饲料添加钩吻干粉对仔猪生长性能的影响及机制

2019-04-19孙志良

中兽医学杂志 2019年2期

王颉，孙志良

（湖南农业大学动物医学院，湖南长沙410128）

钩吻（Gelsemium elegans (Gardn.＆ Champ.)Benth.，GEB）为马钱科植物胡蔓藤的全草，又名断肠草、野葛、毒根、大茶药等，味苦、微辛，性热，有大毒，主要分布在浙江、福建、广东、广西、湖南、贵州和云南等地。研究表明，钩吻素子、钩吻素甲等生物碱是其主要的有效成分[1]。

中草药是我国医药文化的瑰宝，部分中草药作为饲料原料应用于畜禽养殖也具有悠久的历史。如《神农本草经》中有“梓叶喂猪，肥大三倍”的记载[3]。近年来，关于草药在畜禽、水产养殖中应用的报道逐渐增多，显示出中草药在促进动物生长、增进动物健康以及疾病防控与治疗中的广阔前景。

1 材料与方法

1.1 试验动物与处理

选取30 头56日龄的体况健康的长×大二元杂交育成猪，按体重平均分为两组：对照组（CON，15 头）饲喂基础日粮，钩吻组（GEB，15 头）饲喂补充50mg/kg 剂量的钩吻醇提物日粮。试验期为49天，每两周记录一次猪的体重和采食量；试验结束后，采集仔猪血液进行相关血常规和生化指标测定（每组生物学重复为15，技术重复为3），采集肝脏组织进行基因表达分析（每组生物学重复为9，技术重复为3）。

1.2 血常规检测

使用血液分析仪（迈瑞BC-2800vet）测定全血中的红细胞数(RBC)、血红蛋白(HGB)、红细胞平均血红蛋白含量(MCH)、红细胞平均血红蛋白浓度(MCHC)、白细胞数(WBC)等相关血常规参数。

1.3 生化指标测定

使用血液生化仪测定血液生化指标[2]，按照试剂盒说明书分别测定血清中INS （胰岛素）、TP（总蛋白）、ALB （白蛋白）、GLOB （球蛋白）、IGM（免疫球蛋白M）、IGG（免疫球蛋白G）、IGA（免疫球蛋白A）、ALT （谷丙转氨酶）、AST （谷草转氨酶）、AKP（碱性磷酸酶）、LDH(乳酸脱氢酶)、BUN（尿素氮）、TCHO（胆固醇）等血液生化指标的含量。

1.4 基因表达分析

RT-PCR 使用TAKARA 试剂盒按照说明书进行检测，步骤简述如下：（1）反应体系：20μL，其中上、下引物各1.0 μL，SYBR Premix Ex Taq II 10 μL，cDNA 200 ng，补充dH2O 至20 μL 的总体积。（2）反应程序： 95 ℃，30 s；，95 ℃5 s，60 ℃30 s，40 个循环； 95 ℃15 s，60 ℃60 s，95 ℃15 s。使用Applied Biosystems 7900HT Fast Real-Time PCR System 仪器上机。相对基因表达用2-(△△Ct)公式计算。

1.5 数据处理与统计分析

试验数据均以平均值±标准误表示，试验结果采用GraphPad Prism 7.0 进行U-paired t-test统计分析并作图，P＜0.05 表示差异显著。

2 结果

2.1 生长性能

试验期间1-15 天、16-31 天、32-49 天，饲料中添加钩吻干粉显著提高了仔猪的平均日增重并且降低料重比（图1，P＜0.05）。同时，饲料中添加钩吻干粉显著提高了试验全程（0-49 天）仔猪的平均日增重（11%）并降低了全程料重比（12%）（图1，P＜0.05）。钩吻对仔猪的平均日采食量无显著性影响（图1，P＞0.05）。

图1 钩吻对仔猪生长性能的影响（Mean±SD）

2.2 血常规变化

血常规检测结果显示，GEB 组的红细胞数量和血红蛋白含量显著高于CON 组（P＜0.05）（图2，A、B），分别提高7.6%、8.5%。血小板、白细胞、淋巴细胞的数量在GEB 组和CON 组之间没有显著性差异（P＞0.05）（图2，C、D、E）。

图2 钩吻对仔猪血常规的影响（Mean±SD）

2.3 血液生化参数变化

与CON 相比，饲料中添加GEB 显著提高了仔猪血清总蛋白（5.9%）、免疫球蛋白A（36%）、胰岛素（11%）、尿素氮（17%）等指标（P＜0.05），同时降低血清中谷丙转氨酶（15%）和谷草转氨酶（23%）活性以及谷丙转氨酶与谷草转氨酶比值（P＜0.05）。（图3，A、E、F、G、H、I、J）。血清白蛋白、球蛋白、免疫球蛋白M、免疫球蛋白G、总胆固醇等在两组之间没有显著性差异（P＞0.05）（图3，B、C、D、L、K）。