤细胞凋亡。

体外实验显示Rigosertib 具有广谱抗肿瘤活性，对多种人类肿瘤细胞株表现出抑制活性，而且与其他抗肿瘤药物联用均对肿瘤产生协同抑制作用，具有较高的安全性。Rigosertib 目前处于Ⅲ期临床研究，用于治疗难治性骨髓增生异常综合征（myelodysplastic syndrome，MDS）。我们结合近年文献，对Rigosertib的结构、作用机制、体内外抗肿瘤活性以及临床研究等方面的进展做简要综述。

1 Rigosertib的结构

Reddy 等[1]研发出一系列苯乙烯苄砜类化合物（图1），对母核A 环和B 环上的侧链进行结构改造，对其中2000 个化合物进行肿瘤细胞抑制活性评价和构效关系分析，发现A 环侧链以2，4，6-三甲氧基取代、B 环侧链以4 位甲氧基取代时活性最优，由此获得化合物ON 01910，为增加其水溶性制得了钠盐ON 01910.Na，即Rigosertib，化学名为（E）-2-｛2-甲氧基-5-｛［（2，4，6-三甲氧基苯乙烯基）磺酰基］甲基｝苯基｝氨基乙酸钠[2]。

2 Rigosertib的作用机制

Rigosertib 是第一个被报道的ATP 非竞争性小分子 polo 样激酶 1（polo-like kinase 1，Plk1）抑制剂，对Plk1 表现为底物竞争性的抑制[3-4]，但与具有良好表征的Plk1 抑制剂BI2536 相比，两者引起的细胞表型存在明显差异[5]。也有研究表明，Rigosertib 能抑制磷酸肌醇 3-激酶（phosphati⁃dylinositol-3-kinase，PI3K）活性，尤其是 p110α、p110β亚型，导致AKT 磷酸化降低[6-7]，但目前尚不清楚这种作用是否为直接抑制PI3K。之后Athu⁃luridivakar 等[8]采用化学下拉法鉴定Rigosertib的直接靶点，结果显示，Rigosertib 作为RAS 模拟物，与 RAS 效应器 Raf的 RBD（RAS 结合域）结合，导致Ras-Raf-MEK-ERK 信号通路阻滞。然而Ritt等[9]的研究得出了不同的结论：Rigosertib 与Raf-RBD的亲和力很低，其对RAS-Raf-MEK-ERK 信号通路的抑制作用是间接的，主要依赖于JNK 级联信号。Jost 等[10]采用CRISPRi/a 介导的化学遗传筛选鉴定Rigosertib的靶点，结果显示该药物的作用靶点是微管蛋白，能直接与微管蛋白结合并破坏其稳定性，从而杀死癌细胞。

当前，研究者对Rigosertib的作用机制持不同观点，其直接作用靶点的确定成为研究热点和挑战，尚须进一步探讨。

图1 苯乙烯苄砜类化合物、ON 01910和ON 01910.Na的结构式

3 Rigosertib的体内外抗肿瘤活性

针对100 多种人类肿瘤细胞系的体外实验表明Rigosertib 具有广泛的肿瘤细胞（包括多种耐药细胞系）抑制活性，其IC50为50～240 nmol/L。在多个肿瘤细胞系及其异种移植模型中，Rigosertib 与紫杉醇、阿霉素、奥沙利铂、依立替康等抗肿瘤药物联用时，均对肿瘤细胞显示出协同抑制作用[11-12]。

体外研究还发现，Rigosertib 对12 种胰腺癌细胞的杀伤活性与吉西他滨（GEM）相当[13]，对16 株头颈部鳞状细胞癌（HNSCC）细胞系中的11 株也有较强的抑制增殖作用（LD50＜10 μmol/L）[14]。Ri⁃gosertib 能诱导慢性淋巴细胞白血病（CLL）细胞凋亡而对T 细胞或正常B 细胞无明显毒性[6]，对弥漫性大B 细胞淋巴瘤（DLBCL）也表现出选择性细胞毒性，LD50在 0.031 μmol/L 左右，而对正常人细胞CD3+T 和 CD19+B 无毒性[15]。

体内研究结果显示，在小鼠异种移植胰腺癌模型中，Rigosertib 能抑制癌细胞的生长和侵袭并提高小鼠的存活率[13]；Rigosertib 对 8 个 HNSCC 异种移植瘤中的3 个有抑制作用，给药28 d 后肿瘤生长抑制率大于50%[14]；在Rigosertib 治疗的12 例高危MDS 患者和2 例8-三体急性髓系白血病（AML）患者中，有3 名患者的异常骨髓细胞数量下降50%以上，3 名患者的血液得到改善[16]。

