三种梅毒血清学检测方法的应用评价

2019-02-10余育春

中外医疗 2019年34期

关键词：梅毒

余育春

[摘要] 目的研究3種梅毒血清学检测方法的应用。方法方便选取该院2016年2月—2019年4月收治的梅毒患者80例作为研究对象，以感染梅毒情况为基点随机分感染组与未感染组，各40例，均采用甲苯胺红不加热血清试验、梅毒螺旋体明胶凝集试验与梅毒螺旋体免疫印迹法，比较两组梅毒抗体阳性情况、3种血清学实验方法的检测效能与实验方法的应用价值。结果感染组抗体阳性率（80.00%、90.00%与97.50%高于未感染组12.50%、2.50%与0.00%;感染组的免疫印迹法阳性率（97.50%）高于甲苯胺红不加热血清试验（80.00%）与梅毒螺旋体明胶凝集试验（90.00%），差异有统计学意义（χ2=6.383，P=0.041）;甲苯胺红不加热血清试验敏感性为80.00%、特异性为90.00%、阳性预测值为88.88%、阴性预测值为81.81%;梅毒螺旋体明胶凝集试验敏感性为87.50%、特异性为97.50%、阳性预测值为97.22%、阴性预测值为88.63%;免疫印迹法敏感性为92.50%、特异性为100.00%、阳性预测值为100.00%、阴性预测值为93.02%，与甲苯胺红不加热血清试验与梅毒螺旋体明胶凝集试验比较，免疫印迹法的敏感性、特异性、阳性预测值与阴性预测值均高，差异有统计学意义（P<0.05）。结论对梅毒患者采用甲苯胺红不加热血清试验、梅毒螺旋体明胶凝集试验与免疫印迹法检测能早期确诊病情，避免发生误诊或漏诊，为后续治疗提供参考，值得借鉴。

[关键词] 梅毒;血清学;甲苯胺红不加热血清试验;梅毒螺旋体免疫印迹法

[中图分类号] R4 [文献标识码] A [文章编号] 1674-0742（2019）12（a）-0184-03

[Abstract] Objective To study the application of three serological tests for syphilis. Methods Eighty patients with syphilis admitted to the hospital from February 2016 to April 2019 were convenient enrolled in the study. The infection was treated with syphilis as the basis for random infection and 40 cases of uninfected group. The test， syphilis spirogel gelatin agglutination test and Treponema pallidum immunoblotting， comparing the serotype antibody positive status of the two groups， the detection efficiency of the three serological test methods and the application value of the experimental method. Results The positive rate of antibody in the infected group （80.00%， 90.00% and 97.50% was higher than 12.50%， 2.50% and 0.00% in the uninfected group; the positive rate of immunoblotting in the infected group （97.50%） was higher than that in the toluidine red non-heated serum test （80.00%） and syphilis spirogel gelatin agglutination test （90.00%），，the difference was statistically significant（χ2=6.383， P=0.041） toluidine red unheated serum test sensitivity is 80.00%， specificity is 90.00%， positive predictive value is 88.88%， negative The predicted value was 81.81%; the sensitivity of the syphilis spirogel gelatin test was 87.50%， the specificity was 97.50%， the positive predictive value was 97.22%， the negative predictive value was 88.63%; the immunoblotting sensitivity was 92.50%， and the specificity was 100.00. %， positive predictive value is 100.00%， negative predictive value is 93.02%， compared with toluidine red unheated serum test and treponema pallidum gelatin agglutination test， the sensitivity， specificity， positive predictive value and negative predictive value of immunoblotting are both High， the difference was statistically significant（P<0.05）.Conclusion Toluidine red unheated serum test， syphilis spirogel gelatin agglutination test and immunoblotting test for syphilis patients can diagnose the disease early and avoid it. Misdiagnosis or missed diagnosis provides reference for follow-up treatment and is worth learning.

