妇糜康阴道栓长期给药对家兔血液生理生化指标的影响

孟 莉 向绍杰 刘小虎 宋达夫 张慧颖 贾天柱

(1.辽宁省中医药研究院，沈阳 110034)(2. 辽宁中医药大学药学院，大连 116600)

妇糜康阴道栓是由川椒、白癣皮、地骨皮等几味中药组成，具有清热解毒，燥湿、杀虫止痒功效。用于治疗湿热下注所致的带下量多、外阴瘙痒，灼热疼痛等阴道炎。前期药理实验表明，妇糜康阴道栓对白色念球菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌有抑制作用，能提高磷酸组织胺所致豚鼠瘙痒反应的致痒阈。为进一步考察其安全性，以便更好地应用于临床，本实验根据《中药、天然药物长期毒性研究技术指导原则》对妇糜康阴道栓进行家兔长期毒性实验研究[1]，观察其对血液生理生化指标的影响，为临床安全用药提供参考。

1 材料与方法

1.1 实验动物

白色家兔48只，雌性，体质量1.5～2.0 kg，由沈阳药科大学实验动物中心购进，许可证号：SCXK(辽)2009-0002。实验动物饲养于辽宁省中医药研究院实验动物中心，许可证号： SYXK(辽) 2012-0003；实验温度20～23 ℃，湿度55%～60%。照明时间采用为10 h(明)/14 h(暗)交替，颗粒饲料由北京科澳协力饲料有限公司提供，许可证号: SCXK(京) 2009-0012。

1.2 受试药物与试剂

妇糜康阴道栓浸膏粉，每克浸膏粉含9.52 g生药，批号：20120701-0。赋形剂为PEG400和PEG4000按重量比1∶1混合。妇糜康阴道栓浸膏粉、赋形剂均由辽宁中医研究院提供。血细胞分析仪用稀释液，批号：120911H18；丙氨酸转氨酶试剂盒，批号12-1023P；天门冬氨酸转氨酶试剂盒，批号12-1024P；碱性磷酸酶试剂盒，批号12-0912P；白蛋白试剂盒，批号11-0926；总蛋白试剂盒，批号11-0510；谷氨酰转移酶试剂盒，批号12-1114P；血清总胆红素测定通用试剂盒，批号12-0915P；总胆固醇试剂盒，批号12-1015P；甘油三酯试剂盒，批号12-0828P；尿素氮试剂盒，批号12-0922P；肌酐液体试剂，批号12-1015；血糖试剂盒，批号12-0926P；肌酸磷酸激酶试剂盒，批号12-0905P，均由金斯尔提供；凝血酶原试剂盒，批号STG20101，由北京世帝公司提供。

1.3 仪器

ABX Pentra 60血细胞分析仪，上海科华卓越；330全自动生化分析仪，北京世帝科学仪器公司；LG-PABER型血小板聚集凝血因子分析仪，美国双杰兄弟集团有限公司。

1.4 方法[2-7]

1.4.1分组与给药:健康雌性家兔48只，按体质量随机分成4组，赋形剂对照组及妇糜康阴道栓浸膏粉低、中、高3个剂量组，每组12只。妇糜康阴道栓浸膏粉按0.952 g/kg、2.856 g/kg、8.586 g/kg体质量(相当于临床拟给药剂量的6、20、60倍)阴道给药，每天1次，连续给药6个月。

1.4.2观察指标: 试验期间，每日观察受试家兔的行为体征、外观形态及药物可能产生的不良反应等。每周称家兔体质量1次，观察其体质量最快的变化情况。分别于给药6个月及停药4周后，各组分别取6只家兔，禁食不禁水18 h，麻醉，腹总动脉采血，检测血液学及血液生化学指标。

1.5 统计学方法

2 结果

2.1 对家兔一般状况、体质量的影响

给药期间，各组受试家兔被毛光泽、口周、鼻黏膜无破溃、活动正常，摄食、饮水、大小便均未见异常，亦未发现因药物中毒引起的受试动物死亡或其它毒副反应发生。各给药组受试家兔体质量与赋形剂对照组比差异无显著性(P>0.05)。