Rigosertib 和传统治疗药物顺铂分别与放疗联用治疗宫颈癌，体内肿瘤生长研究显示，与顺铂相比，给予Rigosertib的肿瘤生长延迟率提高53%，其作为放射增敏剂疗效更高，且毒性更小[17]。

4 Rigosertib在实体肿瘤中的临床研究

Rigosertib 已作为单一药物或联合用药用于乳腺癌、结肠癌、胰腺、卵巢癌、肺癌、头颈癌和淋巴瘤患者的治疗。

2 项针对实体瘤患者的Ⅰ期临床研究考察了静脉注射Rigosertib的剂量限制毒性（DLT）及药代动力学特征。其中一项研究有20 名患者参加，Jimeno 等[13]从中确定了 3120 mg Rigosertib的 DLT为3 级腹痛、疲劳、疼痛、恶心和排便冲动等，药代动力学特征为快速分配（分配半衰期为1 h）和相对缓慢的消除（消除半衰期为27 h）；另一项研究有28 名晚期癌症患者参加，Ohnuma 等[18]从中确定了Rigosertib 在Ⅱ期临床研究中的用药推荐剂量（RPTD）为850 mg/（m2·24 h）连续输注3 d，DLT包括肌无力、低钠血症、中性粒细胞减少、谵妄和混乱状态，药代动力学显示为快速血浆分布和尿排泄。

针对48 名接受标准治疗但无效的实体瘤患者的一项Ⅰ期临床研究，确定了口服Rigosertib的RPTD、DLT 和药代动力学特征[19-20]。其 RPTD 为560 mg，2/d，连续口服21 d，主要毒性为尿毒性，口服水合碳酸氢钠可改善排尿困难，血浆中Ri⁃gosertib 水平高于预测的药效学活性水平。

在一项考察Rigosertib 和GEM 联合用药特点的Ⅰ期临床研究中，Ma 等[21]确定了静脉注射Ri⁃gosertib 和 GEM的 RPTD 为 Rigosertib 1800 mg/m2+GEM 1000 mg/m2，该方案耐受性良好，毒性特征与单独使用GEM 相似。

一项有160 名患者参加的随机的Ⅱ/Ⅲ期临床研究，评价了Rigosertib 联合GEM 治疗转移性胰腺癌的疗效[22]。受试者以2∶1的方式随机分成Ri⁃gosertib+GEM 组（106 名）和 GEM 组（54 名），分别给予Rigosertib 1800 mg/（m2·d）×6+GEM 1000 mg/（m2·周）×3 和GEM 1000 mg/（m2·周）×3 进行治疗。结果显示，与 GEM 相比，Rigosertib+GEM的联合治疗并不能改善患者的生存率或药物疗效。

5 Rigosertib针对骨髓增生异常综合征的临床研究

2 项Ⅰ期临床试验考察了Rigosertib的安全性及临床活性。第一项考察了Rigosertib 口服制剂在MDS 患者中的药代动力学特征、最大耐受剂量（MTD）、安全性和临床活性[23]。560 mg Rigosertib治疗的12 例患者中，平均绝对口服生物利用度为13.9%～34.8%，剂量达700 mg 时出现DLT（3 级排尿困难和呼吸急促）。结果表明，口服Rigosertib具有良好的生物利用度、耐受性和临床活性。第二项评价的是静脉输注Rigosertib 治疗复发或难治性CLL、套细胞淋巴瘤（MCL）及B 细胞淋巴瘤的安全性和毒性[24]。结果显示，Rigosertib 在复发/难治性B 细胞恶性肿瘤患者中的耐受性良好，无血液毒性，但单用Rigosertib 时未观察到显著活性，须采用联合治疗或替代给药方案。

之后的另一项Ⅰ期临床研究评价了Rigosert⁃ib 联合阿扎胞苷（AZA）在MDS 和非增殖性AML患者中的疗效[25]。Rigosertib 采用递增的剂量进行口服：①140mg，2/d；②280mg，2/d；③560mg上午1次和280mg下午1次。AZA以75mg/（m2·d）的标准剂量静脉注射给药。结果显示，按照560 和 280 mg的剂量口服 Rigosertib 在 2 类患者中安全和耐受，不良反应性质与单独使用AZA 没有显著差异。