[Key words] Syphilis; Serology; Toluidine red unheated serum test; Treponema pallidum immunoblotting

梅毒是临床常见的系统性性传播疾病，主要是由梅毒螺旋体引起的，常见传播途径为性传播，根据疾病类型具体划分成Ⅰ期梅毒、Ⅱ期梅毒、Ⅲ期梅毒、潜伏梅毒与胎传梅毒等，经调查研究[1]显示，该项疾病属于《中华人民共和国传染病防治法》中乙类防治管理病种，其在全世界范围内流行，具有较高发病率，患者黏膜或皮肤中存在梅毒螺旋体，若未患病症者与梅毒患者进行性接触，黏膜或皮肤出现细微破损造成传染，少数患者是由输血途径传播的，后天梅毒是传染源，经无保护或危险性性行为传播疾病，甚至通过输血、衣物污染或亲吻等形式也会传染，感染梅毒螺旋体主要存在于皮损分泌物或血液内部，直接威胁患者的生命健康。随着现代医疗事业发展，临床诊断梅毒患者采用甲苯胺红不加热血清试验、梅毒螺旋体明胶凝集试验与梅毒螺旋体免疫印迹法检测，早期确诊病情，为后续早期开展临床治疗提供重要参考依据，具时效性[2]。为分析3种梅毒血清学检测方法的应用效果，该院方便选择2016年2月—2019年4月收治的梅毒患者80例作为研究对象，报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

方便选取该院收治的梅毒患者80例作为研究对象，感染组有40例，男26例，女14例，年龄1～65岁，平均年龄（47.58±10.24）岁;病程1～7年，平均（4.17±1.28）年;梅毒分期：Ⅰ期13例，Ⅱ期16例，Ⅲ期11例;既往存在梅毒史28例，并未存在梅毒史12例。未感染组有40例，男29例，女11例，年龄3～67岁，平均年龄（47.64±10.36）岁;病程1～8年，平均（4.29±1.17）年;梅毒分期：Ⅰ期15例，Ⅱ期13例，Ⅲ期12例;既往存在梅毒史27例，并未存在梅毒史13例。两组年龄、病程、梅毒分期与既往病史等基线资料，差异无统计学意义（P>0.05），具可比性。①纳入标准：经检查符合梅毒的诊断标准[3];患者表现为湿丘疹、扁平湿疣或硬下疳等情况;自愿参与并对《知情同意书》签字;医院伦理委员会审核同意。②排除标准：恶性肿瘤;严重心脑血管疾病;严重肝肾疾病;凝血功能障碍或免疫系统疾病;精神异常;病例资料不全。

1.2 方法

研究对象均采用甲苯胺红不加热血清试验、梅毒螺旋体明胶凝集试验与梅毒螺旋体免疫印迹法测定患者血清标本中的梅毒螺旋体抗体，实际操作流程如下：采集患者空腹状态下静脉血5 mL，采用低速自动平衡离心机（型号：TDZ5-WS）分离血清[4]。

甲苯胺红不加热血清试验的试剂盒由上海荣盛生物有限公司提供，所用仪器为苏州市东吴医用电子仪器厂生产的数显混匀器（型号：WZR-H6000），将血清按照1：1、1：2、1：4与1：8的比例进行稀释，最终对血清标本内的梅毒螺旋体抗体进行检测[5]。

梅毒螺旋体明胶凝胶试验的试剂盒由日本富士瑞必欧株式会社提供，所用仪器为江苏康健医疗用品有限公司生产的梅毒螺旋微量振荡仪（型号为：KJ-201A型振荡器），检测血清标本内梅毒螺旋体抗体[6]。

梅毒螺旋体免疫印迹法的试剂盒由德国欧蒙试验免疫制品有限公司提供，对最终结果进行观察，若印迹膜上出现两条以上47 000，17 000与14 000的多肽抗原条带，判断最终结果阳性;印迹膜上无显色待或出现90 000，60 000，33 000，3 000，25 000，22 000与45 000，等多肽抗原弱条带，则判断最终结果为阴性[7]。免疫印迹法测定梅毒特异性抗体的重复性：①批内重复性：将强阳性、弱阳性与阴性的血清标本分别检测5次，确保每次检测的多肽抗原条带数一致，确保阴性与阳性结果一致。②批间重复性：5 d内分别检测强阳性、弱阳性与阴性指标，每次检测多肽抗原带数一致，确保阴性与阳性结果相符合[8]。

1.3 疗效评价

①参考《全面临床检验操作规程》[9]对最终结果进行判定，梅毒抗体阳性标准：OD值为S/C.0在1及以上;梅毒抗体阴性标准：OD值为S/C.0在1以下。

②敏感度为真阳性率，特异度为真阴性率。

③阳性预测值=真阳性/真阳性+假阳性。

④阴性预测值=真阴性/真阴性+假阴性。

1.4 统计方法

数据应用SPSS 18.0统计学软件进行分析，计数资料（%）进行χ2检验，计量资料（x±s）进行t检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组梅毒抗体阳性情况

