抗核抗体谱联合唇腺活检对干燥综合征的诊断价值

尹春琼 王宁 白志瑶 董静 刘永红 刘玲丽 涂燚杰

干燥综合征（sjogren syndrome，SS）是一种以淋巴细胞灶性浸润和外分泌腺功能损伤为特征的病因未明的慢性炎症性自身免疫性疾病，多发于40～60岁年龄段人群，发病率为0.5%～1.0%，居风湿科自身免疫系统疾病第2位[1]，女性发病率高于男性。SS的主要临床表现为口干、眼干，病情严重时可导致全身多器官及多系统受累[2]。2002年SS国际分类（诊断）标准和2012年SS美国风湿病学会分类（诊断）标准中，将抗SSA和抗SSB血清学阳性作为诊断标准[3-4]。有研究表明，抗SSA/SSB阳性的SS患者超过50%[5]，抗SSA和抗SSB阳性率分别为33%～74%和23%～52%[6]，且单独表现抗SSA阳性患者比单独表现抗SSB阳性患者更多见，但SS患者抗SSB阳性可提示临床病情更严重。1968年由Chisholm第一次提出以唇部小唾液腺活检（简称唇腺活检）替代大涎腺活检并广泛用于诊断SS，具有较高临床诊断价值。分析本院门诊及住院SS患者的抗核抗体（antinuclear antibody，ANA）、抗SS抗体（包括抗SSA和抗SSB）、抗Ro-52联合唇腺活检病理检测结果，旨在为临床提供更有意义的检验组合，减少漏诊和误诊，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2015年9月—2019年9月本院76例门诊或住院SS患者，其中男性12例，女性54例；平均年龄（46.0±9.0）岁；所有患者诊断均符合2012年美国风湿病学会SS的分类标准。

1.2 仪器与试剂 ANA检测试剂盒和ANA谱（ANAs）免疫球蛋白G（immonoglobulin G，IgG）检测试剂盒（欧蒙印迹法）均购自德国欧蒙公司，免疫印迹仪为德国欧蒙公司EUROBlot-MasterⅡ，膜条扫描仪为日本佳能扫描仪 LIDE 120，荧光显微镜为德国欧蒙公司Eurostar Ⅲ plus。

1.3 检测方法

1.3.1 标本采集 用真空负压采血管收集SS患者清晨空腹不抗凝肘静脉血约3～5 mL，以3 500 r/min（离心半径10 cm）离心15 min，立即分离血清进行ANA和ANAs检测，并对所有受检者进行唇腺活检。操作过程严格按试剂盒说明书及标准操作规程执行。

1.3.2 ANA检测 ANA检测采用间接免疫荧光法（indirect immunofluorescence，IIF），血清抗体稀释度分别为 1：100、1：320、1：1 000、1：3 200，抗体效价≥1：100即ANA阳性。

1.3.3 ANAs检测 ANAs检测采用线性免疫印迹法（line immuno assay，LIA），患者膜条与标准谱膜条显色位置对比，相应抗体位置阳性，即视为膜条阳性。

1.3.4 唇腺活检 由临床医生对所有SS患者进行唇部小唾液腺活检，病理科医生出具报告。所有实验室操作人员均曾接受为期半年的专业进修培训并具有主管检验技师级以上职称。经唇腺活检病理检测确诊标准：唇腺活检提示局灶性淋巴细胞性涎腺（focallymphocyticsialadenitis，FLS）的淋巴细胞灶≥1个（4 mm2组织内至少50个淋巴细胞聚集于唇腺间质者为1个灶）为阳性标准，即灶性指数（focus score，FS）≥1。

1.4 统计学方法 采用SPSS 19.0软件进行数据分析，计数资料以率表示，采用χ2检验。

2 结果

2.1 SS各指标检测结果 76例SS患者血清样本中，ANA阳性率最高，唇腺活检次之，抗SSA/SSB阳性率最低。见表1。

表1 SS患者血清样本各项临床评价指标检测结果

2.2 自身抗体联合唇腺活检诊断SS结果 ANA+抗SSA、ANA+抗SSB、ANA+抗Ro-52阳性率均为100.0%，抗SSA+抗SSB阳性率均较好（97.3%），ANA+唇腺活检的阳性率最低（80.3%）。见表2。

表2 ANA、ANAs联合唇腺活检诊断SS的阳性率

3 讨论

我国SS发病率为0.3%～0.7%，其中老年人群发病率高达3%～4%[2]。SS等慢性自身免疫性疾病的女性发病人数明显高于男性，比例约为7：1，发病年龄集中在40～60岁，且随年龄增加发病率增高。唇腺活检目前已被广泛应用于SS诊断，尤其是改良式唇腺活检术，具有创伤小、无需缝合拆线和伤口愈合快等优点，患者依从性较好，易于接受，且操作简便，极少出现并发症。有研究表明，ANA在多种结缔组织疾病中均有表达[7]，且阳性率均较高，但在许多健康老年人群中也能检测到低效价ANA，且特异性较差。因此，ANA可作为自身免疫性疾病的初筛指标，但不能作为SS的主要诊断指标，应进一步行ANAs检测和唇腺活检病理检测确诊。

本研究血清ANA、ANAs和唇腺活检结果显示，76例SS患者的ANA阳性率为90.7%；ANAs以抗SSA、抗SSB和抗Ro-52检出阳性为主，阳性率分别为76.31%、71.05%和68.42%；唇腺活检阳性率占84.21%。目前临床诊断SS最常用的自身抗体是抗SSA和抗SSB[8]，其中抗SSB诊断SS特异性更高[9]，但上述两种抗体均存在局限性，抗SSB对SS的诊断阳性率相对较低，而抗SSA在系统性红斑狼疮等许多其他自身免疫性疾病中阳性率亦较高，易造成SS的漏诊和误诊[10]。抗Ro-52在许多其他自身免疫性疾病中阳性率较高，故抗Ro-52不能作为SS的特异性诊断指标。

本组患者各项自身抗体联合唇腺活检结果表明，抗SSA联合抗SSB的阳性率为97.3%，临床诊断价值较高；而ANA联合ANAs的诊断阳性率高，ANA联合唇腺活检的诊断阳性率为80.3%。由此可见，ANA联合ANAs、唇腺活检可作为自身免疫性疾病初筛的较好指标，且阳性检出率较高。而抗SSA联合抗SSB双阳性对临床诊断原发性SS具有很好的诊断价值。唇腺活检手术并发症较小，多为短期可消失的并发症，包括淤青、疼痛、出血、感染等，长期并发症为唇部感觉异常，发生率约为0%～6%[11-12]。唇腺活检虽然为有创检查，但可行性好，侵袭性较小，敏感性和特异性均较高，且被较为广泛的应用于SS患者临床诊断中，与血清学及眼部检查等指标存在较好的相关性。尤其针对年龄较小、抗SSA/SSB阴性以及长期伴口干、眼干等症状的疑似SS患者，唇腺活检可作为诊断SS的金标准。综上所述，在SS患者临床诊断中采用联合ANA、抗SSA、抗SSB及抗Ro-52以及唇腺活检病理检测能够提高SS阳性检出率及诊断的特异性和准确率，避免单项检查所致的误诊、漏诊延误患者治疗时机，对SS的筛查和诊断治疗有重要临床价值，值得临床推广应用。