YKL-40、PCPE-1对慢性乙型肝炎患者肝纤维化程度的评估价值

杨启 吕新远 王哲

肝纤维化是慢性乙型肝炎病变的基础，可发展为肝硬化，甚至肝癌[1]。因此，及时对肝纤维化进行诊断并治疗，可有效降低慢性乙型肝炎的死亡率。目前，肝脏活检仍是肝纤维化程度评价的金标准。但肝脏活检仍有许多不足之处，如侵袭性、不便利性及并发症风险等。因此，寻找非侵入性诊断肝纤维化程度的指标比较迫切。有文献报道，壳多糖酶3样蛋白1(chitinase 3-like protein 1，YKL-40)、前胶原C端蛋白酶增强子1(procollagen C-terminal protease enhancer 1，PCPE-1)在慢性肝病患者中特异性表达[2-3]。但关于二者诊断肝纤维化程度的研究鲜有报道。因此本文检测慢性乙型肝炎患者血清中YKL-40、PCPE-1水平，探究其诊断不同程度肝纤维化的效能，以期为肝纤维化的诊疗提供帮助。现报道如下。

资料与方法

一、 一般资料

选择2015年1月至2018年2月在我院就诊的232例慢性乙型肝炎患者作为研究对象，最终将符合条件的136例慢性乙型肝炎患者纳入本次研究。选择同期健康体检的人员36例作为健康对照组。本次研究所有慢性乙型肝炎患者均按照慢性乙型肝炎防治指南(2015更新版)[4]进行诊断。慢性乙型肝炎组患者中男性64例，女性72例，平均年龄(39.6±6.7)岁，其中S0 31例(22.8%)、S1 40例(29.4%)、S2 24例(17.6%)、S3 26例(19.1%)、S4 15例(11.0%)。健康对照组男性22例，女性14例，平均年龄(40.1±7.2)岁。纳入标准：①接受肝穿刺活组织检查；②抽血检测血清YKL-40、PCPE-1水平前未治疗。排除标准：①合并其他类型嗜肝病毒感染；②合并酒精性、脂肪性等肝病；③肝癌；合并肝外纤维化相关的疾病；④近期未服用过对凝血功能有影响的药物。本次研究两组受试者在年龄(t=0.392，P=0.696)、性别(c2=2.248，P=0.134)方面比较，差异不具统计学意义，具有可比性。本次研究经我院医学伦理委员会批准同意。

二、观察指标

(一)、血清学检测 采用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测两组受试者血清中YKL-40水平，人血清YKL-40 ELISA试剂盒购自杭州普望生物技术有限公司。采用酶联免疫吸附法检测两组受试者血清中PCPE-1水平，人血清PCPE-1 ELISA试剂盒购自上海钰博生物科技有限公司。

(二) 、肝纤维化程度评分[5]根据HBeAg是否阳性、肝表面光滑度及肝实质回声情况对肝纤维化程度进行评估。HBeAg阳性计1分，阴性计0分；肝表面光滑计0分，较光滑计1分，不光滑计2分，结节计3分；肝实质回声均匀增强计0分，略粗计1分，较粗计2分，粗糙计3分。

APRI、FIB-4计算 APRI= AST相对其正常上限值的倍数×100/PLT；FIB-4=年龄×AST/[PLT×(ALT)1/2]。

结 果

一、 慢性乙型肝炎患者及健康对照者血清中YKL-40、PCPE-1水平比较

慢性乙型肝炎组患者血清中YKL-40、PCPE-1水平分别为(31.6±3.6) ng/mL和5.9(2.5，9.1)pg/mL；健康对照组受试者血清中YKL-40、PCPE-1水平分别为(7.1±0.5)ng/mL和42.0(21.4，62.8)pg/mL。两组受试者血清YKL-40、PCPE-1比较，差异均有统计学意义(t=-76.525，P<0.001；Z=8.149，P<0.001)。

