蒲公英水提物对断奶仔猪腹泻率及血清炎性因子的影响

王 留，刘秀玲，王向国

（商丘职业技术学院，河南 商丘 476100）

断奶仔猪腹泻是造成仔猪死亡的主要原因，仔猪断奶前后腹泻率高达40%～50%，死亡率20%[1-2]。断奶仔猪腹泻与断奶应激、细菌与病毒感染等引起的肠道炎症和肠道屏障功能损伤直接相关。肠道炎症的分子细胞学特征是肠道细胞分泌炎性细胞因子，参与炎症反应过程。因此，通过调节肠道炎症的反应过程可以控制仔猪的腹泻。近年来，中草药提取物替代抗生素应用于动物饲养以缓解肠道应激和感染引发的肠道炎症逐渐成为研究的热点。蒲公英是清热解毒类中草药，含有总黄酮、绿原酸、咖啡酸等多种活性成分，具有抗菌消炎、抗应激、免疫调节等多种生物学效应[3-5]。本试验在断奶仔猪饮水中分别添加3、6 g/L蒲公英水提物，通过测定断奶仔猪的临床腹泻率和血清中白细胞介素-8（IL-8）、白细胞介素-10（IL-10）、白细胞介素-22（IL-22）、α肿瘤坏死因子（TNF-α）含量，评价蒲公英水提物对断奶仔猪腹泻和血清炎性因子的影响，为蒲公英水提物在养猪生产中应用提供参考。

1 材料与方法

1.1 试验材料

白细胞介素-4（IL-4）、白细胞介素-8、白细胞介素-22、α肿瘤坏死因子酶联免疫吸附试验（ELISA）检测试剂盒，购于上海研拓生物科技有限公司。蒲公英水提物，商丘职业技术学院动物药理实验室制备，详见参考文献[6]。

1.2 试验设计与处理

将健康、体重相近的35日龄三元杂种仔猪30头随机分成3组，每组10头，各组均饲喂基础饲粮。1、2组为试验组，试验期间仔猪饮水中分别添加终浓度为3、6 g/L蒲公英水提物，自由饮水；3组为空白对照组，仔猪正常饮水。试验期35 d。试验于2018年7月10日至8月14日在商丘宏鑫养猪场进行，断奶仔猪采用高架保育床饲养，按该场年度保健计划与免疫程序进行保健与免疫。

1.3 样品采集与处理

试验结束时，用不含抗凝剂的真空采血管每头猪耳静脉采血5 mL，室温静置3 h自然凝固，3 000 r/min离心5 min分离血清，-20℃冻存，用于血清炎性因子含量的测定。

1.4 指标检测

1.4.1 仔猪腹泻率的测定 在试验期内，每天观察仔猪粪便，对粪便进行评分。0分：粪便正常；1分：软粪；2分：中度腹泻；3分：重度腹泻[7]。根据评分结果计算试验期内仔猪腹泻率。

腹泻率（%）=试验期内每组仔猪腹泻头次/（试验天数×每组仔猪头数）×100%

1.4.2 血清炎性因子检测 血清IL-8、IL-10、IL-22、TNF-α采用ELISA检测试剂盒测定，操作过程严格按照试剂盒说明书进行。

1.5 试验数据处理

试验采用SPSS 20.0统计分析软件进行单因素方差分析，用LSD法进行多重比较，试验数据用平均值±标准差表示，以P＜0.05作为差异显著性判定标准。

2 结果

2.1 蒲公英水提物对断奶仔猪腹泻率的影响

断奶仔猪腹泻率检测结果见表1，试验显示，饮水中添加蒲公英水提物的断奶仔猪试验期间的腹泻率比空白对照组呈整体下降趋势。试验1组仔猪腹泻率比空白对照组降低0.66个百分点（P＞0.05），试验2组仔猪腹泻率比空白对照组降低3.37个百分点（P＜0.05）。

表1 蒲公英水提物对断奶仔猪腹泻率和血清炎性因子的影响

2.2 蒲公英水提物对断奶仔猪血清炎性因子的影响

试验表明，饮水中添加蒲公英水提物能够相对提高断奶仔猪血清中抗炎性细胞因子IL-10的水平和降低断奶仔猪血清中促炎性细胞因子IL-8、IL-22、TNF-α的水平。试验1、2组仔猪血清中IL-8的含量整体呈下降趋势，与空白对照组相比差异均不显著（P＞0.05）；试验 1、2 组仔猪血清中 IL-22、TNF-α的含量与空白对照组相比均显著降低（P＜0.05）。