2.2 对血液生理指标的影响

给药6个月及停药4周后，各组受试家兔血液生理指标测试，结果见表1、2。由结果可知，妇糜康阴道栓浸膏粉低、中剂量组家兔血液生理指标与赋形剂对照组比差异无显著性(P>0.05)。妇糜康阴道栓浸膏粉高剂量组家兔红细胞数、血红蛋白含量及红细胞压积与赋形剂对照组比均明显增多(P<0.05)，其它血液生理指标与赋形剂对照组比差异无显著性(P>0.05)。停药4周后，恢复正常。给药组对血液其它生理指标无明显影响(P>0.05)。

表1 妇糜康阴道栓浸膏粉阴道给药6个月对家兔血液生理指标的影响Table 1 Effect of Administration of Bomixiao Vaginal Suppository on blood hematology indexes in rabbits after six

注:赋形剂与对照组比较：*P<0.05

Note:vs.normal control group：*P<0.05

2.3 对血液生化指标的影响

给药6个月及停药4周后，各组受试家兔血液生化学指标测试结果见表3、4。由结果可知，各给药组受试家兔血液生化学指标与空白对照组比，差异无显著性(P>0.05)。

表2 妇糜康阴道栓浸膏粉阴道给药对停药4周后家兔血液生化指标的影响Table 2 Effect of Administration of Bomixiao Vaginal Suppository on blood hematology indexes in rabbits after drug withdrawal for 4

表3 妇糜康阴道栓浸膏粉阴道给药6个月对家兔血液生化指标的影响Table 3 Effect of Administration of Bomixiao Vaginal Suppository on blood biochemical indexes in rabbits after six

表4 妇糜康阴道栓浸膏粉阴道给药停药4周后对家兔血液生化学的影响Table 4 Effect of Administration of Bomixiao Vaginal Suppository on blood biochemical indexes in rabbits after drug withdrawal for 4

3 讨论

长期毒性试验是指试验动物连续多日接触较大剂量的药物所引起的中毒效应。它是药物非临床安全性研究的有机组成部分，是药物非临床毒理学研究中综合性最强、获得信息最多和对临床指导意义最大的一项毒理学研究，而血液学和血液生化检测是长期毒性试验重要的检测指标之一，对于判定毒性的剂量和靶器官都有重要意义[8-9]。

本课题组前期进行了妇糜康阴道栓的急性毒性实验研究，未测得LD50，最大耐受量(MTD)8.568 g生药/kg，相当于拟临床日用量的60倍。为进一步探讨妇糜康阴道栓的安全性，本文考察了妇糜康阴道栓长期给药对家兔血液学及血液生化学的影响。按照《中药、天然药物长期毒性研究技术指导原则》[1]，本实验设低、中、高(0.952 g/kg、2.856 g/kg、8.586 g/kg)3个剂量组，分别相当于人临床拟用量的6倍、20倍和60倍。给药6个月及停药4周后，各给药组受试动物一般行为状态及体质量增长与赋形剂对照组相比差异无显著性(P>0.05)，妇糜康阴道栓浸膏粉高剂量组(8.568 g/kg)受试家兔比赋形剂对照组家兔的红细胞数、血红蛋白含量及红细胞压积增加(P<0.05)，停药4周后，恢复正常。说明妇糜康阴道栓浸膏粉高剂量组对受试家兔组红细胞数、血红蛋白含量及红细胞压积的影响是可逆的，至于高剂量组为何引起这3个指标变化，还有待今后进一步研究。。给药6个月及恢复4周后，各给药组受试家兔血液生化学指标与赋形剂对照组比差异均无显著性(P>0.05)。

综上所述，家兔阴道给予妇糜康阴道栓浸膏粉2.856 g/kg，相当于临床拟用量的20倍，对家兔血液学及血液生理生化指标没有影响。提示妇糜康阴道栓家兔阴道给药安全剂量应低于2.865 g/kg。