粪肠球菌和屎肠球菌的临床分布及耐药性比较

程 娟 刘 周 姚 杰 陈礼文 周 强 管世鹤

肠球菌是一种寄居在人和动物肠道内、女性生殖道的革兰阳性球菌，目前已成为导致医院获得性感染的最主要条件致病菌之一。其可引起泌尿道感染、伤口感染、腹膜炎、心内膜炎等多脏器感染，病死率极高。特别是近年来耐万古霉素肠球菌（VRE）以及耐利奈唑胺菌株等多重耐药菌株的出现加重了临床抗感染治疗的难度，使得肠球菌的耐药性及耐药基因受到广泛关注[1]。因此了解肠球菌的耐药现状对指导临床合理用药有重要意义。由于肠球菌的分离率以屎肠球菌和粪肠球菌为主,为此现就我院2015年6月-2017年12月所分离的屎肠球菌和粪肠球菌的分布特点和耐药性进行比较，报道如下：

1 材料与方法

1.1 菌株来源 收集本院2015年6月-2017年12月分离鉴定的粪肠球菌351株和屎肠球菌294株（剔除同一患者相同部位菌株）。其中中段尿培养细菌数≥105CFU/mL的肠球菌作为尿路感染的病原菌进行分离鉴定。质控菌株为粪肠球菌ATCC29212和金黄色葡萄球菌ATCC25923，均购自卫生部临检中心。

1.2 仪器与试剂 VITEK2 Compact全自动微生物分析仪、GP阳性细菌鉴定卡、AST-GP67药敏卡由法国生物梅里埃公司生产。替考拉宁药敏纸片及M-H培养基为英国Oxoid公司生产。

1.3 方法 标本接种培养分离按照《全国临床检验操作规程（第4版）》操作，鉴定使用VITEK2 Compact全自动微生物分析仪，药敏试验用自动化仪器法或纸片扩散法进行检测。药敏试验结果参照2016CLSI标准进行判断，为方便统计，耐药=耐药+中介。

1.4 统计学方法 粪肠球菌和屎肠球菌的检出率在不同标本、不同科室的分布，以及两种细菌的药敏结果均采用WHONET 5.6软件分析。两种细菌耐药率的比较用SPSS 19.0软件进行χ2检验，P

＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 粪肠球菌和屎肠球菌的临床分布 临床分离的粪肠球菌主要来源于尿液（58.1%）、分泌物（10.8%）、脓液（9.7%）；屎肠球菌主要来源于尿液（50.0%）、血液（10.9%）、分泌物（10.2%）。见表1。

表1 我院2015年6月-2017年12月粪肠球菌和屎肠球菌菌种的主要来源及构成

2.2 粪肠球菌和屎肠球菌的科室分布 粪肠球菌标本来源以泌尿外科、肾脏内科、普外科为主，分别占17.1%、9.7%和8.3%。屎肠球菌标本来源以ICU、泌尿外科、肾脏内科为主，分别占17.0%、13.3%和12.9%。

2.3 粪肠球菌和屎肠球菌的药敏结果 351株粪肠球菌和294株屎肠球菌对抗菌药物表现出不同程度的耐药，总体屎肠球菌耐药性比粪肠球菌高。粪肠球菌和屎肠球菌对青霉素、氨苄西林、克林霉素、环丙沙星、左氧氟沙星、呋喃妥因、莫西沙星、红霉素、高浓度庆大霉素、高浓度链霉素的耐药率有统计学差异（P＜0.05）。两者均已发现利奈唑胺耐药菌，粪肠球菌、屎肠球菌对利奈唑胺的耐药率分别为2.6%、2.0%。未发现对万古霉素、替考拉宁耐药的菌株。具体药敏见表2。

表2 我院2015年6月-2017年12月粪肠球菌和屎肠球菌的药敏结果

3 讨 论

近年来由于广谱抗生素和免疫抑制剂使用，侵入性操作的增多，肠球菌属的临床感染数量不断增加，已成为医院感染中仅次于金黄色葡萄球菌，位列第二的革兰阳性球菌。肠球菌因细胞壁厚，对有些抗菌药物天然耐药，且容易获得性耐药，耐药问题日趋严峻[2]。其中屎肠球菌和粪肠球菌在肠球菌中检出率最高，且与疾病发生最为紧密。

本次研究表明肠球菌标本分布以尿液为主，与以往的报道一致[3]。考虑与患者留置导尿管，进行过尿道手术，尿路结构异常有关。因此临床应尽量缩短使用导尿管的时间。粪肠球菌和屎肠球菌科室分布不同，屎肠球菌以ICU检出率最高，考虑与ICU患者长期大量使用广谱抗菌药物，免疫力低下、合并多种基础疾病，且有治疗性侵入操作有关[4]。粪肠球菌在泌尿外科检出率最高，考虑与尿道手术和组织解剖结构有关。

本研究显示本院2015年6月-2017年12月粪肠球菌共351株，屎肠球菌共294株。与魏绪廷等[5]报道的在临床标本中分离的最常见的肠球菌是粪肠球菌，其次是屎肠球菌一致。本次研究结果显示粪肠球菌和屎肠球菌耐药性差异显著，屎肠球菌对青霉素、氨苄西林、环丙沙星、克林霉素、左氧氟沙星、呋喃妥因、莫西沙星、红霉素、高浓度庆大霉素、高浓度链霉素耐药性明显高于粪肠球菌，屎肠球菌耐药性比粪肠球菌严重，表现为多重耐药，与姚杰等[6]报道一致。提示临床应在明确细菌种类后选择治疗方案。肠球菌对抗菌药物耐药的机制多而复杂。屎肠球菌的耐药率大于粪肠球菌，考虑与屎肠球菌基因组具有可塑性，获得IS元素基因有关[7]。本研究结果还显示，粪肠球菌和屎肠球菌对克林霉素、红霉素耐药率较高，表明这些药物已不适用于肠球菌感染的治疗，与张波等[8]报道一致。粪肠球菌对青霉素的耐药率是13.7%，对氨苄西林的耐药率是8.3%，提示粪肠球菌治疗首选药物仍是作用于细胞壁的药物，如青霉素和氨苄西林。本次研究未报道对万古霉素和替考拉宁耐药的菌株，但检出9例耐利奈唑胺粪肠球菌和6例耐利奈唑胺屎肠球菌，耐药率分别为2.6%和2.0%，与中国CHINET监测结果[9]相比，我院利奈唑胺耐药率较高，需引起足够重视。由于肠球菌对利奈唑胺耐药机制复杂，还需对耐利奈唑胺肠球菌的耐药机制进行深入研究,从基因角度探索减少耐药菌株的产生和传播的策略。

本研究提示目前治疗粪肠球菌感染的药物仍是作用于细胞壁的药物，万古霉素、替考拉宁以及利奈唑胺在临床治疗多重耐药屎肠球菌仍是首选药物。但由于粪肠球菌和屎肠球菌的耐药形势日益严峻，且二者耐药性存在显著差异，因此对于感染患者应及时做细菌培养和药敏试验，临床应结合药敏结果制定个体化抗感染方案，合理使用抗菌药物，严格把控万古霉素等的使用指征，从而减少医院肠球菌耐药菌株的产生。