大飞扬草的三维荧光光谱研究

2019-02-18林玉婷孙宏元左文健

农产品加工 2019年2期

白燕，林玉婷，孙宏元，黎明，左文健

（1.海南热带海洋学院食品科学与工程学院，海南三亚 572022；2.海南热带海洋学院理学院，海南三亚 572022；3.海南热带海洋学院水产与生命学院，海南三亚 572022；4.东海中学，福建泉州 362000）

中药品质控制一直是中药研究的一个热点，指纹图谱基于中药物质群整体作用的认识[1]，从而实现中药的鉴别和评价，进而实现品质控制。三维荧光光谱可以全面反映复杂中药体系的荧光特征[2]，便于区分中药成分的荧光峰和各种散射峰，近年来也得到人们的关注。

大飞扬草是典型的南药资源，具有清热解毒、利湿止痒、通乳的作用[3]，已收录到《中国药典》中。飞扬草的成分[4]主要有黄酮类、丹宁类、三萜类、二萜类、糖苷类及其他。武毅等人[5]对大飞扬草地上部分的化学成分进行研究，发现其化学成分有东莨菪亭、滨蒿内酯、异东莨菪亭、槲皮素、异鼠李素、乔松素、山奈酚、木犀草素和没食子酸。王莉等人[6]研究了飞扬草地上部分70%丙酮提取物的化学成分。黄勇红等人[7]研究了广东12批飞扬草的HPLC色谱指纹图谱，确定有9个共有色谱峰。

利用荧光分光光度计测定了不同采集时间的大飞扬草的整株、叶、茎、根的三维荧光光谱，并结合文献对各荧光峰的归属进行了分析。

1 试验部分

1.1 仪器与试剂

RF-5301PC型荧光分光光度计，1 cm石英比色皿。大飞扬草在海南热带海洋学院校园内采集（时间为11月26日到12月17日，每隔1周采集1次）。试验中所有用水均为超纯水。

1.2 试验方法

准确称取0.100 0 g大飞扬草置于烧杯中，加水煮沸10 min，冷却至室温，过滤2次，转移到100 mL容量瓶中定容。将其稀释到10 mg/dm3备用。荧光光谱发射波长（EM）扫描范围为220～650 nm，激发波长（EX）扫描范围为220～580 nm，间隔5 nm。

2 结果与分析

2.1 大飞扬草三维荧光光谱图

第2周采集的大飞扬草三维荧光光谱见图1。

图1 大飞扬草的三维荧光图谱

所有图中都有明显的瑞利散射峰，见图1（a）中e箭头所示粗黑线，部分图中可以看到二级瑞利散射峰，见图1（a）中f箭头所示。瑞利散射和拉曼散射与溶剂分子有关，由于不是研究的重点，后面将不再赘述。图中类似指纹的等高线图是大飞扬草的荧光成分的荧光图谱[2]。

2.2 峰位置分析

大飞扬草荧光峰位置分布见图2。

图2 大飞扬草荧光峰位置分布

采集时间对大飞扬草的三维荧光光谱有影响，采集时间不同，出现的荧光峰的数目和位置不同。共有峰体现了研究体系的特点，可以用于鉴别。整株有2个共有峰，分别位于λEX/λEM=382 nm/476 nm附近和λEX/λEM=310 nm/433 nm附近；叶有2个共有峰，分别位于λEX/λEM=391 nm/469 nm附近和λEX/λEM=305 nm/435 nm附近；茎无共有峰；根有3个共有峰，分别位于 λEX/λEM=309 nm/380 nm附近，λEX/λEM=250 nm/449 nm附近和λEX/λEM=229 nm/317 nm附近。茎没有共有峰可能是因为茎连接叶和根，既能表现出叶的特征，也能表现出根的特征，因此本身的荧光峰峰位置较分散。

图2中a位置峰位于λEX/λEM=385 nm/466 nm附近。Wang L[8]和王丽等人[9]测得独活和绵头雪莲的主要成分东莨菪亭的荧光光谱，与其对比，可以得出a位置峰应该是东莨菪亭的荧光峰。从图2中看到，整株、叶和茎在a位置有荧光峰，说明大飞扬草整株中的东莨菪亭来源于叶子和茎，在根中没有出现此荧光峰，可能在根中没有东莨菪亭。

图2中b位置的荧光峰位于λEX/λEM=309nm/429nm，c位置茎的荧光峰位于λEX/λEM=239 nm/435 nm附近，与文献[10]中报道的滨蒿内酯的荧光峰较为接近，可能在茎、叶、根中都存在滨蒿内酯。

图2中g位置峰位于λEX/λEM=229 nm/311 nm附近，f位置峰位于λEX/λEM=280 nm/319 nm，可能是酚酸类化合物，与文献中[11]报道的丁香酚的峰位置λEX/λEM=235 nm/315 nm和 λEX/λEM=280 nm/315 nm较为接近，推测在大飞扬草的茎和根中可能含有丁香酚。

根据文献报道，槲皮素[12]、山奈酚[13]和没食子酸[13]本身没有荧光。未找到异鼠李素、乔松素、木犀草素本身的荧光光谱的报道，但是这几种都有作为荧光猝灭剂的报道[14-15]。图2中叶、茎、根在c位置的荧光峰还未找到归属，茎、根在d位置的荧光峰，茎在e位置的荧光峰也未找到归属，还需要进一步的研究。

从图2可以很方便地判断各个荧光组分存在的部位，是在叶中、在茎中，还是在根中，一目了然。因此推荐建设中药的三维荧光光谱数据库时，不但应该给出三维荧光光谱图，同时给出各个药品的荧光峰位置分布图，从而可以更好地利用数据。另外，大部分中药并不是整株入药，因此在研究中就忽视了未入药的部分，而未入药的部分也可能包含重要的信息，各个部位信息的相互印证，可能会使结果更加准确。