二、 不同肝纤维化程度的慢性乙型肝炎患者血清中YKL-40、PCPE-1水平比较

YKL-40在慢性乙型肝炎病理分期S0、S1、S2、S3和S4患者中的表达水平分别为(27.7±2.3)ng/mL、(30.7±1.9)ng/mL、(31.6±3.0)ng/mL、(34.8±2.1)ng/mL和(36.2±1.9)ng/mL；PCPE-1在慢性乙型肝炎病理分期S0、S1、S2、S3和S4患者中的表达水平分别为(11.5±2.7)pg/mL、(7.0±2.1)pg/mL、(3.9±2.7)pg/mL、(2.8±1.9)pg/mL和(1.5±1.3)pg/mL。五组患者血清YKL-40、PCPE-1水平比较，差异均有统计学意义(F=52.449、81.325，P<0.001)。S0患者血清YKL-40水平低于S1、S2、S3和S4患者(q=7.888、8.934、16.556、16.854，P<0.01)；S1、S2患者血清YKL-40水平比较，差异不具统计学意义(q=2.098，P>0.05)，但均低于S3和S4患者(与S3比较，q=9.985、6.973，P<0.01；与S4比较，q=9.985、6.973，P<0.01)；S3、S4患者血清YKL-40水平比较，差异不具统计学意义(q=2.770，P>0.05)。S0患者血清PCPE-1水平高于S1、S2、S3和S4患者(q=11.644、17.570、20.465、19.923，P<0.01)；S1患者血清PCPE-1水平高于S2、S3和S4患者(q=7.711、10.543、11.494，P<0.01)；S2、S3患者血清PCPE-1水平比较，差异不具统计学意义(q=2.349，P>0.05)，但高于S4患者(q=4.524，P<0.01)；S3、S4患者血清PCPE-1水平比较，差异不具统计学意义(q=2.541，P>0.05)。见图1。

三、 慢性乙型肝炎患者血清YKL-40、PCPE-1水平与肝纤维化程度的相关性

根据HBeAg是否阳性、肝表面光滑度及肝实质回声情况对肝纤维化程度进行评估，136例慢性乙型肝炎患者肝纤维化程度评分为(2.8±0.8)分。慢性乙型肝炎患者血清YKL-40水平与肝纤维化程度评分呈正相关(r=0.331,P<0.05)，血清PCPE-1水平与肝纤维化程度评分呈负相关(r=-0.340,P<0.05)。见图2。

四、 血清YKL-40、PCPE-1诊断显著纤维化(S2～4)、进展期纤维化(S3～4)及早期肝硬化(S4)的价值

血清YKL-40、PCPE-1诊断慢性乙型肝炎患者显著纤维化、进展期纤维化及早期肝硬化的效能比较，差异均不具统计学差异(Z=1.836、1.384、0.438，P=0.066、0.166、0.662)。见图3及表1。

五、血清YKL-40、PCPE-1联合检测与APRI、FIB-4诊断显著纤维化、进展期纤维化及早期肝硬化的价值

血清YKL-40、PCPE-1联合检测和FIB-4诊断显著纤维化的效能比较，差异不具统计学意义(Z=1.790，P=0.073)；但二者诊断显著纤维化的效能均高于APRI，差异均有统计学意义(Z=3.947、2.573，P<0.05)。血清YKL-40、PCPE-1联合检测诊断进展期纤维化的效能高于APRI、FIB-4，差异有统计学意义(Z=2.257、4.166，P<0.05)；APRI、FIB-4诊断进展期纤维化的效能比较，差异无统计学意义(Z=1.737，P=0.083)。血清YKL-40、PCPE-1联合检测与APRI、FIB-4诊断早期肝硬化的效能比较，差异均不具统计学意义(Z=1.912、1.536，P=0.056、0.125)。见图4及表2。

图1 不同肝纤维化程度的慢性乙型肝炎患者血清中YKL-40、PCPE-1水平

图2 慢性乙型肝炎患者血清YKL-40、PCPE-1水平与肝纤维化程度评分的散点图

1：血清YKL-40、PCPE-1诊断显著纤维化的ROC曲线；2：血清YKL-40、PCPE-1诊断进展期纤维化的ROC曲线；3：血清YKL-40、PCPE-1诊断早期肝硬化的ROC曲线