3 讨论与分析

3.1 蒲公英水提物对断奶仔猪腹泻率的影响

断奶仔猪腹泻是养猪生产中非常普遍的疾病，导致断奶仔猪腹泻的病因比较复杂，既有饲养管理方面的因素，也有病原微生物感染的原因。现代养猪生产中普遍采用早期断奶技术，使仔猪的断奶日龄从70日龄提前到35日龄左右，极易引发断奶仔猪应激综合征，造成肠道应激损伤和肠道炎症，从而引起断奶仔猪消化功能紊乱，出现腹泻[8]。产肠毒素性大肠杆菌、魏氏梭菌、猪痢疾密螺旋体、猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒、轮状病毒等病原微生物的感染也是引发断奶仔猪腹泻的原因之一，这些病原微生物感染仔猪后寄生于肠道黏膜细胞内，损伤肠道黏膜，破坏肠胃结构的完整性和肠道黏膜的先天性屏障机能，造成消化和吸收功能的紊乱，最终引发腹泻。

通过在断奶仔猪饲料或饮水中添加药物以降低仔猪的断奶应激和控制肠道病原体的炎性损伤，降低断奶仔猪的肠道炎症反应过程，从而降低断奶仔猪的临床腹泻率。平伟强等试验显示在断奶仔猪饲粮中添加0.3%丙氨酰-谷氨酰胺和0.2%甘露寡糖能显著抑制断奶仔猪腹泻的发生[9]。袁卫东研究表明在断奶仔猪饲粮中添加1%～2%的复方中药制剂能显著降低断奶仔猪的腹泻率[10]。本试验通过对断奶仔猪粪便评分并计算仔猪腹泻率以评价蒲公英水提物对断奶仔猪腹泻的影响，结果显示，与空白对照组相比，饮水中添加6 g/L蒲公英水提物能够显著降低断奶仔猪的腹泻率，说明蒲公英水提物能够调节断奶仔猪的肠道功能状态，降低肠道应激反应，保护肠道健康。

3.2 蒲公英水提物对断奶仔猪血清炎性因子的影响

断奶仔猪在断奶应激和肠道病原微生物感染的双重作用下，造成肠道炎症损伤和肠道屏障机能的破坏，引起消化紊乱、腹泻等一系列的临床表现。肠道细胞分泌炎性细胞因子参与炎症反应过程是肠道炎症的分子细胞学特征[8]。IL-1β、IL-8、IL-22、TNF-α等是促炎性细胞因子，参与炎症反应的过程，促进和调控急性炎症的发生发展；IL-4、IL-10等是抗炎性细胞因子，抑制炎性细胞因子和趋化因子的产生，通过负反馈调节，拮抗炎性介质，发挥下调炎症反应的作用。通过检测血清和肠道组织内炎性细胞因子水平的变化可以反映出肠道炎症的变化状况。张邑帆等采用经口灌服产肠毒素大肠杆菌K88菌液的方法人工感染荣昌断奶仔猪，建立断奶仔猪腹泻模型，检测外周血清内炎性细胞因子水平，结果显示IL-1β、IL-4、TNF-α的含量均比健康对照组有所升高，并且TNF-α含量差异极显著[11]。

通过在饲料或饮水中添加中草药能够降低断奶仔猪的肠道炎症反应过程，并且能够在血清炎性细胞因子水平上有所反映。赖涛等研究发现，补饲发酵芦笋下脚料的母猪所产仔猪在断奶时血清IL-6、TNF-α含量显著低于对照组[12]。本试验通过检测断奶仔猪血清中 IL-8、IL-10、IL-22、TNF-α 等炎性因子的水平以评价蒲公英水提物对断奶仔猪肠道炎症的影响，结果显示，与空白对照组相比，饮水中添加6 g/L蒲公英水提物能够显著提高血清中抗炎性细胞因子IL-10的水平和降低血清内促炎性细胞因子IL-8、IL-22、TNF-α的水平，说明蒲公英水提物能够调控断奶仔猪肠道炎症反应的过程，减轻肠道炎性损伤。