不同山楂制剂对大鼠胃黏膜的保护作用研究
2019-04-15李启艳
李启艳,王 慧
(中国食品药品检定研究院,北京 102600)
山楂作为一种水果被大家所熟悉,其果胶含量居所有水果之首,并且它含有比较丰富的糖类、维生素和矿物质[1],同时在中药当中还是属于一种消导药,它的功效主要是治疗消化不良、积食等疾病[2]。山楂也具有一些活血化瘀的作用,而且山楂当中还含有一些黄酮类物质,它对于调节胆固醇的代谢、保护血管、保护及修复胃粘膜都是很有帮助的。猴头菇可以促进人的食欲[3],减少厌食带来的困扰,还能增强食道粘膜屏障机能,提高淋巴细胞转化率,提升白细胞等作用[4]。所以,猴头菇可以提高食道以及胃部对于疾病的免疫能力[5]。低聚木糖是聚合糖类中增殖双歧杆菌功能最强的品种之一,它的功效性是其他聚合糖类的近20倍,人体胃肠道内没有水解低聚木糖的酶[6],所以其可直接进入大肠内优先为双歧杆菌所利用,促进双歧杆菌增殖同时产生多种有机酸[7]。降低肠道PH值,抑制有害菌生长,使益生菌在肠道大量增殖,达到健胃护胃的效果。小麦低聚肽是来源于小麦蛋白水解产物的生物活性肽[8],小麦低聚肽能优先与脂肪酸自由基结合,使自由基链式反应中止,从而提高胃黏膜抗氧化及清除自由基能力,降低脂质过氧化[9],小麦低聚肽还可显著减轻胃黏膜损伤的炎症反应,减少胃黏膜上皮细胞的凋亡,促进胃黏膜损伤的愈合。中药白及具有收敛止血消肿生肌的功效,三七具有散瘀止血、消肿定痛的功效。本实验观察了山楂与猴头菇等配伍及与小麦低聚肽、中药配方制成的不同制剂对乙醇致正常大鼠急性胃溃疡模型的影响。
1 材料及方法
1.1 动物
体重为190~240g的清洁级SD大鼠,雌雄各半,由济南朋悦实验动物繁育有限公司提供。
1.2 实验制剂及试剂
猴头菇提取物、山楂提取物、低聚木糖购买自西安天一生物技术有限公司,临用时用蒸馏水配置到所需浓度;生理盐水、无水乙醇、10%福尔马林液购买自天津市鼎盛鑫化工有限公司。
1.3 主要仪器
TKY-TSI自动组织脱水机(湖北泰康医疗设备有限公司);KD-3368AM电脑切片机(浙江省金华市科迪仪器设备有限公司);BX43型显微镜(奥林巴斯);YD-6L型生物组织冷冻包埋机(上海精学科学仪器有限公司)。
2 方法
2.1 不同山楂制剂对无水乙醇诱发大鼠胃粘膜损伤的影响
先将大鼠饲养观察2周判断是否健康,将健康的大鼠随机分成6组[10],每组8只,分为对照组(生理盐水);模型组;剂量组1:山楂提取物(0.06g/kg);剂量组2:山楂提取物+猴头菇提取物(山楂提取物0.06g/kg、猴头菇提取物0.25g/kg);剂量组3:山楂提取物+猴头菇提取物+低聚木糖(山楂提取物0.06g/kg、猴头菇提取物0.25g/kg、低聚木糖0.075g/kg);剂量4:山楂+小麦低聚肽+中药白及三七(山楂0.06g/kg、小麦低聚肽0.4g/kg、白及三七各0.05g/kg)。每天给大鼠灌胃给药,连续7天,在第7天灌胃前禁食不禁水24小时。末次给药后3小时实验大鼠分别灌服1ml无水乙醇。1小时后处死所有大鼠,取大鼠全胃浸入10%福尔马林液固定1小时,后沿着大弯剪开大鼠胃,冲洗洁净胃壁,肉眼和显微镜下观察胃粘膜的线状及点状溃疡[11]。最后计算大鼠胃粘膜的溃疡程度。
2.2 取材方法
将每只大鼠的胃组织标本经10%福尔马林固定、按照常规方法取材、石蜡包埋、切片至4μm,HE染色,显微镜下观察各组大鼠胃组织的病理变化情况。每项观察指标分别以1,2,3,4的得分来表示,且分值越高表示大鼠胃组织损害越严重,观察指标详见表1。
表1 胃组织病理学评分标准[12]
3 结果
由表2可以看出,与模型组相比,剂量组1、2、3大鼠胃组织病理学评分依次降低,表示大鼠对无水乙醇诱发的胃粘膜损伤影响依次降低,且剂量组2与模型组比较,具有显著性差异(P<0.05);剂量组3和剂量组4与模型组比较,具有极显著性差异(P<0.01)。且剂量组3与剂量组4的评分接近对照组,证明,剂量组3与剂量组4大鼠受无水乙醇诱发的胃粘膜损伤影响是最小的。
表2 不同山楂制剂对无水乙醇诱发大鼠胃粘膜损伤的影响评分
#与对照组相比,P <0.01;﹡ 与模型组相比,P <0.05;﹡﹡与模型组相比,P <0.01。
4 讨论
实验结果表明,与模型组相比,剂量组1、2、3、4大鼠的胃组织病变程度均减轻,其中剂量组2与模型组比较具有显著差异(P<0.05),剂量组3与剂量组4与模型组比较具有极显著差异(P<0.01),说明,剂量组2大鼠的胃组织病变与模型组比较有一定程度的恢复,但疗效不及剂量组3和剂量组4。实验结果也进一步说明山楂提取物、猴头菇提取物、低聚木糖配伍与小麦低聚肽、白及、三七配伍对无水乙醇所致的胃粘膜损伤有很好的治疗和保护作用,其作用优于单独的山楂提取物,且两者疗效作用相当。关于不同山楂制剂对大鼠胃黏膜损伤的修护和防御机制,还需要进一步的探讨。