图3血清YKL-40、PCPE-1诊断显著纤维化、进展期纤维化及早期肝硬化的ROC曲线

表1 血清YKL-40、PCPE-1诊断显著纤维化、进展期纤维化及早期肝硬化的效能

1：血清YKL-40、PCPE-1联合检测与APRI、FIB-4诊断显著纤维化的ROC曲线；2：血清YKL-40、PCPE-1联合检测与APRI、FIB-4诊断进展期纤维化的ROC曲线；3：血清YKL-40、PCPE-1联合检测与APRI、FIB-4诊断早期肝硬化的ROC曲线

图4血清YKL-40、PCPE-1联合检测与APRI、FIB-4诊断显著纤维化、进展期纤维化及早期肝硬化的ROC曲线

讨 论

YKL-40是哺乳动物几丁质酶家庭的成员之一，可由嗜中性粒细胞、巨噬细胞及血管平滑肌细胞分泌，广泛存在于人体组织中，尤其在肝脏组织中表达最多丰富。大量研究表明YKL-40参与炎症反应、细胞迁移、纤维化及组织重塑等[6]。据文献报道肝硬化患者血清中YKL-40水平高于健康人和无纤维化的慢性乙型肝炎患者，且随肝纤维化程度加重而升高[7]。本文研究结果显示慢性乙型肝炎患者血清YKL-40水平高于健康对照者，且肝纤维化病理等级越高，其患者血清YKL-40水平越高，与上述文献报道一致。以上结果提示YKL-40在肝纤维化患者血清中特异性表达，其表达水平可辅助判断肝纤维化程度。PCPE-1结缔组织糖蛋白的一种，其可以提高羧基肽的释放速率，因此对于胶原纤维的合成起决定作用。有研究显示PCPE-1在肝纤维化患者血清中表达水平较低[8]。本次实验结果显示慢性乙型肝炎患者血清中PCPE-1水平低于健康对照者，且随慢性乙型肝炎患者肝纤维化病理等级升高而降低，提示肝纤维化程度越严重，患者血清中PCPE-1水平越低，检测慢性乙型肝炎患者血清中PCPE-1水平可有助于肝纤维化程度的判断。

表2 血清YKL-40、PCPE-1联合检测与APRI、FIB-4诊断显著纤维化、进展期纤维化及早期肝硬化的效能

本次研究结果显示慢性乙型肝炎患者血清YKL-40水平与肝纤维化程度评分呈正相关，血清PCPE-1水平与肝纤维化程度评分呈负相关，进一步证明YKL-40、PCPE-1在慢性乙型肝炎患者肝纤维化程度判断中的价值。通过ROC曲线评价YKL-40、PCPE-1诊断显著纤维化、进展期纤维化及早期肝硬化的价值，我们发现血清YKL-40、PCPE-1诊断慢性乙型肝炎患者显著纤维化、进展期纤维化及早期肝硬化的效能均较高，两者诊断效能比较，差异均不具统计学差异。以上结果进一步说明血清YKL-40、PCPE-1水平可有效评估慢性乙型肝炎患者肝纤维化程度。目前，APRI、FIB-4及S指数等诊断肝纤维化的模型已经过大样本研究证实，其在肝纤维化程度的判断中有一定价值[9]。本研究通过比较YKL-40、PCPE-1联合诊断模型与APRI、FIB-4诊断显著纤维化、进展期纤维化及早期肝硬化的效能，以证实YKL-40、PCPE-1联合诊断模型在肝纤维化程度评价中的价值，结果发现血清YKL-40、PCPE-1联合检测和FIB-4诊断显著纤维化的效能比较，差异不具统计学意义；但二者诊断显著纤维化的效能均高于APRI，差异均有统计学意义。血清YKL-40、PCPE-1联合检测诊断进展期纤维化的效能高于APRI、FIB-4，差异有统计学意义。血清YKL-40、PCPE-1联合检测与APRI、FIB-4诊断早期肝硬化的效能比较，差异均不具统计学意义。上述实验结果证实血清YKL-40、PCPE-1可有效评估肝纤维化程度。

综上所述，YKL-40、PCPE-1是慢性乙型肝炎患者肝纤维化程度判断的有效生物标志物，其诊断肝纤维化的效能优于APRI和FIB-4。