分子生物学检验技术在医学检验中的应用进展
2019-01-27田宝莹
田宝莹
(汉中职业技术学院,陕西 汉中723000)
1 引言
分子生物学检验是分子生物学技术在临床检验诊断应用中发展起来的,以疾病为中心、以生物分子标志物为靶标的新一代临床检验诊断技术,可以实现对微量生物样本、微量生物分子及其微小变化的快速检验,成为疾病风险分析和早期诊断的重要手段[1]。
2 分子生物学检验应用的主要技术
①聚合酶链式反应(PCR)是一种在生物体细胞外通过酶促合成特异DNA 片段的方法,又称多聚酶链反应。该技术突破了以往在科学研究和检验诊断中不易获得丰富的样品靶DNA 序列的缺陷。在目前的临床分子生物学中,PCR 技术已广泛应用于寄生虫学、微生物学、肿瘤学、遗传学、免疫学、基因治疗、食品检测、出入境检验检疫等诸多领域[2],并以PCR技术为基础衍生出了其他技术,如PCR-限制性片段长度多态性分析法是检测与特定的酶切位点有关突变的方法;等位基因特异性PCR 技术可以进行基因型鉴定;PCR-单链构象多态性技术可以揭示产物序列内的多态性;实时荧光“定量聚合酶链反应,定量PCR”可以对目的DNA 进行定量,更加准确和方便。
②生物芯片技术代表高通量密集型的技术,主要依据芯片上固定的探针(基因芯片、蛋白质芯片、组织芯片)地不同,能够一次性地对大量的生物分子进行检测。如基因表达谱、突变测定、多态性分析、基因组文库、杂交测序等[3]。在临床诊断、科学研究和流行病学筛选中具有广泛的应用前景。
③分子生物传感器是一种对生物物质敏感并可以将其浓度转换为电信号进行检验的仪器,是以固定化的生物分子作为识别原件与适当的理化换能器以及信号放大器装置构成的一整套分析系统。分子生物传感器可以广泛地应用于人体体液中一些小分子有机物、生物大分子等多种物质的检验检测中。这些项目都为病情的诊断、职业环境的监测提供了可靠的分析数据[4]。
④DNA 测序技术可以为临床疾病的分子诊断提供最精确的判定依据。第一代测序以双脱氧末端终止法为主,缺点是费用高、速度慢。第二代测序以焦磷酸测序、合成测序和芯片测序三大技术平台为代表,使DNA 测序进入了通量高、成本低、规模大的时代。第三代测序以单分子实时测序为主,速度更快[5]。
⑤蛋白质分离纯化技术与基因组测序技术相结合,从而为蛋白组学的开发和应用提供了准确的基因序列编码框架,使人类的研究重点集中在应用蛋白组学的研究上,并发现新的早期诊断和早期监测的生物标志物,更加充分地了解疾病进程,加速药物研究的发展[6]。该技术主要包括色谱技术、抗体工程和蛋白质工程。
3 结语
综上所述,当前分子生物学技术在医学检验领域中受到普遍认可,规范运用分子生物技术可明显减少医学检验程序中交叉污染的有关问题,同时,能够提升医学检验操作的整体效率,使医学检验的灵敏度、特异度、精确度得到提升,未来的发展前景良好。