三项Ⅰ/Ⅱ期临床研究分别评估了静脉输注Rigosertib 在低甲基化试剂治疗失败的MDS、AML或转化性骨髓增生性肿瘤（MPN）患者中的疗效及安全性。第一项研究中，13 名MDS 患者接受了中位数为6 个疗程的治疗，总生存率中位数为10个月（3～17 个月），4 名患者出现3/4 级非血液学药物相关或可能相关的毒性（1 例腹泻、1 例排尿困难、1 例疲劳、1 例鼻出血），2 名患者出现与研究和药物无关的肺部感染[26]。第二项研究中，21 名AML 患者接受 1～19 个疗程递增剂量［650～1700 mg/（m2·d）］的治疗，结果显示 Rigosertib 在患者中安全耐受，不仅能减少异常骨髓细胞的增殖，改善外周血细胞数目，还提高了患者的存活率，最常见的1～2 级副作用（AE）包括排尿困难、血尿、疲劳、厌食、恶心和腹泻[27]。第三项研究中，26 名MPN 患者接受 2400 mg/d×7 d的 Rigosertib 静脉输注，给药后第1 周和第3 周血浆药物平均浓度分别为 9.20±5.05 和 9.81±6.70 μmol/L，Rigosertib 具有可接受的毒性，主要AE 为精神状态的瞬态改变，该药物治疗后一些患者的疾病趋于稳定[28]。

另一项Ⅰ/Ⅱ期临床研究也评价了Rigosertib 作为二线治疗药物在MDS 或AML 患者中的疗效[29]。受试者接受3～7 d 连续静脉输注Rigosertib，采用650～1700 mg/（m2·d）的递增剂量，14 d 为 1 个周期。常见的AE 为疲劳、腹泻、发热、失眠和贫血。在19 名可评价的患者中，10 例（53%）出现骨髓/外周血应答或疾病的稳定。结果显示，对Ri⁃gosertib 治疗有应答和无应答的患者的中位生存期分别为15.7 和2.0 个月，即作为二线治疗药物，Rigosertib 表现出了良好的治疗效果。

根据上述4 项Ⅰ/Ⅱ期临床研究结果，Oncono⁃va 公司开展了一项静脉注射Rigosertib（ONTIME）的多中心、随机的Ⅲ期临床研究[30-31]。270 名新发或继发性MDS 患者按2∶1 随机分为最佳支持治疗组（BSC）和BSC+静脉注射Rigosertib 组，每2 周连续 3 d 给予 Rigosertib 1700 mg/（m2·24 h），持续16 周。与Ⅱ期研究中的观察结果一致，4 周和12 周时骨髓母细胞的应答与患者的整体存活率相关，在这2 个时间点，接受Rigosertib 治疗后完全应答、部分应答和疾病稳定的患者整体存活率显著高于进行性疾病的患者。这些数据也提示，在Rigosertib 临床研究中，骨髓母细胞在4 周和12周时的应答可作为中间临床终点的生物标志物。

另一项随机、双盲的Ⅲ期临床研究也比较了接受Rigosertib+BSC 治疗与仅接受BSC 治疗的高危 MDS 患者的总体生存率[32-33]。299 名经 AZA 或地西他滨治疗失败的MDS 患者被随机分为BSC组（100）和BSC+Rigosertib 组（199），按照1800 mg/24 h的剂量连续静脉输注72 h。Rigosertib 组患者中位总生存率为8.2 个月，BSC 组中位总生存率为 5.9 个月。常见的 3 级 AE 是贫血［Rigosertib 组184 名患者中 34 例（18%） vs BSC 组 91 名患者中7 例（8%）］、血小板减少［35（19%）vs 6（7%）］、中性粒细胞减少［（31（17%）vs 7（8%）］、发热性中性粒细胞减少［22（12%）vs 10（11%）］和肺炎［22（12%） vs 10（11%）］。结果显示，与最佳支持治疗相比，Rigosertib 并没有显著提高患者的总体生存率。

此外，一项标签公开、随机的Ⅲ期临床研究（NCT02562443）也将比较分别单用Rigosertib 和BSC 对MDS 患者（包括高危MDS）总体生存率的影响，现正处于招募患者阶段。

6 结语

Rigosertib 作为一种非ATP 竞争性小分子多激酶（包括PI3K 和Plk1）抑制剂，能选择性诱导成髓细胞增殖停滞和凋亡而对正常造血细胞无影响，具有抗肿瘤和抗血管生成活性。Rigosertib 可单用或联用于晚期实体瘤包括胰腺癌（Ⅱ/Ⅲ期）和卵巢癌（Ⅱ期）患者及高危MDS 患者的治疗，具有良好的疗效和药物耐受性，毒性小、不良反应少。Rigosertib 正处于高危MDS 治疗的Ⅲ期临床研究阶段，有望成为首个获批的高危MDS的二线治疗药物，作为一线标准药物——低甲基化药物的有力补充，为难治性或复发MDS 和AML 患者带来福音。Rigosertib 必将成为一种极具潜力的新型抗肿瘤药物。