经调查研究显示，感染组抗体阳性率高于未感染组;免疫印迹法阳性率明显高于甲苯胺红不加热血清试验与梅毒螺旋体明胶凝集试验，差异有统计学意义（P<0.05），见表1。

2.2 3种血清学实验方法的检测效能

经该研究发现，甲苯胺红不加热血清试验敏感性为80.00%（32/40）、特异性为90.00%（36/40）、阳性预测值为88.88%（32/36）、阴性预测值为81.81%（36/44）;梅毒螺旋体明胶凝集试验敏感性为87.50%（35/40）、特异性为97.50%（39/40）、阳性预测值为97.22%（35/36）、阴性预测值为88.63%（39/44）;免疫印迹法敏感性为92.50%（37/40）、特异性为100.00%（40/40）、阳性预测值为100.00%（37/37）、阴性预測值为93.02%（40/43），与甲苯胺红不加热血清试验与梅毒螺旋体明胶凝集试验比较，免疫印迹法的敏感性、特异性、阳性预测值与阴性预测值均高，差异有统计学意义（P<0.05），见表2。

3 讨论

梅毒是临床较常见的传染性疾病，致病机制为梅毒螺旋体造成机体引起慢性或系统性性传播，主要的传播途径为性传播，发病率高，早期梅毒患者是传染源，少数患者可能会经亲吻、输血或污染衣物等传染，病情加重会直接威胁生命健康，因此根据病情严重程度，早期采取针对性诊断措施确诊病情具重要意义，确保早期开展治疗流程，预防疾病加重，具时效性与可靠性[10]。

有研究报道[11]，甲苯胺红不加热血清试验、梅毒螺旋体明胶凝集试验与免疫印迹法诊断梅毒患者能提高疾病确诊率，其中甲苯胺红不加热血清试验属于非美都螺旋体抗原血清试验，选择的抗原为较正常心肌的心类脂，重点对机体内反应素进行测定，检测梅毒的阳性指征为测定梅毒螺旋体感染正常心肌的心类脂后相应的螺旋体表面脂质会提出免疫应答，受梅毒螺旋体感染后会出现抗类脂质抗原的抗体，主要在筛查梅毒患者中被广泛应用;梅毒螺旋体明胶凝集试验属于梅毒螺旋体抗原血清试验，选择的抗原为超声裂解的梅毒螺旋体，将血浆或血清中的梅毒螺旋抗体与人工合成的致敏红色明胶颗粒相结合，机体会发生红色凝集反应，便于确诊病情;免疫印迹法是将免疫化学分析技术与高分辨率的凝胶电泳结合检测蛋白质特性与表达，具有敏感度高、特异性强与分析容量大等特征，因此给予梅毒患者上述血清检测能提高疾病确诊率，为后续临床治疗提供重要参考。

在该次研究中，感染组抗体阳性率高于未感染组;免疫印迹法阳性率明显高于甲苯胺红不加热血清试验与梅毒螺旋体明胶凝集试验;甲苯胺红不加热血清试验敏感性为80.00%、特异性为90.00%、阳性预测值为88.88%、阴性预测值为81.81%;梅毒螺旋体明胶凝集试验敏感性为87.50%、特异性为97.50%、阳性预测值为97.22%、阴性预测值为88.63%;免疫印迹法敏感性为92.50%、特异性为100.00%、阳性预测值为100.00%、阴性预测值为93.02%，与甲苯胺红不加热血清试验与梅毒螺旋体明集凝胶试验比较，免疫印迹法的敏感性、特异性、阳性预测值与阴性预测值均高，差异有统计学意义（P<0.05），朱学英[12]研究中指出甲苯胺红不加热血清试验的灵敏度是88.57%，特异度是97.14%;梅毒螺旋体明胶凝集试验的灵敏度是96.53%，特异度是99.29%，说明与该研究报道基本一致。

综上所述，对梅毒患者采用甲苯胺红不加热血清试验、梅毒螺旋体明胶凝集试验与免疫印迹法检测能早期确诊病情，避免发生误诊或漏诊，为后续治疗提供参考，值得借鉴。

[参考文献]

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