健康受试者单剂量口服苯磺酸氨氯地平叶酸片和苯磺酸氨氯地平的药代动力学研究

韩 冰

（沈阳市第二中医医院，辽宁 沈阳 110015）

心血管疾病中独立危险因素中包括血浆同型半胱氨酸水平上升、高血压等[1]。苯磺酸氨氯地平是临床上常用的一种高血压治疗药物，属于长效二氢吡啶类钙通道阻滞剂。叶酸是一种维生素B复合体，对生物蛋白质、氨基酸、核酸的代谢意义重大[2]。苯磺酸氨氯地平叶酸片为叶酸与苯磺酸氨氯地平的复合物，本研究围绕苯磺酸氨氯地平叶酸片和苯磺酸氨氯地平的药代动力学展开研究，旨在为临床用药提供指导，具体报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料：随机选取20例健康男性志愿者，年龄（21.2±1.5）岁，体质量（64.3±5.9）kg，身高（176.2±5.8）cm，BMI（22.0±1.8）kg/m2。体检报告显示志愿者肝肾功能、血尿常规、心电图、常规胸片检查均无异常，无严重的重要器官功能损害疾病，无毒品史，无酗酒、吸烟等不良嗜好，对本次研究所用药物无过敏史。参与本次研究前两周不曾服用过可能对本次实验结果造成影响的药物，前3个月未献血、未参与过其他临床药品研究试验。志愿者对本次实验内容知晓并愿意配合，并签署相关协议。

1.2 药物与仪器：本研究所用的药物如下：①苯磺酸氨氯地平叶酸片：5.0毫克/片，产自广东彼迪药业有限公司，国药准字为H20 057316；②苯磺酸氨氯地平片：5.0毫克/片，产自辉瑞制药有限公司，国药准字为H10 950224；③苯磺酸氨氯地平标准药物：有效成分占99.4%，由中国食品药品检定研究所提供，批号为100374-200903。本研究所用的仪器如下：①API 4000超高效液相色谱仪，产自美国AB Sciex；②超高效液相色谱系统1100，产自美国Agilent。

1.3 方法：以单剂量、双周期、交叉对照为原则进行研究设计。30名志愿者随机均分为两组，交叉服用苯磺酸氨氯地平叶酸片与苯磺酸氨氯地平片，两次服药之间的间隔至少为14 d[3]。试验开始前1 d，志愿者于晚饭后入住我院Ⅰ期病房。禁食，时间超过12 h，以200ml温开水服用苯磺酸氨氯地平叶酸片与苯磺酸氨氯地平片，服用后2 h禁水禁食，4 h给予标准的统一午餐。对志愿者的静脉血进行抽取，时间为给药前及给药后的1、2、4、6、8、10、12、24、36、48、72、96、120、144 h，每次4 mL，采集到的血液放置于试管内，内含肝素，离心10 min，离心速度为3000 r/min，随后置于-20 ℃的冰箱内[4]。因氨氯地平需对光有敏感性，因此在整个操作过程中需避光处理。志愿者在服用药物后，应在病房内留置观察15 h，密切监测志愿者的血压，记录是否有头痛、面红、乏力、腹痛、心悸、嗜睡、恶心、眩晕、踝部水肿等症状。

1.4 测定方法

1.4.1 色谱条件：①色谱柱：C18（5 μm，4.6 mm×100 mm），流动相为甲醇-0.5%甲酸=60∶40，流速为1.0 mL/min；②柱温：30 ℃；③进样品量：30 μL。

1.4.2 质谱条件：①电喷雾离子化源：为正离子模式，温度500 ℃，喷射电压为5000 V，气帘气体N2压强为103 kPa，源内气体GS1压强为380 kPa；②苯海拉明与氨氯地平的质荷比分别为m/z256.3→167.1、m/z409.2→238.3，DP即解簇电压分别为50 V、35 V，CE即碰撞能量分别为25eV、15eV。

1.4.3 血浆样品处理方法：200 μL的血浆样品提取物中混合100 μL的含内标溶液，其中甲醇-水=1∶1，剂量为100 μL，浓度为1 mol/L的碳酸钠溶液剂量为100 μL，混合提取试剂即乙醚-二氯甲烷=3∶2的剂量为3.5 mL，以涡流的形式将上述试剂混合，离心速度为3500 r/min，于氮气流下以40 ℃的温度吹干，残余的药剂中加入150 μL甲醇-水溶液（1∶1），以涡流的形式将混合30 s，最后提取30 μL试剂分析[5]。

1.5 评价指标

1.5.1 方法评价：①专属性：本研究的条件可使内标与氨氯地平的保留时间为2.45 min、2.94 min，空白血浆内的内源性物质对本研究测定的实验结果不产生干扰。②标准曲线及最低定量下限：于空白血浆中加入适量的氨氯地平标准溶液，配置成浓度分别为0.05 ng/mL、0.15 ng/mL、0.5 ng/mL、1 ng/mL、3 ng/mL、5 ng/mL的溶液，除了不混入100 μL甲醇-水溶液（1∶1）外，其余操作与血浆样品处理方法相同，测定色谱图[6]。②回收率及精密度评价：配制浓度为0.15 ng/mL、1 ng/mL、3 ng/mL的质控溶液，与血浆样品处理方法相同，进行测定。每种浓度选6次样本，评估绝对提取回收率、日间精密度、日内精密度，连续测定。③稳定性评价：将高、中、低浓度的氨氯地平血浆样本于-20 ℃的冰箱内放置90 d后，于室温放置4 h、-20 ℃下反复冻融3次，样本均稳定。④安全性评价：对志愿者基本生命体征、实验室检查、心电图、体格检查进行监测。

1.6 统计学方法[7]：以实测的数值表示tmax、Cmax；以梯形法算出AUC0-∞=AUC0-∞+Ctn/λz，其中Ctn代表最后血药浓度，λz代表末端消除速度常数。用DAS比较药物的药代动力学参数，包括苯磺酸氨氯地平叶酸片、苯磺酸氨氯地平片及苯磺酸氨氯地平标准药物，参数有AUC0-∞、AUC0-t、Cmax，对数转换后行t检验及方差分析，非参数检验测定tmax。

2 结果

2.1 氨氯地平的回收率及精密度结果：以质控药物样品浓度为标准曲线，对质控药物行方差分析，计算准确度与精密度，见表1。

表1 氨氯地平的回收率及精密度结果（）

表1 氨氯地平的回收率及精密度结果（）

2.2 两种药物药代动力学参数结果：30位健康志愿者单剂量口服苯磺酸氨氯地平叶酸片与苯磺酸氨氯地平片后，血浆内氨氯地平的水平参数均无统计学差异（P＞0.05），具体数值见表2。

表2 两种药物药代动力学参数结果（）

表2 两种药物药代动力学参数结果（）

3 讨论

受试药品服用后7～8 h内达到峰值浓度，药物的半衰期为30～40 h，说明受试药物的吸收速度较慢，作用时间较久，每日只需服用一次，可在一定程度上提高临床患者使用的依从性。本研究结果显示，苯磺酸氨氯地平叶酸片和苯磺酸氨氯地平片的药代动力学具有等效性，无显著差异性。说明两种药物之间生物等效性相同，可为临床应用提供理论依据。