漳州市部分种猪场伪狂犬病gE抗体血清学调查

王艺娟

（福建省漳州市动物疫病预防控制中心，福建 漳州 363000）

猪伪狂犬病是由猪伪狂犬病病毒（Pseudorabies virus,PRV）引起的猪急性高度接触性传染病。猪是伪狂犬病病毒的贮存宿主，病猪、带毒猪以及带毒鼠类为本病重要传染源。该病呈暴发性流行，可引起妊娠母猪流产、死胎；公猪不育，表现出睾丸肿胀、萎缩，丧失种用能力；肥育猪呼吸困难、生长缓慢；新生仔猪出现拉稀、神经症状和大量死亡等，这是危害全球养猪业的重大传染病之一[1]。伪狂犬病病毒主要经口鼻接触、空气飞沫、精液等途径传播，猪既是感染宿主，又是病毒的长期贮存和排出者[2]。近几年笔者发现猪场多发伪狂犬病，出现死胎或仔猪突然体温升高，不食，间或有呕吐或腹泻，精神高度沉郁；部分病猪张口伸舌，运动失调，两前肢张开或倒地抽搐；母猪配不上种，返情率高，甚至有反复配种数次都屡配不上的情况。目前最常用的检测方法是运用ELISA检测gE抗体区分野毒和疫苗毒，这给猪场伪狂犬病的控制与净化带来便利条件[3]。另外PCR方法也是一种敏感快速的实验室检测方法。本次血清学调查主要是通过对2017年漳州市部分种猪场采用伪狂犬病gE-ELISA抗体检测，了解我市部分种猪场伪狂犬病带毒情况，调查结果表明，我市部分种猪场仍存在伪狂犬病病毒感染。伪狂犬病gE抗体血清学调查，是为今后制定科学的伪狂犬病免疫程序和净化方案作参考。1 材料与方法

1.1 被检血清

2017年开始对漳州市11个县（市、区）种猪场进行摸底调查，分阶段采血检测，首先随机采血26个种猪场种猪，每场抽样数为30～70份不等，共抽检806份。

1.2 检测试剂盒

猪伪狂犬病gE抗体ELISA检测试剂盒购自IDEXX公司。

1.3 检测方法

试验操作及结果判定，参照试剂盒说明书操作进行。具体方法如下：用样品稀释液将被检样品稀释2倍，按要求加入阴阳性对照后，在其余的孔内分别加入100 μL已稀释好的被检样品→室温下孵育1 h或2～7℃孵育过夜→用300 μL洗涤液洗涤板孔，重复3～5次→每孔加入100 μL辣根过氧化物酶标记抗PRV gpI抗体→室温下孵育20 min。用300 μL洗涤液洗涤板孔，重复3～5次→每孔加入100 μL TMB底物液→室温下孵育15 min→每孔加入50 μL终止液→酶标仪读数OD650nm→结果判定S/N值≤0.60，样品应判定为PRV gE抗体阳性。

2 结果

根据gE-ELISA检测结果显示，被检猪血清806份，gE阳性抗体127份，阳性率为15.76%，阳性样品主要集中在4家种猪场，其余22家种猪场未检出阳性抗体。

表1 种猪场的猪伪狂犬病检测结果

3 分析与讨论

（1）通过本次部分种猪场伪狂犬病gE抗体抽样检测情况调查，伪狂犬病野毒感染平均阳性率为15.76%，阳性场主要集中在龙海市和云霄县，特别是龙海市种猪场感染率较高，说明我市部分种猪场仍存在猪场伪狂犬病病毒感染的情况，不同种猪场存在不同感染率，这可能与猪场的饲养环境、管理水平、免疫情况、猪群个体差异等因素相关，对于高感染率的猪场，及时分析原因，制定科学的免疫程序和定期监测，不断清除野毒感染猪，逐步净化猪群。这给我市疫病净化项目开展和推进提供了参考。

（2）本次调查种猪场猪伪狂犬病病毒的平均感染率为15.76%，比陈如敬等报道2009年福建部分地区规模化猪场的野毒抗体阳性率23.56%低[4]，比程晶等调查2006—2008年规模化猪场阳性率分别为39.64%、19.12%、17.93%低[5]。但比国内其他省份报道[6-9]，江西部分种猪场阳性率为13.1%、山西省部分种猪场阳性率为9.12%、广西部分种猪场检测的阳性率为2.7%等均高，这表明我市猪伪狂犬病部分猪场的感染情况仍不容乐观。要引起高度重视，消除隐患，减少猪场因感染伪狂犬病引起母猪流产、死胎、木乃伊胎以及仔猪大量发病死亡造成经济损失。因此对阳性猪场应全面的定期监测并及时清除野毒感染猪，使猪群逐步得到净化。

（3）本次调查种猪场猪伪狂犬病病毒的感染情况反映的是部分种猪场部分种猪的感染，具体猪场的免疫程序和净化方案应视猪场全场的感染情况而定。龙海市和云霄县伪狂犬病感染率较高，这可能与该地区生猪饲养密度大，猪场防控措施和免疫水平较薄弱有关。有部分种猪场抽检的结果阳性数为零，这与猪场生产水平提高，免疫程序优化和平时淘汰健康状况差的母猪有关；但也可能与采血数量相关，种猪的采血数为30～70份不等，没有种猪采血全覆盖。有研究和实践表明，种猪群的更新淘汰和gE缺失苗的使用能有效降低猪群中gE抗体的阳性率[3]。因此可采取制定相应的免疫和一系列生物安全措施控制和净化猪伪狂犬病，达到疫病净化的有效目的。