高氯酸滴定法与高效液相色谱法测定地巴唑片中地巴唑含量比较*

陆广马

（广西壮族自治区百色市食品药品检验所，广西 百色 533000）

地巴唑是2-苄基苯并咪唑的盐酸盐，对血管平滑肌有直接松弛作用，临床多用于治疗轻度高血压、心绞痛、脑血管痉挛[1-2]、胃肠平滑肌痉挛、脊髓灰质炎后遗症、外周颜面神经麻痹等疾病，也可用于妊娠期高血压综合征的治疗。片剂质量直接关系用药安全[3]，需进行检测。常用的高氯酸滴定法和高效液相色谱（HPLC）法各有优势，前者的优点是可快速得到结果，但对环境要求较高，湿度不能大，一定要是标定温度，使用的器皿一定要干燥，而且不能边滴定边溶解；后者的优点是分离效率高，选择性好，检测灵敏度高，操作自动化，应用范围广[4]，但分析成本较高，购买仪器及日常维护费用较高，且对操作人员技术要求高[5]。现行质量标准中地巴唑片的含量测定方法专属性不强，不利于质量控制。本研究中比较了高氯酸滴定法和HPLC法测定地巴唑片中地巴唑含量的效果。现报道如下。

1 仪器与试药

1.1 仪器

LC-2030C 3D型高效液相色谱仪（日本Shimadzu公司）；FA2004型电子分析天平（上海精密科学仪器有限公司）；滴定管（50 mL，上海化科实验器材有限公司）；分液漏斗（150 mL）、移液管（25 mL）均购自泰州市姜堰区东方科教仪器厂；容量瓶（50 mL，上海垒固仪器有限公司）；GM-0.33A 0.22 μm微孔滤膜（深圳市三利化学品有限公司）。

1.2 试药

地巴唑片（山西仟源医药集团股份有限公司，批号为C151201，规格为每片5 mg）；盐酸地巴唑对照品（中国食品药品检定研究院，批号为10042-201002，纯度为98.9%）；高氯酸标准滴定液（上海化学试剂研究所，批号为 2014-19，复标浓度为 0.101 9 mol/L）；甲醇为色谱纯，其余试剂均为分析纯，水为蒸馏水。

2 方法与结果

2.1 HPLC法

2.1.1 色谱条件

色谱柱：AgilentEclipseXDB-C18柱（250mm×4.6mm，5 μm）；流动相：甲醇 -水 -三乙胺（80 ∶19.5 ∶0.5，V/V/V）；流速：1.0 mL/min；检测波长：275 nm；柱温：26 ℃；进样量：10 μL[6-7]。

2.1.2 溶液制备

称取盐酸地巴唑对照品12.5 mg，精密称定，置25 mL容量瓶中，加甲醇溶解并定容，经0.22 μm微孔滤膜滤过，取续滤液，即得对照品贮备液[8]；取5 mL，置25 mL容量瓶中，加甲醇并定容，即得对照品溶液。称取样品粉末适量，置25 mL容量瓶中，加甲醇溶解并定容，经0.22 μm微孔滤膜滤过，取续滤液，即得供试品溶液。以溶剂作为阴性对照品溶液。

2.1.3 方法学考察

系统适用性试验：取2.1.2项下3种溶液各适量，按拟订色谱条件进样测定。结果理论板数以地巴唑峰计不低于2 000，详见图1。

图1 高效液相色谱图

线性关系考察：分别精密量取对照品溶液20，50，100，150，200 μL，加流动相定容至 200 μL，摇匀，制得系列对照品溶液，按拟订色谱条件进样测定，记录峰面积。以进样量（X，μg）为横坐标、峰面积（Y）为纵坐标进行线性回归，得回归方程Y=17 050X-5.142，r=0.999 9（n=5）。结果表明，地巴唑进样量在 0.2 ～2.0 μg范围内与峰面积线性关系良好。

精密度试验：取对照品溶液适量，按拟订色谱条件连续进样测定6次，记录峰面积。结果的RSD为2.45%（n=6），表明仪器精密度良好。

稳定性试验：取同一供试品溶液适量，分别于室温下放置 0，4，8，12，16，24 h 时按拟订色谱条件进样测定，记录峰面积。结果的RSD为2.62%（n=6），表明供试品溶液室温放置24 h内基本稳定。

重复性试验：称取同一样品适量，精密称定，同法制备供试品溶液，再按拟订色谱条件进样测定，记录峰面积，并计算含量。结果的RSD为2.64%（n=6），表明方法重复性良好。

加样回收试验：取已知含量的样品适量，共6份，分别加入一定质量浓度的对照品溶液，同法制备供试品溶液，再按拟订色谱条件进样测定，记录峰面积，并计算回收率。结果见表1。

表1 地巴唑加样回收试验结果（n=6）

2.2 高氯酸滴定法

取样品50片，精密称定，置研钵中研磨，称取适量（相当于地巴唑0.2g），精密称定，置分液漏斗中，加10mL水，摇匀溶解，加氢氧化钠5 mL，氯仿50 mL，振摇，萃取，分离出氯仿层。滤过，取续滤液20 mL，加1.5 mL甲基橙为指示液，用0.1 mol/L高氯酸溶液滴定，溶液呈桃红色则指示滴定终点。

2.3 样品含量测定结果

HPLC法的测定结果较高氯酸滴定法更满意，详见表2。

表2 样品含量测定结果（%，n=5）

3 讨论

现行药品标准中采用碱提取非水滴定法测定地巴唑片的含量，操作烦琐费时，不易掌握。傅应华等[9]应用一阶导数光谱法测定地巴唑片含量，同时考察了样品的含量均匀度，结果显示，地巴唑溶液在72 h内其一阶导数光谱振幅基本不变，故此法可用于该制剂的质量控制。李伟[10]采用阴离子表面活性剂滴定法对地巴唑进行了含量均匀度检查，结果显示操作可行。其他测定方法还有HPLC法及高氯酸滴定法，高氯酸滴定法为非水滴定法，原理为氢离子与早弱碱性基团结合，但该方法专属性不高[11-12]。高氯酸滴定时，如样品溶解不完全，粉末置分液漏斗时，易堵塞活塞，导致溶解困难[13]。HPLC法可很好地减少测定过程中杂质对地巴唑的影响，地巴唑属有机铵盐酸盐，在甲醇-水流动相中会发生严重的拖尾现象，而加入0.5%三乙胺后，可很好地改善该情况[14]。

综上所述，HPLC法相对于高氯酸滴定法能更好地减少杂质对地巴唑含量测定的干扰，可更准确地测定含量。